本发明属基因工程领域，涉及人溶菌酶蛋白活性多肽，具体涉及一种人源溶菌酶蛋白LYC9及其制备方法和用途。本发明基于现有技术的溶菌酶蛋白来源于其他种属动物机体,对人体而言是异种蛋白,有很强的抗原性,副作用大等现状，提供了制备人溶菌酶的新方法。本发明的方法能在酵母中高效表达人体中的溶菌酶蛋白,解决异源性溶菌酶用于人体内的抗原性问题；同时所涉及的人源溶菌酶其溶菌酶活性较高,分离纯化步骤简单。本发明还提供了一种产生具有人溶菌酶蛋白活性的多肽的方法,包括:将SEQ ID N0:1所示序列连于表达调控序列后转入宿主细胞,筛选出表达人溶菌酶蛋白的重组细胞；随后高密度培养。
本发明属于生物医药和基因工程技术领域，涉及一种生产猪源溶菌酶蛋白的新的DNA序列。更具体的本发明提供了一种产生具有猪源溶菌酶蛋白活性的多肽的方法,将含有核苷酸序列如SEQ ID N0:3所示的DNA可操作地连于表达调控序列,形成猪源溶菌酶蛋白表达载体；表达、分离出具有猪源溶菌酶活性的蛋白使用本方法获得的猪源溶菌酶的溶菌酶活性较高,本发明针对目前市场上的溶菌酶蛋白大部分来源于从鸡蛋提取鸡源溶菌酶,在猪的饲养方面，重组猪源溶菌酶具有成本低、安全性高等优势，提供了相对简单的生产方法,为猪源溶菌酶蛋白的工业化生产提供了一个高效的生产工艺
本发明属于生物医药和基因工程技术领域，涉及一种生产牛肠源溶菌酶蛋白的新的DNA序列。更具体的本发明提供了一种产生具有牛肠源溶菌酶蛋白活性的多肽的方法,将含有核苷酸序列如SEQ ID N0:3所示的DNA可操作地连于表达调控序列,形成牛肠源溶菌酶蛋白表达载体；表达、分离出具有牛肠源溶菌酶活性的蛋白使用该方法生产的牛肠源溶菌酶其溶菌酶活性较高，同时应用本发明的生产方法分离纯化步骤简单易行，为牛肠源溶菌酶蛋白的工业化生产提供了一个高效的生产工艺。针对目前市场上的溶菌酶蛋白大部分来源于从鸡蛋中提取的鸡源溶菌酶，本发明的重组牛肠源溶菌酶具有成本低、安全性高等优势。
本发明属基因工程领域,涉及生产人溶菌酶的新方法。本发明基于目前市场上的溶菌酶蛋白来源于其他种属动物机体,对人体而言是异种蛋白,有很强的抗原性,副作用大的现状，提供了生产人溶菌酶的新方法，该方法能在酵母中高效表达人体中的溶菌酶蛋白,解决异源性溶菌酶用于人体内的抗原性问题；同时本发明涉及的人源溶菌酶其溶菌酶活性较高,并可使用相对简单的分离纯化步骤。本发明还提供了一种产生具有人溶菌酶蛋白活性的多肽的方法,包括如下步骤:将SEQ ID N0:1所示序列连于表达调控序列,然后转入宿主细胞,筛选出表达人溶菌酶蛋白的重组细胞；随后高密度培养。
本发明公开了一种家蝇天蚕素-人溶菌酶融合蛋白及其制备方法和应用。本发明家蝇天蚕素-人溶菌酶融合蛋白的序列如SEQ ID No.1所示。该融合蛋白包含家蝇天蚕素的成熟肽序列，多肽接头序列和人溶菌酶的成熟肽序列。本发明根据家蝇天蚕素和人溶菌酶基因序列，以大肠杆菌偏爱密码子设计合成引物，通过重叠延伸拼接(SOE)法进行PCR扩增，得到融合蛋白基因序列以构建重组原核表达质粒，再将其转入宿主细胞，获得表达融合蛋白的工程菌，经过发酵培养和分离纯化，得到本发明家蝇天蚕素-人溶菌酶融合蛋白。本发明融合蛋白融合了家蝇天蚕素和人溶菌酶各自的特点，具有较为明显的抑菌、抗菌活性，可用于制备抗菌或抑菌的药物，有广阔的应用前景。
