本发明实施例提供一种检测真菌的引物组、探针组、试剂盒、用途及检测方法,它包括:用于检测包括曲霉属真菌、青霉属真菌和/或镰刀菌属真菌的引物对:序列如SEQ ID NO.1所示的正向引物1和SEQ ID NO.2所示的反向引物1;用于检测包括念珠属真菌、隐球菌属真菌、新生隐球菌属真菌、酵母属真菌、毛霉属真菌和/或地霉属真菌的引物对:序列如SEQ IDNO.4所示的正向引物2A;序列如SEQ ID NO.5所示的正向引物可同时检测包含念珠属真菌、青霉属真菌、曲霉属真菌、镰刀菌属真菌、新型隐球菌属真菌、隐球菌属真菌、酵母属真菌、毛霉属真菌、耶氏肺孢子菌等真菌,涵盖范围较现有技术更广。