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[发明专利]杆状病毒载体-CN200980144325.4有效
发明人： P·罗伊;R·J·诺德 -专利权人：伦敦卫生及热带医学学院
申请日： 2009-11-11 - 公布日： 2011-11-16 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明涉及用于将基因插入到杆状病毒序列的基因座中的转移载体。所述转移载体包括表达框，该表达框包括与基因可操作地连接的真核启动子，和双向选择框。本发明还涉及使用该转移载体及衍生的杆粒和杆状病毒的方法。
杆状病毒载体

[发明专利]重组杆状病毒和其应用及构建该重组杆状病毒的载体-CN201610172629.3有效
发明人：唐旭东;沈中元;徐莉;于洁 -专利权人：江苏科技大学
申请日： 2016-03-23 - 公布日： 2019-11-19 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明公开了一种重组杆状病毒和其应用及构建该重组杆状病毒的载体。所述载体包括杆状病毒表达供体质粒和外源蛋白融合表达载体，所述杆状病毒表达供体质粒以pFastBac1杆状病毒表达载体为骨架，在其多克隆位点连接有NEDD8基因；所述外源蛋白融合表达载体包括所述的杆状病毒表达供体质粒以及插入所述杆状病毒表达供体质粒的外源蛋白基因所述重组杆状病毒由所述的外源蛋白融合表达载体同源重组到杆状病毒基因组中并转染昆虫细胞得到。本发明利用NEDD8基因能够使杆状病毒外源目的蛋白如GFP表达量增加4倍以上。
重组杆状病毒应用构建载体

[发明专利]可快速测定滴度的杆状病毒表达载体及其构建和应用-CN201610847516.9有效
发明人：吴无畏;刘钰 -专利权人：广西壮族自治区药用植物园
申请日： 2016-09-23 - 公布日： 2020-03-17 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明公开了一种可快速测定滴度的杆状病毒表达载体，该载体命名为BacG，是在杆状病毒蛋白表达载体Bacmid bMON14272的基因组上非必需基因处插入由杆状病毒极早期启动子ie‑1调控的绿色荧光蛋白基因而获得该杆状病毒表达载体保留了Bacmid bMON14272完整的蛋白表达能力，同时由该杆状病毒表达载体生产的重组杆状病毒，其滴度可以通过在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白的表达来快速测定，使重组病毒滴度测定的时间缩短至
快速测定杆状病毒表达载体及其构建应用

[发明专利]一种可用于制作禽类疫苗的重组杆状病毒的制备方法-CN200610009656.5无效
发明人：楼庄伟;平文祥;葛菁萍;李盛贤;宋刚;凌宏志;高冬妮;张贺楠 -专利权人：黑龙江大学
申请日： 2006-01-23 - 公布日： 2006-07-26 - 主分类号： C12N7/01 文献下载
摘要：一种可用于制作禽类疫苗的重组杆状病毒的制备方法，它涉及一种重组杆状病毒的制备方法。它为制作出可防治禽类传染性疾病的重组杆状病毒疫苗奠定了物质基础。其制备方法：(一)构建含有CMV－IE启动子的载体；(二)构建带有CMV－IE启动子和外源基因的重组载体；(三)构建重组杆状病毒，收集病毒粒子测定病毒效价；(四)检测重组杆状病毒外源基因的表达；步骤(三)包括1.重组载体转化DH10Bac细胞；2.提取重组杆状病毒BacmidDNA；3.PCR扩增Bacmid DNA；4.Bacmid DNA转染Sf9细胞，获得重组杆状病毒；5.扩增重组杆状病毒；6.蚀斑试验；7.蚀斑纯化；8.收集重组杆状病毒粒子；9.测定重组杆状病毒效价。本发明为制作出可防治禽类传染性疾病的重组杆状病毒疫苗奠定了物质基础。
一种用于制作禽类疫苗重组杆状病毒制备方法

[发明专利]杆状病毒表达系统及其构建方法和应用-CN202010716613.0在审
发明人：施金秀;罗燕;林映君;蒙伟能;叶知晟;蓝田 -专利权人：云舟生物科技（广州）有限公司
申请日： 2020-07-23 - 公布日： 2020-10-23 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明涉及一种杆状病毒表达系统及其构建方法和应用，包括杆状病毒穿梭载体、辅助载体和供体载体；所述杆状病毒穿梭载体上含有Tn7靶位点和毒素蛋白基因表达盒；所述辅助载体上含有抗毒素蛋白基因表达盒，所述抗毒素蛋白能够与所述毒素蛋白结合从而中和所述毒素蛋白的毒性，所述辅助载体和所述供体载体的复制子均为温敏型复制子，所述供体载体包含转座子Tn7的左右侧翼序列。利用本发明的杆状病毒表达系统，可快速直接地提取得到一种能够直接用于下游杆状病毒包装的高纯度无污染的重组阳性杆状病毒载体。
杆状病毒表达系统及其构建方法应用

[发明专利]昆虫杆状病毒表达载体、构建方法及其应用-CN201610334911.7有效
发明人：沈鹤霄;华权高;马峰;徐春雷 -专利权人：武汉金开瑞生物工程有限公司
申请日： 2016-05-19 - 公布日： 2019-12-06 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明提供了昆虫杆状病毒表达载体、构建方法及其应用，所述昆虫杆状病毒表达载体包括含人抗体轻链Kappa保守区序列的昆虫杆状病毒表达载体I以及含人抗体重链IgG1保守区的昆虫杆状病毒表达载体II，所述表达载体I的序列如序列表SEQ ID 1所示，所述表达载体II的序列如序列表SEQ ID 2所示；还包括含α‑2，3‑唾液酸糖基转移酶ST3的昆虫杆状病毒表达载体III，所述表达载体III的序列如序列表SEQ所述昆虫杆状病毒表达载体可高效表达含重链和轻链的人源化抗体。
昆虫杆状病毒表达载体构建方法及其应用

[发明专利]一种猪IgG1 Fc重组杆状病毒作为猪用疫苗载体的制备方法-CN201510405146.9有效
发明人：杜恩岐;黄光东;刘阳坤;张小莺;张元元;肖龙;敬晓棋;邢贞召;赵毅 -专利权人：武汉中拓康明生物科技有限公司;陕西诺威利华生物科技有限公司;陕西溯源农业发展有限公司;黄光东
申请日： 2015-07-10 - 公布日： 2018-08-28 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪IgG1Fc重组杆状病毒作为猪用疫苗载体的制备方法，属于生物医药领域。本发明的制备方法采用克隆猪IgG Fc基因和猪瘟病毒E2基因，与杆状病毒表面展示载体连接，获得重组转移载体；重组转移载体通过Tn7转座获得重组杆状病毒Bacmid载体；重组Bacmid用脂质体方法转染昆虫细胞，收集培养物上清，获得重组杆状病毒，重组杆状病毒感染昆虫细胞，收集细胞做Western blot分析和共聚焦显微镜分析；重组杆状病毒猪瘟载体在猪体做疫苗效力检验。本发明制备的表面展示猪IgG Fc重组杆状病毒在猪血清中具有较强的存活能力，可逃逸给血清补体对病毒的清除，从而提高疫苗免疫的有效抗原含量。
种猪 igg1 fc 重组杆状病毒作为疫苗载体制备方法

[发明专利]一种抗细胞凋亡的重组杆状病毒载体及其制备方法-CN201610257513.X在审
发明人：不公告发明人 -专利权人：北京康宝利华生物科技有限公司
申请日： 2016-04-23 - 公布日： 2017-10-31 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明公开了一种抗细胞凋亡的重组杆状病毒载体的制备方法，把干扰昆虫细胞caspase‑1表达的小RNA的基因和调控序列敲入到杆状病毒载体骨架上，制作出能延长感染细胞存活期的重组杆状病毒载体。本发明获得的重组Bacmid，可作为病毒载体，用于构建表达外源基因的重组杆状病毒。所获得的重组杆状病毒感染昆虫细胞后，病毒滴度可显著得到提高，外源蛋白表达的时间可延长到感染后5‑6天。本发明获得的杆状病毒载体可直接用于优化杆状病毒/昆虫细胞表达系统，通过病毒滴度的提高可降低病毒生产的成本，通过延长表达时间可提高外源蛋白的表达水平。
一种细胞重组杆状病毒载体及其制备方法

[发明专利]一种猪用疫苗载体-CN201810938346.4在审
发明人：杜恩岐 -专利权人：陕西诺威利华生物科技有限公司;武汉中拓康明生物科技有限公司;陕西溯源农业发展有限公司;黄光东
申请日： 2015-07-10 - 公布日： 2019-04-19 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明公开了一种猪瘟用疫苗载体，属于生物医药领域。本发明的制备方法采用克隆猪IgG Fc基因和猪瘟病毒E2基因，与杆状病毒表面展示载体连接，获得重组转移载体；重组转移载体通过Tn7转座获得重组杆状病毒Bacmid载体；重组Bacmid用脂质体方法转染昆虫细胞，收集培养物上清，获得重组杆状病毒，重组杆状病毒感染昆虫细胞，收集细胞做Western blot分析和共聚焦显微镜分析；重组杆状病毒猪瘟载体在猪体做疫苗效力检验。本发明制备的表面展示猪IgG Fc重组杆状病毒在猪血清中具有较强的存活能力，可逃逸给血清补体对病毒的清除，从而提高疫苗免疫的有效抗原含量。
重组杆状病毒重组转移载体疫苗载体猪瘟猪IgG 制备重组杆状病毒感染猪瘟病毒E2基因表面展示载体共聚焦显微镜生物医药领域疫苗效力检验转染昆虫细胞培养物上清表面展示存活能力杆状病毒昆虫细胞血清补体疫苗免疫有效抗原脂质体猪血清猪体转座种猪分析克隆病毒细胞

[发明专利]一种杆状病毒基因组的合成方法及其在重组杆状病毒构建中的应用-CN201710144998.6有效
发明人：商雨;胡志红;邓菲;王曼丽;王华林 -专利权人：中国科学院武汉病毒研究所
申请日： 2017-03-13 - 公布日： 2019-09-17 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明提供了一种杆状病毒基因组的合成方法及其在重组杆状病毒构建中的应用，属于生物技术领域。本发明提供的一种杆状病毒基因组的合成方法，包括使用引物组合和穿梭载体。引物组合包括杆状病毒全基因组扩增引物组合和线性载体扩增引物组合，应用该引物组合合成的基因片段，可在酵母中通过多片段的拼接合成出杆状病毒基因组，方便对杆状病毒基因组的任意位点进行改造；该方法中用于完整基因组拼接的穿梭载体带有能在昆虫细胞方便检测的基因，所合成的杆状病毒基因组可通过转染昆虫细胞获得有感染活性的病毒，方便用于拯救基因组改造后的杆状病毒；应用上述方法构建重组杆状病毒，方便快速高效，利于推广应用。
一种杆状病毒基因组合成方法及其重组构建中的应用

[发明专利]一种杆状病毒表达载体-CN201910650551.5有效
发明人：陈红英;张潇月;赵凯霞 -专利权人：西北农林科技大学
申请日： 2019-07-18 - 公布日： 2022-07-15 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明公开了一种新型杆状病毒表达载体，涉及生物技术领域。本发明将杆状病毒表达载体上四个连续的非必需基因Ac84、Ac85、Ac86和Ac87同时敲除后即获得所述新型杆状病毒表达载体。本发明的新型杆状病毒表达载体使外源蛋白表达水平提高80％。同时病毒的增殖特性不受影响。表达产量的提高能显著降低企业的生产成本。该杆状病毒表达载体可用于生物制品工业领域，特别是亚单位疫苗工业领域。
一种杆状病毒表达载体

[发明专利]一种Ac63-64基因敲除的杆状病毒表达载体-CN202110030831.3有效
发明人：请求不公布姓名 -专利权人：陕西杆粒生物科技有限公司
申请日： 2021-01-11 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明公开了一种基因敲除型杆状病毒表达载体，涉及生物技术领域。本发明将杆状病毒表达载体上相邻的两个非必需基因Ac63和Ac64同时敲除后即获得所述基因敲除型杆状病毒表达载体。本发明的基因敲除型杆状病毒表达载体使外源蛋白表达水平提高至少一倍，同时病毒的增殖特性基本不受影响。表达产量的提高能显著降低企业的生产成本。该杆状病毒表达载体可用于生物制品工业领域，特别是亚单位疫苗工业领域。
一种 ac63 64 基因杆状病毒表达载体

[发明专利]一种鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF72蛋白重组杆状病毒表达载体及其制备方法-CN201910699678.6在审
发明人：李强;栾林林 -专利权人：盐城工学院
申请日： 2019-07-31 - 公布日： 2019-11-29 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明提供了一种鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF72蛋白重组杆状病毒表达载体及其制备方法，其是以提取的CyHV‑2 cDNA为模板，扩增出ORF72基因，将扩增的ORF72基因连接至杆状病毒载体pFastBac HTA中，构建重组杆状病毒载体pFastBac HTA‑CyHV‑ORF72，转化至大肠杆菌感受态细胞DH10Bac中，获得重组穿梭杆粒rBacmid‑CyHV‑ORF72，鉴定正确后将其转染至Sf9昆虫细胞，获得重组杆状病毒，并将重组杆状病毒进行传代扩增，将高滴度的含有CyHV ORF72基因的杆状病毒接到sf9昆虫细胞中进行CyHV ORF72蛋白的真核表达。选用本发明方法构建鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF72蛋白重组杆状病毒表达载体，并利用重组杆状病毒表达系统在昆虫细胞中表达鲤疱疹病毒Ⅱ型ORF72蛋白，为鲤疱疹病毒血清学ELISA检测方法的建立奠定了基础。
疱疹病毒Ⅱ型扩增杆状病毒表达载体重组杆状病毒蛋白重组构建蛋白大肠杆菌感受态细胞重组杆状病毒表达重组杆状病毒载体传代杆状病毒载体杆状病毒基因连接昆虫细胞真核表达疱疹病毒基因高滴度血清学杆粒转染制备转化

[发明专利]一种Ac96失活的杆状病毒载体-CN202110742717.3有效
发明人：请求不公布姓名 -专利权人：陕西杆粒生物科技有限公司
申请日： 2021-07-01 - 公布日： 2023-08-22 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明公开了一种基因失活型杆状病毒表达载体。该载体杆状病毒非必需基因Ac96失活，使外源蛋白表达水平显著提高。同时，病毒的增殖特性未见显著变化。表达产量的提高能降低企业的生产成本，失活Ac96能提高重组杆状病毒生物安全性。该杆状病毒载体可用于生物制品工业领域。
一种 ac96 杆状病毒载体

[发明专利]逃逸哺乳动物血清清除重组杆状病毒疫苗载体的制备方法-CN201611001318.7有效
发明人：张磊;薛青红;陈瑞;张元元;张志刚;董剑辉;戚伟强;孙丰廷 -专利权人：陕西诺威利华生物科技有限公司;中国兽医药品监察所
申请日： 2016-11-14 - 公布日： 2018-08-28 - 主分类号： C12N15/866 文献下载
摘要：本发明的制备方法采用克隆PCV2 Cap基因杆状病毒表面展示载体连接，并加上哺乳动物启动子CAGG及报告基因eGFP获得重组转移载体；重组转移载体通过Tn7转座获得重组杆状病毒Bacmid载体；重组Bacmid用脂质体方法转染昆虫细胞，收集培养物上清，获得重组杆状病毒，重组杆状病毒感染昆虫细胞，收集细胞做Western blot分析和共聚焦显微镜分析；并把重组杆状病毒与猪血清作用，发现了与不展示Cap的病毒相比具有很强的逃逸补体清除的能力
逃逸哺乳动物血清清除重组杆状病毒疫苗载体制备方法

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