本发明公开了一种杜梨硝酸盐转运蛋白基因Pbr0335,所述硝酸盐转运蛋白基因Pbr0335的全长基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了一种杜梨硝酸盐转运蛋白基因Pbr0335的特异性片段,所述基因Pbr0335的特异性片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。本发明还公开了一种杜梨硝酸盐转运蛋白基因Pbr0335的VIGS沉默体系及其构建方法,本发明通过在特异性引物中引入BamH I酶切位点和Kpn I酶切位点,采用烟草脆裂病毒载体TRV构建杜梨Pbr0335基因沉默体系,有效降低了杜梨Pbr0335基因的表达水平,并使其能够在杜梨植株内进行系统扩散传播,为杜梨功能基因组学研究提供技术支撑。
本发明提供了杜梨泛素连接酶基因、编码蛋白及其在植物抗旱遗传改良中的应用,属于分子生物学技术领域。杜梨泛素连接酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。一种编码所述杜梨泛素连接酶的基因PbPUB21核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明利用农杆菌介导的遗传转化方法转化模式植物,使杜梨泛素连接酶基因在拟南芥中超表达,获得的转基因植株具有调控拟南芥的抗旱性的功能。同时通过病毒诱导基因PbPUB21沉默杜梨幼苗,与对照野生型相比抗旱能力下降,表明杜梨泛素连接酶及其对应的编码基因的存在具有提高植物抗旱能力的生物学功能。