本发明提供准确快速检出艰难梭菌毒素B的RPA引物及包含所述引物的试剂盒和艰难梭菌毒素B的检测方法,进而通过检测艰难梭菌毒素B筛查艰难梭菌致病菌,以及用于艰难梭菌双重检测的RPA引物组及其试剂盒和同时检测艰难梭菌及艰难梭菌毒素B的检测方法,通过构建艰难梭菌双重RPA检测试剂盒一步鉴定被艰难梭菌致病菌株污染的样品,以便用于基层和野外疑似样品的现场诊断。本发明通过检测艰难梭菌毒素B而快速检出艰难梭菌致病菌的RPA引物包括CDB上游引物SEQ ID No.1和CDB下游引物SEQ ID No.2,艰难梭菌双重RPA检测引物组还包括CD上游引物SEQ ID