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[发明专利]一种枯草芽孢杆菌纤溶酶冻干粉及其制备方法和应用-CN202310368743.3在审
发明人：高雅;董艳山;吴正喜;高丽;王业富 -专利权人：武汉真福创新生物制药有限公司
申请日： 2023-04-10 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N9/96 文献下载
摘要：本发明公开了一种枯草芽孢杆菌纤溶酶冻干粉的制备方法，其特征在于，包括按重量份取枯草芽孢杆菌纤溶酶原液100份，甘露醇3‑8份以及乳糖0.2‑1份混合，得混合液，再对混合液进行真空冷冻干燥，即可得到目标产物枯草芽孢杆菌纤溶酶冻干粉，本发明的注射用枯草芽孢杆菌纤溶酶冻干粉保护剂，经过了发酵纯化后得到了以枯草芽孢杆菌纤溶酶为主要成分，按照特定的比例加入甘露醇和乳糖冻干保护剂组合，经真空冷冻干燥后，最大限度的保留枯草芽孢杆菌纤溶酶的完整性
一种枯草芽孢杆菌纤溶酶冻干粉及其制备方法应用

[发明专利]一株具有纤溶活性的凝结芽孢杆菌-CN202110409607.5有效
发明人：汪洋 -专利权人：汪洋
申请日： 2021-04-15 - 公布日： 2022-06-07 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明公开了一株具有纤溶活性的凝结芽孢杆菌，该菌株分类命名为凝结芽胞杆菌(Bacillus coagulans)5885，于2020年10月10日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，菌种保藏号为本发明的凝结芽孢杆菌5885可以产纤溶活性酶，对酶活性质的初步探究表明该酶活性可达619IU/mL；对温度相对稳定，在5‑35℃之间酶活性可以保持在80％以上；对pH有较宽适应性，在pH 4.0‑9.0之间可以保持80％以上的酶活，最适pH为8.5，酶活保持率为97.6％；且该酶既有直接纤溶活性，也有纤溶酶原激活活性。为新型纤溶酶的开发提供了重要的理论依据。
具有活性凝结芽孢杆菌

[发明专利]一种黄粉虫纤溶酶及其制备方法与应用-CN200910193134.9无效
发明人：谭竹均;陈雅雄;韩雅莉;黄锦兵 -专利权人：广东工业大学
申请日： 2009-10-16 - 公布日： 2010-04-14 - 主分类号： C12N9/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种黄粉虫纤溶酶及其制备方法与应用，该纤溶酶是从黄粉虫中提取，其分子量为56.1千道尔顿，还涉及到黄粉虫纤溶酶的制备方法，以及这种纤溶酶在制备治疗血液栓塞的药物中的用途；该制备方法是首先将黄粉虫洗净，上清液加固体硫酸铵分段盐析，取30％～70％饱和度盐析组分透析浓缩，得到粗提液；将粗提液过二乙氨基乙基-纤维素32离子交换层析柱纯化，用Tris-HCl缓冲液梯度洗脱，收集高丰度蛋白峰；本发明涉及的纤溶酶易于纯化和批量制备，并且纤溶活性强，比活高，无毒性；分子量小、抗原反应低，是较为理想的纤溶酶制剂原料，是理想的溶栓药物。
一种黄粉虫纤溶酶及其制备方法应用

[发明专利]在微生物中生产重组蛋白质的方法-CN03803326.7无效
发明人：鲁迪·舒希洛;汉斯·克里斯琴·科廷;汉斯·贡特尔·加森;马丁·希尔斯;拉尔夫·帕斯特纳克 -专利权人： N－酶生物技术有限公司
申请日： 2003-02-06 - 公布日： 2006-05-03 - 主分类号： C12N9/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种在微生物中生产重组功能性纤溶酶原的方法，和一种鉴定纤溶酶原激活剂的方法。编码纤溶酶原的功能部分的核酸序列与至少编码一段信号肽的核酸序列融合。编码功能性纤溶酶原的核酸分子和编码信号肽的核酸分子由蛋白酶的酶切位点密码子偶联，所述蛋白酶的酶切位点密码子确保信号肽的切割。适当施用含有所述重组纤溶酶原或相应纤溶酶的制剂，可治疗慢愈性或难愈性创伤。
微生物生产重组蛋白质方法

[发明专利]一种QK纤溶酶基因-水蛭素融合蛋白的制备方法及应用-CN202110122024.4有效
发明人：王业富;李靖;董艳山;高丽;胡坤坤 -专利权人：武汉真福医药股份有限公司
申请日： 2021-01-29 - 公布日： 2022-11-11 - 主分类号： C07K19/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种QK纤溶酶基因‑水蛭素基因融合蛋白的制备方法，包括以下步骤：以QK纤溶酶的基因序列、水蛭素的基因序列为模板，经过扩增拼接取得融合基因序列，构建重组表达质粒，将重组表达质粒转回到感受态细胞中，筛选出高效表达蛋白菌株，扩大培养细胞和诱导表达融合蛋白，得到QK纤溶酶基因‑水蛭素融合蛋白。本发明的QK纤溶酶‑水蛭素融合蛋白既保留了QK纤溶酶的靶向溶栓功效，又能发挥水蛭素的抗凝作用；不但抑制蛋白水解酶的降解，而且增大蛋白分子量，降低肾小球通过率，使得药物半衰期得以延长，在临床上就可以降低使用剂量或减少注射频率
一种 qk 纤溶酶基因水蛭融合蛋白制备方法应用

[发明专利]一种枯草杆菌纤溶酶在治疗矽肺病药物中的应用-CN202010807700.7在审
发明人：王业富;肖帅;董艳山;高丽;高雅 -专利权人：武汉真福医药股份有限公司
申请日： 2020-08-12 - 公布日： 2020-11-06 - 主分类号： A61K38/48 文献下载
摘要：本发明公开了一种枯草杆菌纤溶酶在治疗矽肺病药物中的应用。所述枯草杆菌纤溶酶由枯草杆菌发酵制得。作为活性组分的所述枯草杆菌纤溶酶单独或与其他药物组合应用于治疗矽肺病的药物中。所述枯草杆菌纤溶酶可与医药学上可接受的辅料配合制成液体药剂、胶囊剂或者片剂。本发明中枯草杆菌纤溶酶能减轻SiO2诱导的矽肺炎症反应，将病变控制在早期的巨噬细胞与淋巴细胞阶段，阻止了成纤维细胞的增殖与纤维化的进展。枯草杆菌纤溶酶对矽肺纤维化过程有一定的阻碍作用，可作为矽肺纤维化的防治及辅助治疗。
一种枯草杆菌纤溶酶治疗矽肺药物中的应用

[发明专利]一种乳制品中纤溶酶含量的检测方法-CN202211287171.8在审
发明人：周欢;范光彩;宋艳梅;黄漫蓉;夏忠悦;骆敏;马静;谭莲英 -专利权人：新希望乳业股份有限公司
申请日： 2022-10-20 - 公布日： 2022-12-30 - 主分类号： G01N21/31 文献下载
摘要：本发明涉及一种乳制品中纤溶酶含量的检测方法，包括以下步骤：S1、取样品，冷冻离心去除脂肪，加入柠檬酸缓冲液，混匀，37±1℃孵育，离心取上清液；S2、加入MTB缓冲液、纤溶酶底物，混匀，37±1℃孵育，加入2±1%三氯乙酸，离心取上清液；S3、在405±10nm测定吸光值，同步作空白实验和加标回收实验；根据样品组和空白实验组、加标回收实验组的吸光度，计算样品中纤溶酶的含量。本发明方法中取离心去脂的产品，能够解离释放纤溶酶的乳清液，利用纤溶酶底物反应产生有色产物，三氯乙酸沉淀，离心取上清液测定，通过颜色的变化来准确计算纤溶酶的含量，克服了现有技术对于灭菌乳脱脂以后样品颜色难以澄清的困难
一种乳制品中纤溶酶含量检测方法

[发明专利]改进的高效特异性的纤维蛋白溶解酶纤溶酶的人Kunitz抑制剂-CN202180069465.0在审
发明人： S·P·巴贾杰 -专利权人：加利福尼亚大学董事会
申请日： 2021-09-07 - 公布日： 2023-10-03 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：公开了与新的抑制纤溶酶的多肽相关的组合物和方法，这些抑制纤溶酶的多肽是人TFPI‑2Kunitz型蛋白酶第一抑制剂结构域(KD1)的结构变体。该多肽是相对于野生型TFPI‑2KD1具有抗纤维蛋白溶解活性和/或降低的抗凝活性的有力的纤溶酶抑制剂。该抑制纤溶酶的多肽可用作抗癌剂、抗纤维蛋白溶解剂、蛋白酶抑制剂，以及用于其他情况下。
改进高效特异性纤维蛋白溶解酶纤溶酶 kunitz 抑制剂

[发明专利]一种枯草杆菌纤溶酶在治疗慢性前列腺炎药物中的应用-CN202010807898.9在审
发明人：王业富;肖帅;董艳山;高丽;高雅 -专利权人：武汉真福医药股份有限公司
申请日： 2020-08-12 - 公布日： 2020-11-13 - 主分类号： A61K38/48 文献下载
摘要：本发明公开了一种枯草杆菌纤溶酶在治疗慢性前列腺炎药物中的应用。所述枯草杆菌纤溶酶由枯草杆菌菌种发酵制得。作为活性组分的所述枯草杆菌纤溶酶单独或与其他药物组合应用于治疗慢性前列腺炎的药物中。本发明中枯草杆菌纤溶酶对慢性前列腺炎显示出良好的药效作用，能抑制炎性细胞的产生。
一种枯草杆菌纤溶酶治疗慢性前列腺炎药物中的应用

[发明专利]一种分离蚯蚓纤溶酶单一组分的方法-CN200510012411.3无效
发明人：赵晓瑜;静天玉;武金霞 -专利权人：河北大学
申请日： 2005-03-23 - 公布日： 2005-09-28 - 主分类号： C12N9/68 文献下载
摘要：本发明涉及一种分离蚯蚓纤溶酶单一组分的方法，特别是从中分离出一种为糖蛋白的蚯蚓3#纤溶酶组分，其分子量为24056道尔顿，与其它单组分蚯蚓纤溶酶相比较其体内溶栓作用最强，对凝血时间影响最小，可用于开发抗栓和溶栓药物本发明以滤纸为载体，偶联大豆胰蛋白酶抑制剂，构成蚯蚓纤溶酶亲和层析系统，通过亲和层析和梯度洗脱从蚯蚓匀浆液分离出蚯蚓3#纤溶酶组分。
一种分离蚯蚓纤溶酶单一组分方法

[发明专利]一种促肠吸收的纤溶酶载酶脂质体及其制备方法-CN200910236541.3有效
发明人：王成涛;孙宝国;王静;曹雁平 -专利权人：北京工商大学
申请日： 2009-10-30 - 公布日： 2010-05-12 - 主分类号： A23L1/30 文献下载
摘要：本发明涉及一种促肠吸收的纤溶酶载酶脂质体及其制备方法，属于食品加工和医药技术领域，可应用于功能性食品、保健品和医药行业。Bacillus subtilis DC12-33是从中国传统发酵食品中分离筛选的一株细菌，该菌株可产生强烈纤溶活性的豆豉纤溶酶(fibrinolytic subtilisin)Subtilisin FS33本发明以改性修饰的豆豉纤溶酶Subtilisin FS33为包合对象，选择胆固醇和磷脂作为介质材料，PEG改性修饰酶蛋白，0-羧甲基壳聚糖(或胆酸盐、壳聚糖、凝集素)表面修饰脂质体，并采用蛋白酶抑制剂抑制消化道蛋白酶活性，丙烯酸树脂(Eudragit)肠溶包衣等技术集成措施制备促肠吸收的纤溶酶载酶脂质体系统，构成一个多层屏障和有利于肠上皮跨膜转运吸收的体系，提高Subtilisin FS33的肠吸收效率和生物利用度。这种纤溶酶载体体系可应用于功能食品和保健品等。
一种吸收纤溶酶载酶脂质体及其制备方法

[发明专利]一种镰孢菌纤溶酶及其制备方法-CN200810034360.8有效
发明人：吴斌;吴黎诚;陈代杰;夏玉叶;戈梅;罗敏玉;殷瑜;杨志钧;杨天;金文翔 -专利权人：上海来益生物药物研究开发中心有限责任公司;浙江医药股份有限公司新昌制药厂
申请日： 2008-03-07 - 公布日： 2009-09-09 - 主分类号： C12N9/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种镰孢菌纤溶酶及其制备方法，所述镰孢菌纤溶酶是由菊花茎内生镰孢菌发酵制备。所述镰孢菌纤溶酶的N-末端氨基酸残基序列为：QASSGTPATIRVLVV，分子量为28,000Da，等电点为8.1。本发明的镰孢菌纤溶酶，具有能直接降解纤维蛋白的纤溶活性，有良好的血栓溶解和显著抑制静脉血栓形成的作用，并且分子量较小，同时，该酶的生产原材料丰富，生产工艺简便，成本低廉，能弥补尿激酶等现有临床药物在生产和治疗方面的不足
一种镰孢菌纤溶酶及其制备方法

[发明专利]重组修饰的纤溶酶-CN201210114289.0有效
发明人： J·A·亨特;V·诺沃哈特尼 -专利权人：泰勒克里斯生物治疗学公司
申请日： 2005-04-21 - 公布日： 2012-09-12 - 主分类号： C12N15/57 文献下载
摘要：本发明提供了与重组修饰的纤溶酶(原)分子相关的多核苷酸和多肽。所述纤溶酶(原)分子具有位于存在于天然人纤溶酶原分子中的激活位点的N-末端的单一的三环域，并且表现出赖氨酸-结合和与天然酶相关的显著的酶特征。
重组修饰纤溶酶

[发明专利]重组修饰的纤溶酶-CN200880123270.4有效
发明人： V·诺沃克哈特尼 -专利权人：泰勒克里斯生物治疗学公司
申请日： 2008-11-25 - 公布日： 2010-12-15 - 主分类号： C12N9/68 文献下载
摘要：本发明提供了涉及重组修饰的纤溶酶(原)分子的多聚核苷酸和多肽。纤溶酶(原)分子具有位于天然人纤溶酶原分子中的激活位点N-末端的单个三环域，其如此组合使得不存在外来序列，并显示赖氨酸-结合以及与天然酶相关的显著的酶特征。
重组修饰纤溶酶

[发明专利]重组修饰的纤溶酶-CN200580015538.9无效
发明人： J·A·亨特;V·诺沃哈特尼 -专利权人：泰勒克里斯生物治疗学公司
申请日： 2005-04-21 - 公布日： 2007-05-09 - 主分类号： C12N9/68 文献下载
摘要：本发明提供了与重组修饰的纤溶酶(原)分子相关的多核苷酸和多肽。所述纤溶酶(原)分子具有位于存在于天然人纤溶酶原分子中的激活位点的N－末端的单一的三环域，并且表现出赖氨酸－结合和与天然酶相关的显著的酶特征。
重组修饰纤溶酶