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[发明专利]一种淋巴细胞免疫分型的方法和试剂盒-CN201410486089.7有效
发明人：赵晓东;周丽娜 -专利权人：重庆医科大学附属儿童医院
申请日： 2014-09-22 - 公布日： 2015-02-18 - 主分类号： G01N33/53 文献下载
摘要：本发明属于免疫学技术领域，公开了一种淋巴细胞免疫分型的方法和试剂盒。本发明提供的淋巴细胞免疫分型的方法，包括：T淋巴细胞免疫分型和B淋巴细胞免疫分型；T淋巴细胞免疫分型包括：取不同的荧光标记的抗体，与待检测样品混合，孵育后，经流式细胞术检测，得检测数据，分析所述检测数据；B淋巴细胞免疫分型包括：取不同的荧光标记的抗体，与新的所述待检测样品混合，孵育后，经流式细胞术检测，得检测数据，分析所述检测数据。本发明的方法实现了对淋巴细胞进行更加全面的精细免疫分型，所需待测样品少，操作简单、所需时间短、准确性高、可广泛应用于淋巴细胞亚群免疫分型。
一种淋巴细胞免疫方法试剂盒

[发明专利]一种淋巴细胞永生化的构建方法-CN202211037387.9在审
发明人：杨国华;程亚婷;狄鹤仙;李颖;陈志毅;林宝怡;邵彤 -专利权人：武汉百翼生物科技有限公司
申请日： 2022-08-26 - 公布日： 2022-10-14 - 主分类号： C12N5/0781 文献下载
摘要：本发明公开了一种淋巴细胞永生化的构建方法，涉及生物技术领域。所述方法包括：将EBV悬液和环孢菌素A加入到外周血淋巴细胞中，混合均匀后放入培养箱中培养，即得永生化的淋巴细胞。本发明通过EBV悬液转化外周血B淋巴细胞，使之永生化，并通过环孢菌素A抑制血液中T淋巴细胞的活性，能极大的提高永生化淋巴细胞的构建成功率。同时，本发明通过探索不同稀释比例的外周血与淋巴细胞分离液的体积比，确定了最大成功率时，稀释血与淋巴细胞分离液的体积，为进一步构建淋巴细胞的永生化方法提供参考。
一种淋巴细胞永生构建方法

[发明专利]一种利用外泌体制备嵌合抗原受体T淋巴细胞的方法-CN201910672934.2有效
发明人：鲍会静 -专利权人：天津市中西医结合医院（天津市南开医院）
申请日： 2019-07-24 - 公布日： 2021-06-29 - 主分类号： C12N5/10 文献下载
摘要：本发明提供了一种利用外泌体制备嵌合抗原受体T淋巴细胞的方法，其包括：(1)获得对象的T淋巴细胞；(2)将所述T淋巴细胞培养后，提取外泌体；其后所述T淋巴细胞继续培养，得到T淋巴细胞培养物A；(3)用表达抗原嵌合受体的质粒转染所述外泌体，得到含CAR质粒的外泌体；(4)将(3)中的所述含CAR质粒的外泌体与(2)中的所述T淋巴细胞培养物A混合并培养，培养后得到所述抗原嵌合受体T淋巴细胞。本发明还提供了一种外泌体，根据前述方法制备的抗原嵌合受体T淋巴细胞，以及前述抗原嵌合受体T淋巴细胞在制备用于治疗癌症的药物中的用途。
一种利用体制嵌合抗原受体淋巴细胞方法

[发明专利]一种非诊断目的检测淋巴细胞增殖情况的方法及其试剂盒-CN201410786994.4在审
发明人：赵晓东;秦涛 -专利权人：重庆医科大学附属儿童医院
申请日： 2014-12-17 - 公布日： 2015-03-25 - 主分类号： G01N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及细胞增殖检测领域，特别涉及一种非诊断目的检测淋巴细胞增殖情况的方法及其试剂盒。该方法包括：将第一待测血液样本与淋巴细胞多克隆激活剂混合，经细胞培养，获得第一血液细胞；将荧光标记的淋巴细胞表面标记抗体与第一血液细胞进行孵育，裂解红细胞，加入绝对计数用微球，采用流式细胞术检测淋巴细胞数量和绝对计数用微球数量，根据淋巴细胞数量、绝对计数用微球数量和绝对计数用微球浓度获得刺激组淋巴细胞的浓度。本发明不仅可检测淋巴细胞各亚群的增殖比例，还可检测淋巴细胞各亚群增殖的绝对值，可准确反应淋巴细胞的增殖情况；使用全血进行增殖实验，不需要分离PBMC，血标本量要求很小；操作步骤简易，耗时短，误差较小。
一种诊断目的检测淋巴细胞增殖情况方法及其试剂盒

[发明专利]一种淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统-CN202111185622.2在审
发明人：田沂;蒋永芳;李异;周宁;彭锋 -专利权人：中南大学湘雅二医院
申请日： 2021-10-12 - 公布日： 2022-01-04 - 主分类号： A61M1/16 文献下载
摘要：本发明公开了一种淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统，包括：血液分离模块，免疫调控模块，透析滤过模块和回输模块；其中，免疫调控模块用于采用干细胞培养液培养且免疫调控血液分离模块分离出的淋巴细胞，透析滤过模块用于对免疫调控模块排出的淋巴细胞混合液进行透析滤过。上述淋巴细胞分离、经干细胞免疫调控及净化回输系统，利用培养干细胞的干细胞培养液体外培养并免疫调控淋巴细胞，利用透析滤过模块对淋巴细胞进行净化，去除分离淋巴细胞时输入的枸橼酸盐、进入体内的多余水分、以及干细胞培养液，提高了被免疫调控后的淋巴细胞回输至体内的安全性，减小了不良反应和顾虑，提高了安全性，有效推广了免疫细胞调控治疗。
一种淋巴细胞分离干细胞免疫调控净化系统

[发明专利]用于在血液中或在富集PBMC中基因修饰淋巴细胞的方法和组合物-CN201980067120.4在审
发明人：格雷戈里·伊恩·弗罗斯特;詹姆斯·约瑟夫·奥努弗;法扎德·哈里扎德;弗雷德里克·维甘特;阿尼邦·昆都 -专利权人：埃克苏马生物技术公司
申请日： 2019-09-02 - 公布日： 2021-12-24 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本公开提供用于以比以前更短的时间和/或在全血或其组分中基因修饰淋巴细胞，例如T细胞和/或NK细胞的方法和组合物。在一些实施例中，在形成淋巴细胞与重组反转录病毒颗粒在闭合系统中接触的反应混合物之前或之后使用淋巴细胞耗减过滤器总成，以基因修饰淋巴细胞。
用于血液富集 pbmc 基因修饰淋巴细胞方法组合

[发明专利]一种抑制WT1基因突变的生物制剂制备技术-CN201710769228.0在审
发明人：王丽敏 -专利权人：海南诺倍尔生态医学科学研究院有限公司
申请日： 2017-08-31 - 公布日： 2019-03-05 - 主分类号： A61K39/395 文献下载
摘要：本申请公开了一种抑制WT1基因突变的生物制剂的制备方法，包括：从人体血液中分离出T淋巴细胞；将T淋巴细胞放置于培养液中进行扩增培养；将培养好的T淋巴细胞与细胞株放在培养瓶中进行驯化；将细胞株驯化好T淋巴细胞与癌细胞一起进行测试，当T淋巴细胞具有攻击癌细胞的能力后，进行分离；将分离出的T淋巴细胞与WT1基因进行混合测试，驯化后的T淋巴细胞具有抵制WT1基因突变的能力；再次将这些具备抵制攻击能力的T淋巴细胞从培养液中分离，与人体免疫球蛋白一起制成活性制剂本发明的优点是：从源头上抑制WT1基因的突变，阻止癌细胞的产生，可以有效预防癌症，预防效果达到95％以上，结果更加准确。
突变驯化癌细胞培养液生物制剂细胞株制备人体免疫球蛋白测试活性制剂扩增培养密封冷藏人体血液有效预防培养瓶抵制攻击癌症预防源头申请

[发明专利]从去白细胞滤器里分离淋巴细胞的方法-CN201410232725.3无效
发明人：蒋宇扬;陈妍 -专利权人：深圳市坤健创新药物研究院;清华大学深圳研究生院
申请日： 2014-05-29 - 公布日： 2014-08-13 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明提供了一种从去白细胞滤器里分离淋巴细胞的方法，包括以下步骤：获取PBS、白细胞和部分血液的混合液；弃去血浆，向弃去血浆的细胞混合液中加入磷酸缓冲液，小心混匀形成混合液；将混合液小心叠加于细胞分离液上离心，收集第二层细胞放入磷酸缓冲液中，充分混匀后，离心，弃去上清留沉淀,然后重复洗涤,最后沉淀得到所分离的外周血单个核细胞；将所分离的外周血单个核细胞培养于37℃，5％CO₂培养箱，过夜培养后，收集悬浮的淋巴细胞。本发明提供的从去白细胞滤器中分离淋巴细胞的方法，不仅可以避免淋巴细胞的浪费，而且对红细胞，血小板等其它成分不会造成影响，用此分离方法得到的淋巴细胞数量可达1×10⁶，存活率大于90
白细胞滤器分离淋巴细胞方法

[发明专利]一种非治疗目的的恢复浸润性T淋巴细胞免疫功能的方法-CN201811307212.9在审
发明人：胡安斌;刘芙蓉;凌象超 -专利权人：中山大学附属第一医院
申请日： 2018-11-05 - 公布日： 2019-02-01 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明提供了一种非治疗目的的恢复浸润性T淋巴细胞免疫功能的方法，属于T淋巴细胞受体技术领域，包括：将免疫功能受损的浸润性T淋巴细胞溶液与阻断剂混合，得到含有阻断剂的溶液；所述阻断剂包括anti‑Tim‑3阻断抗体和/或anti‑PD‑1阻断抗体；含有阻断剂的溶液与anti‑CD3抗体、anti‑CD28抗体混合后进行培养，得到培养物；将培养物与布雷非德菌素A混合、孵育，得到免疫功能恢复的浸润性T淋巴细胞采用本发明提供的方法能够将免疫功能受损的浸润性T淋巴细胞的免疫功能恢复。
浸润性免疫功能阻断剂免疫功能恢复非治疗培养物抗体受损受体技术孵育恢复

[发明专利]一种基于3D打印的T淋巴细胞扩增方法-CN202010359007.8有效
发明人：孙伟;庞媛;周珍珍 -专利权人：清华大学;上普博源(北京)生物科技有限公司
申请日： 2020-04-29 - 公布日： 2022-07-12 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明涉及T淋巴细胞扩增方法，尤其涉及一种基于3D打印的T淋巴细胞扩增方法。该方法包括提供功能化处理的生物墨水；所述功能化处理的生物墨水包括生物墨水本体，以及结合了IL‑2、CD3抗体和CD28抗体的微载体；将T淋巴细胞与所述功能化处理的生物墨水混合，进行3D打印；将3D打印所得含T淋巴细胞的3D结构进行培养。本发明方法可以解决传统的T淋巴细胞扩增方法细胞增殖空间受限及无法对细胞的增殖形成持续、可控的刺激的技术问题，从而实现快速扩增T淋巴细胞。
一种基于打印淋巴细胞扩增方法

[发明专利]一种去除调节性T细胞的肿瘤疫苗的制备方法-CN201910368816.2在审
发明人：陈忠平 -专利权人：朗姿赛尔生物科技(广州)有限公司
申请日： 2019-05-05 - 公布日： 2019-08-30 - 主分类号： A61K39/00 文献下载
摘要：本发明涉及肿瘤疫苗生产领域，提供一种去除调节性T细胞的肿瘤疫苗的制备方法，用于解决调节性T细胞导致肿瘤疫苗效果下降的问题。本发明提供的一种去除调节性T细胞的肿瘤疫苗的制备方法，包括：向T淋巴细胞群内加入经过改性的纳米氧化钨颗粒，所述纳米氧化物颗粒同T淋巴细胞群的重量比为1:100~500，在可见光下照射3~10min；将经过照射的T淋巴细胞群通过磁性分选，获取CD8+T淋巴细胞；将致敏的DC细胞和分选出的CD8+T淋巴细胞混合培养，携带肿瘤抗原的DC细胞将抗原信息提呈给CD8+T淋巴细胞并使之活化，得到特异性肿瘤疫苗。筛选出T淋巴细胞群后，通过加入纳米氧化钨颗粒以及磁性分选，充分的去除调节性T细胞，以提高肿瘤疫苗的杀瘤效果。
肿瘤疫苗调节性T细胞去除制备纳米氧化钨磁性分选照射纳米氧化物颗粒特异性肿瘤混合培养抗原信息肿瘤抗原可见光重量比改性活化致敏疫苗筛选携带

[发明专利]一种双壳贝类血淋巴细胞单细胞悬液的制备方法-CN202211043715.6在审
发明人：胡晓丽;王慧贞;张艺涵;刘诗琪;原京瑶;包振民 -专利权人：中国海洋大学
申请日： 2022-08-30 - 公布日： 2022-09-30 - 主分类号： C12N5/07 文献下载
摘要：本发明公开了一种双壳贝类血淋巴细胞单细胞悬液的制备方法。该制备方法包括：选取双壳贝类并收集其血淋巴；测定血淋巴中血浆的渗透压，并调整缓冲液的渗透压，使得两者渗透压相同；将收集的血淋巴离心，收集细胞沉淀一；将缓冲液加入到所述细胞沉淀中，进行吹吸以重悬细胞得到细胞混合液一；将所述细胞混合液一离心，收集细胞沉淀二；将所述细胞沉淀二重复以上，得到细胞混合液二；将所述细胞混合液二离心，收集细胞沉淀三；将所述细胞沉淀三重复以上，得到细胞混合液三；将所述细胞混合液三进行细胞滤器过滤，最终获得双壳贝类血淋巴细胞单细胞悬液。本发明无需配置血淋巴抗凝剂，能够低成本、快速、高效地获得双壳贝类血淋巴细胞单细胞悬液。
一种贝类淋巴细胞单细胞制备方法

[发明专利]一种脐带血淋巴细胞制剂的制备方法-CN202210190947.8在审
发明人：庄盼;薛玲玲;张佩瑶 -专利权人：浙江卫未生物医药科技有限公司
申请日： 2022-02-28 - 公布日： 2022-05-06 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及免疫系统技术领域，具体涉及一种脐带血淋巴细胞制剂的制备方法，通过免疫细胞与干细胞进行共培养，能够诱导淋巴细胞与脐带血间充质干细胞、脐带血淋巴细胞进行相互作用，淋巴细胞能够促进脐带血淋巴细胞分泌细胞因子，且脐带血淋巴细胞具有较好的增殖分化的作用，从而能够提高活性细胞因子的产，且脐带血淋巴细胞为未分化的淋巴细胞，其活性较强，分泌活性细胞因子的能力也较强，因此提取得到的细胞因子的活性相较于成体的外周淋巴细胞更好，且通过脐带血淋巴细胞能够对淋巴细胞进行调节，能够减少炎性细胞因子的数量。
一种脐带血淋巴细胞制剂制备方法

[发明专利]一种新型的原发性肝癌肿瘤浸润淋巴细胞的培养及体外扩增方法-CN202110292616.0在审
发明人：王战会;谢诗;燕蓉 -专利权人：南方医科大学南方医院
申请日： 2021-03-18 - 公布日： 2021-06-22 - 主分类号： C12N5/0783 文献下载
摘要：本发明属于生物技术领域，具体为一种新型的原发性肝癌肿瘤浸润淋巴细胞的培养及体外扩增方法，包括如下步骤：步骤1：将肝癌组织标本的表面清洗并去除脂肪组织；步骤2：将组织剪成小块接种到孔板中并采用初级培养基培养；步骤3：待肿瘤浸润淋巴细胞爬出孔板达一定数量后，将肿瘤浸润淋巴细胞和饲养细胞混合接种并加入加入全培养基中培养；步骤4：培养至饲养细胞至少部分死亡后，收集细胞冻存，得到肿瘤浸润淋巴细胞。该方法快速可靠且性价比高，经过本发明的方法能够在较短时间内获得足够数目的淋巴细胞，同时这些淋巴细胞亦具有相当的活力，可用于ACT等细胞治疗，为CAR‑T、TCR‑T等治疗方法提供良好基础。
一种新型原发性肝癌肿瘤浸润淋巴细胞培养体外扩增方法

[发明专利]血液分析装置及血液分析方法-CN201080029989.9有效
发明人：河野麻理;高木由里;朝田祥一郎 -专利权人：希森美康株式会社
申请日： 2010-06-30 - 公布日： 2012-05-23 - 主分类号： G01N33/49 文献下载
摘要：本发明提供一种血液分析装置和血液分析方法，该装置和方法能够在不使用荧光标记抗体的情况下，获取B淋巴细胞和T淋巴细胞的相关信息。本发明的血液分析装置具有：血样供应部件；试样制备部件，该试样制备部件混合所述血样供应部件供应的血样、溶血剂和用于染色核酸的荧光色素，在不使用荧光标记抗体的情况下制备测定试样；光源；第一检测器，用于检测荧光；第二检测器，用于检测散射光；信息处理系统，根据荧光强度和散射光强度，分类淋巴细胞，根据分类后淋巴细胞的荧光强度，获取B淋巴细胞和T淋巴细胞的相关信息。
血液分析装置方法

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