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[发明专利]一种结核分枝杆菌全基因组ORF克隆文库的构建方法及应用-CN200910061066.0有效
发明人：何正国;王毅 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2009-03-11 - 公布日： 2009-09-23 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明属于微生物基因工程技术领域，具体涉及一种结核分枝杆菌H37Rv全基因组ORF细菌双杂交克隆文库的构建方法及应用。本发明的特征是，制备了一个适用于构建结核分枝杆菌H37Rv全基因组ORF克隆文库的细菌双杂交载体pTRG-MCMΔ，利用PCR反应获得结核分枝杆菌H37Rv的全部编码基因，通过将结核分枝杆菌H37Rv的全部编码基因精确克隆到本发明构建的细菌双杂交载体pTRG-MCMΔ中，转化大肠杆菌DH10B，得到结核分枝杆菌H37Rv全基因组ORF细菌双杂交克隆文库。
一种结核分枝杆菌基因组 orf 克隆文库构建方法应用

[发明专利]细菌双杂交纳米抗体筛选系统及其构建方法和应用-CN201910145037.6在审
发明人：汪洋;杨慕晗;程鑫茹;李晓波;王玉琪;连慧慧 -专利权人：南京理工大学
申请日： 2019-02-27 - 公布日： 2019-06-25 - 主分类号： C07K16/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种细菌双杂交纳米抗体筛选系统及其构建方法和应用。所述的细菌双杂交纳米抗体筛选系统由含有LexAWT基因元件的pMHA2质粒和含有LexA408基因元件的pMHN2质粒组成。本发明的细菌双杂交纳米抗体筛选系统能够快速、高效、准确地筛选给定抗原的纳米抗体。
纳米抗体细菌双杂交筛选系统构建基因元件质粒终止密码子半胱氨酸合成文库简并引物抗原抗体随机碱基阳性筛选密码子抑制子抗原嵌合应用激活筛选基因引入

[发明专利]新疆野扁桃酵母双杂交质粒的构建方法-CN201610597749.8在审
发明人：曾斌;关鹏;刘梦雯;王建友;夏江宏 -专利权人：新疆农业大学
申请日： 2016-07-27 - 公布日： 2016-09-21 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及一种新疆野扁桃酵母双杂交质粒的构建方法，该方法将花粉自交不亲和决定因子编码基因SFB插入酵母双杂交质粒pGBKT7，将花柱自交不亲和决定因子编码基因S‑RNase插入酵母双杂交质粒目前尚无针对新疆野扁桃自交不亲和性决定因子间相互作用的研究，我们首次构建了新疆野扁桃酵母双杂交质粒，所构建质粒适用于新疆野扁桃的酵母双杂交分子互作实验。
新疆扁桃酵母双杂交质粒构建方法

[发明专利]一种检测地中海贫血基因突变的探针、引物及试剂盒-CN201710260742.1有效
发明人：曲玲;刘福平;未纪涛;李印淑;刘晶晶 -专利权人：亚能生物技术（深圳）有限公司
申请日： 2017-04-20 - 公布日： 2021-05-18 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明涉及一种荧光不对称PCR‑熔点分析法检测地贫基因的探针，所述探针为双杂交探针，所述双杂交探针包括：检测缺失型α‑地贫的双杂交探针，其对应寡核苷酸序列SEQ ID No：1‑14；检测非缺失型α‑地贫的双杂交探针，其对应寡核苷酸序列SEQ ID No：15‑26；检测β‑地贫的双杂交探针，其对应寡核苷酸序列SEQ ID No：27‑48。
一种检测地中海贫血基因突变探针引物试剂盒

[发明专利]一种定量检测蛋白质相互作用强度的方法-CN201610474048.5在审
发明人：吴丽娜;汪旭;颜晓梅 -专利权人：厦门大学
申请日： 2016-06-24 - 公布日： 2016-08-24 - 主分类号： G01N33/533 文献下载
摘要：本发明公开了一种定量检测蛋白质相互作用强度的方法，引入相对报告因子表达量，结合流式细胞检测技术与细菌双杂交系统，实现了蛋白质相互作用强度的定量检测。
一种定量检测蛋白质相互作用强度方法

[发明专利]一种细菌单杂交载体及制备方法-CN200910060524.9有效
发明人：何正国;郭曼曼;冯辉 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2009-01-15 - 公布日： 2009-07-08 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及基因工程技术领域，目的在于构建一种细菌单杂交载体，该载体被命名为pBXcmT，它的核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示，其分子量为3794563Da。本发明的载体的突出优点在于：与现有的细菌双杂交商业化基因文库、报告菌株以及试验试剂等完全相容，特别是它整合有TA克隆，能够方便快捷地用于短的调控核苷酸序列的快速克隆。这种细菌单杂交载体在鉴定和筛选DNA-蛋白质相互作用中具有广泛的应用前景。
一种细菌杂交载体制备方法

[发明专利]一种构建细菌的酵母双杂交cDNA文库的方法-CN201510046952.1在审
发明人：张嘉;朱春节;许玫英;孙国萍;郭俊 -专利权人：广东省微生物研究所
申请日： 2015-01-29 - 公布日： 2015-05-27 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明公开了一种酵母双杂交cDNA文库的方法。它是提取细菌总RNA，再去除总RNA中的5s rRNA、tRNA及小分子RNA，再对mRNA进行富集，使用随机六聚体作为引物对富集的mRNA进行逆转录PCR合成单链的cDNA，再通过LD-PCR以单链的cDNA为模板扩增获得双链cDNA，再利用同源重组将全长双链cDNA与文库载体共同转化靶蛋白酵母菌株，获得细菌的cDNA文库。本发明提出了一种以细菌mRNA作为模板，反转录合成cDNA后构建酵母双杂交cDNA文库的方法。由于是以mRNA为模板，不仅避免了以总RNA反转录时rRNA产生干扰，也可以避免使用限制性内切酶对细菌基因组DNA的位点偏向性，文库的开放性阅读框的正确性更高，质量非常好。
一种构建细菌酵母双杂交 cdna 文库方法

[发明专利]一种双杂交酵母及检测环境污染物类/抗盐皮质激素活性的方法-CN201810959691.6有效
发明人：张剑云;刘璟 -专利权人：浙江大学
申请日： 2018-08-17 - 公布日： 2020-10-30 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开一种双杂交酵母及检测环境污染物类/抗盐皮质激素作用的方法，(1)构建含有pGBKT7‑MR酵母表达质粒和pGADT7‑TIF2酵母表达质粒的双杂交酵母；(2)将所得双杂交酵母与盐皮质激素标准品共培养，检测报告基因表达的酶的酶活性，以酶活性对盐皮质激素标准品浓度绘制标准曲线；(3)相同条件下将待测环境污染物与所得双杂交酵母共培养，将所得酶活性带入所述标准曲线中，计算所得的盐皮质激素标准品剂量即为环境污染物的类盐皮质激素剂量本发明的目的在于构建一种能同时表达盐皮质激素受体和受体共激活因子的双杂交酵母，并在此基础上建立一种快速、经济的检测环境污染物对盐皮质激素受体干扰活性的生物测试方法。
一种双杂交酵母检测环境污染物类皮质激素活性方法

[发明专利]一种羊皮肤组织酵母cDNA文库及其构建方法-CN201811555952.4在审
发明人：李有文;张雪萍;米丽开姆·托合提尼亚改;童建军;何川川 -专利权人：塔里木大学
申请日： 2018-12-19 - 公布日： 2019-04-26 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明方法包括：提取羊痘病羊皮组织总RNA；从所述总RNA中分离出mRNA；构建酵母双杂交文库；鉴定所述酵母双杂交文库的质量；提取所述酵母双杂交文库的质粒，并将文库保存。
酵母双杂交文库皮肤组织构建酵母总RNA 生物技术领域病例提供酵母文库文库质粒羊皮质粒文库筛选保存研究

[发明专利]一种高效的酵母双杂交三框文库构建技术-CN202011504232.2在审
发明人：李昆鹏;李敏 -专利权人：武汉金开瑞生物工程有限公司
申请日： 2020-12-17 - 公布日： 2021-03-30 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及一种高效的酵母双杂交三框文库构建技术，包括用于高效酵母双杂交三框文库构建的重组载体，所述重组载体有三种，所述三种重组载体是在原始PGADT7载体分别插入碱基序列1、碱基序列2和碱基序列3构建而成还包括上述载体的构建方法及利用上述载体构建酵母双杂交三框文库的构建方法。本发明通过重组载体构建酵母双杂交三框文库，能够有效降低假阴性率，并且成本较为低廉。
一种高效酵母双杂交文库构建技术

[发明专利]基于酵母双杂交系统验证连翘FsWRKY4/FsMAPK3蛋白互作的方法-CN202310019862.8在审
发明人：侯典云;张佳琪;吕淑芳;郭菡;刘浩;王婷 -专利权人：河南科技大学
申请日： 2023-01-06 - 公布日： 2023-04-25 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及基于酵母双杂交系统验证连翘FsWRKY4/FsMAPK3蛋白互作的方法，即通过酵母双杂交验证两蛋白互作，过程为：克隆获得连翘FsWRKY4、FsMAPK3基因序列，并通过一步克隆法构建酵母双杂交猎物载体pGADT7‑FsWRKY4、随后进行酵母毒性检测和酵母自激活检测，最后通过酵母双杂交验证连翘FsWRKY4/FsMAPK3蛋白互作，可为中药材连翘提供丰富基因资源，为深入研究WRKY转录因子调控次生代谢物合成途径的分子机制以及分子植物育种提供有益参考
基于酵母双杂交系统验证连翘 fswrky4 fsmapk3 蛋白方法

[发明专利]酵母双杂交载体、构建方法及其在蛋白互作中的应用-CN201911243165.0在审
发明人：言普;沈文涛;庹德财;黎小瑛;周鹏 -专利权人：中国热带农业科学院热带生物技术研究所
申请日： 2019-12-06 - 公布日： 2020-03-06 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，特别涉及酵母双杂交载体、构建方法及其在蛋白互作中的应用。该酵母双杂交载体包括：pNC‑GADT7载体和pNC‑GBKT7载体；所述pNC‑GADT7载体于pGADT7载体的克隆位点处插入Nimble Cloning克隆框；所述pNC‑GBKT7载体于pGBKT7该Nimble Cloning的酵母双杂交载体，以方便目标基因克隆到载体。具有操作简单、克隆效率高、可标准化克隆等优点。
酵母双杂交载体构建方法及其蛋白中的应用

[发明专利]鉴定并验证亲和试剂的方法-CN201680022883.3在审
发明人： M.维纳;V.巴西吉纳 -专利权人：艾希奥美公司
申请日： 2016-02-12 - 公布日： 2018-03-27 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明的方法主要涉及通过例如细菌（例如大肠杆菌（E.coli））上的噬菌体展示来筛选抗体文库，从而鉴定能够结合期望靶多肽的特定抗体克隆。以此方式鉴定的克隆可随后利用酵母双杂交进行验证。验证过的克隆可通过另外几轮噬菌体展示和/或酵母双杂交进一步进行筛选。在每轮之间，可产生并筛选特定抗体克隆的另外的变体以鉴定表现出对所关注的靶具有更高结合亲和力的变体。
鉴定验证亲和试剂方法

[发明专利]一种基于膜体系-酵母双杂交发现膜蛋白的方法-CN202111349955.4在审
发明人：朱也 -专利权人：南京瑞源生物技术有限公司
申请日： 2021-11-15 - 公布日： 2022-03-22 - 主分类号： C12N15/81 文献下载
摘要：本发明涉及膜蛋白实验技术领域，且公开了一种基于膜体系‑酵母双杂交发现膜蛋白的方法，一种基于膜体系‑酵母双杂交发现膜蛋白的方法，包括以下材料诱饵克隆：pBT3‑STE‑A、诱饵载体：pBT3‑STE、文库酵母质粒：草膜文库、Clontech酵母双杂交系统、培养基、贮备液。该基于膜体系‑酵母双杂交发现膜蛋白的方法，通过将诱饵质粒转化受体菌NMY51中及其自激活检测、文库筛选、筛库结果、酵母阳性克隆鉴定及测序比对与测序比对结果、酵母阳性克隆鉴定及测序比对与测序比对结果、酵母阳性克隆回转验证等步骤
一种基于体系酵母双杂交发现膜蛋白方法

[发明专利]一种新的酵母双杂交方法及其应用-CN201110113663.0无效
发明人：周荣家;程汉华;陈述亮 -专利权人：武汉大学
申请日： 2011-05-04 - 公布日： 2011-10-19 - 主分类号： C12N1/19 文献下载
摘要：本发明公开了一种新的的酵母双杂交方法，该方法通过降低低丰度基因丢失率的文库扩增、酵母菌快速转化质粒、逐渐提高选择压筛选蛋白质互作并判断相互作用的强弱程度和富集表达β-半乳糖苷酶而发现弱互作的蛋白质。本方法操作简单，假阳性和假阴性少，采用本系统的酵母双杂交方法，不仅能够发现新的相互作用蛋白质，而且能够筛选到已知的阳性克隆。本发明公开的酵母双杂交方法可用于基因的新功能分析和相互作用网络图谱的绘制。
一种酵母双杂交方法及其应用

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