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[发明专利]DNA聚合酶及其制备方法、表达基因、表达载体、宿主细胞和试剂盒-CN201811590297.6在审
发明人：罗成 -专利权人：深圳市刚竹医疗科技有限公司
申请日： 2018-12-25 - 公布日： 2019-04-26 - 主分类号： C12N15/54 文献下载
摘要：本发明涉及一种DNA聚合酶及其制备方法、表达基因、表达载体、宿主细胞和试剂盒。该DNA聚合酶的表达基因包括编码角质酶的核苷酸序列与编码角质酶的核苷酸序列连接的编码DNA聚合酶的核苷酸序列，上述DNA聚合酶的表达基因能够在宿主细胞中同时独立表达角质酶和DNA聚合酶。在角质酶的作用下，宿主细胞中表达的DNA聚合酶能够游离到宿主细胞外，使得采用上述DNA聚合酶的表达基因制备得到的DNA聚合酶中不含宿主细胞的DNA。
宿主细胞表达基因角质酶制备核苷酸序列表达载体试剂盒核苷酸序列连接编码DNA 聚合酶游离

[发明专利]基于抑制的对细胞克隆的高通量筛选方法-CN201080026227.3有效
发明人：刘伟广;丁敏珮 -专利权人：台湾神隆股份有限公司
申请日： 2010-06-10 - 公布日： 2012-08-22 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于筛选对靶蛋白具有高水平表达的细胞的方法。所述方法包括向多个宿主细胞引入DNA构建体，所述DNA构建体编码靶蛋白和针对所述宿主细胞中的内源性可选标记物的抑制剂；筛选带有该DNA构建体的宿主细胞，用于表达所述内源性可选标记物；和分离出所述可选标记物表达降低的细胞本发明还公开了构造为在该宿主细胞中表达该靶蛋白和该抑制剂的DNA构建体。
基于抑制细胞克隆通量筛选方法

[发明专利]宿主昆虫细胞DNA残留含量定量检测方法及试剂盒-CN202011644677.0在审
发明人：余双庆;牛苗;戴阳光;董哲岳;李秀;董小岩;吴小兵 -专利权人：北京五加和基因科技有限公司
申请日： 2020-12-30 - 公布日： 2022-07-01 - 主分类号： C12Q1/6888 文献下载
摘要：本发明提供了一种定量检测宿主细胞DNA残留量的引物、探针序列，及检测方法。该方法可应用于rAAV载体制品成品中，检测Sf9细胞DNA残余含量，也可应用于其他生物制品中Sf9或其他宿主细胞基因组DNA残留量检测。此外，本发明也可应用于其他SF9细胞表达的重组蛋白制品中宿主细胞残余DNA的检测。
宿主昆虫细胞 dna 残留含量定量检测方法试剂盒

[发明专利]转化细菌细胞的方法-CN201880047705.5在审
发明人： M·F·菲勒;S·西梅尔 -专利权人：巴斯夫欧洲公司
申请日： 2018-07-11 - 公布日： 2020-03-17 - 主分类号： C12N9/10 文献下载
摘要：本发明涉及在重组宿主细胞中产生DNA甲基转移酶，其中所述DNA甲基转移酶使DNA甲基化，产生在识别序列GCNGC中含有5‑甲基胞嘧啶的DNA，并且其中所述DNA甲基转移酶包含根据SEQ ID NO：33另外，本发明涉及这种DNA甲基转移酶用来产生细菌转化体的用途，所述用途包括步骤：(a)向第一细菌宿主细胞中引入多核苷酸，所述多核苷酸包含编码该DNA甲基转移酶的多核苷酸序列，以产生甲基化DNA，和(b)将甲基化DNA从第一细菌宿主细胞转移入第二细菌宿主细胞，其中第二细菌宿主细胞包含能够降解该DNA但不能降解该甲基化DNA的限制性核酸内切酶。
转化细菌细胞方法

[发明专利]在大肠杆菌的细胞质和/或培养基中表达真人类表皮生长因子和/或碱性成纤维细胞生长因子的手段和方法-CN201480020051.9有效
发明人：允强·R·黄 -专利权人：允强·R·黄
申请日： 2014-02-25 - 公布日： 2020-02-14 - 主分类号： C12N15/72 文献下载
摘要：本发明涉及一种生物工程系统，特别是大肠杆菌宿主。所述宿主整合有DNA构建体组合用来生产至少第一多肽。第一多肽可以是真碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)。DNA构建体中有插入片段，该插入片段包括，例如，按顺序，表达盒、内含肽和编码第一多肽的DNA。所述DNA构建体被配置为影响宿主胞内分泌碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)在宿主的细胞质中和/或外排到培养宿主的细胞培养基中。
大肠杆菌细胞质培养基表达人类表皮生长因子碱性纤维细胞手段方法

[发明专利]在梭菌中的双交换同源重组的方法-CN201080013200.0无效
发明人：斯蒂芬·托马斯·卡特曼;纳杰尔·彼得·明顿 -专利权人：诺丁汉大学
申请日： 2010-01-21 - 公布日： 2012-02-22 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明涉及在宿主梭菌细胞中的双交换同源重组的方法，包含：供体DNA分子和宿主细胞的DNA之间的第一同源重组活动，以在该宿主细胞内形成第一重组活动的产物，其中该供体DNA分子包含codA基因和至少两个同源臂；在该第一同源重组活动的产物内的第二重组活动，借以在该宿主细胞中形成可通过该codA基因的丢失而可选择的第二同源重组活动的产物；以及有关的载体和已变更的宿主细胞。
中的交换同源重组方法

[发明专利]体内生产头孢菌素的改良-CN200810087558.2无效
发明人： M·涅博尔;R·A·L·博温伯格 -专利权人： DSM公司
申请日： 1999-05-19 - 公布日： 2009-01-28 - 主分类号： C12N15/52 文献下载
摘要：本发明提供DNA，能转录、翻译或表达所述DNA的异源宿主细胞，以及应用该宿主细胞及其培养物改善酰化头孢菌素的体内生产获得更高的产量的方法。根据本发明，提供宿主细胞，其含有主要定位于宿主细胞的胞质溶胶中(而非主要定位于过氧化物酶体或微体中或上)的具有扩环酶活性的酶。
体内生产头孢菌素改良

[发明专利]体内生产头孢菌素的改良-CN99806314.2有效
发明人： M·涅博尔;R·A·L·博温伯格 -专利权人： DSM公司
申请日： 1999-05-19 - 公布日： 2001-06-27 - 主分类号： C12N15/53 文献下载
摘要：本发明提供DNA,能转录、翻译或表达所述DNA的异源宿主细胞,以及应用该宿主细胞及其培养物改善酰化头孢菌素的体内生产获得更高的产量的方法。根据本发明,提供宿主细胞,其含有主要定位于宿主细胞的胞质溶胶中(而非主要定位于过氧化物酶体或微体中或上)的具有扩环酶活性的酶。
体内生产头孢菌素改良

[发明专利]细胞色素C和它的基因-CN98108251.3有效
发明人：明朝仓;达雄星野;雅子新城;哲史富山 -专利权人：弗·哈夫曼－拉罗切有限公司
申请日： 1998-04-03 - 公布日： 1999-06-23 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：本发明涉及在原核或真核寄主细胞中表达时编码至少具有细胞色素c551的部分一级结构和一个生物特性的多肽的DNA序列的DNA序列,由所述的DNA序列编码的多肽,含有这样的DNA序列的表达载体,这样的载体转化的宿主细胞,利用这样的宿主细胞生产的方法和利用这样的细胞色素c生产维生素C。
细胞色素基因

[发明专利]一种检测重组腺相关病毒宿主细胞DNA残留的方法-CN202210958870.4在审
发明人：雷静;蒋鑫;王沁瑜;周园;欧国娟;徐刚明;郑艳军;程志茹;陈琪 -专利权人：上海药明生基医药科技有限公司
申请日： 2022-08-10 - 公布日： 2022-11-18 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测重组腺相关病毒宿主细胞DNA残留的方法，本发明采用新型prepGEM酶裂解rAAV病毒样品，需要病毒样品量少，5‑15分钟内裂解病毒，2‑10分钟内使酶失活；病毒裂解液可以直接应用于实时荧光定量聚合酶链反应，准确检测rAAV病毒样品中HEK293宿主细胞DNA残留。本发明方法操作简便，所需步骤少，从处理病毒到获得宿主细胞DNA残留数据，只需要2.5小时。本发明检测方法所获得的HEK293宿主细胞DNA残留，数据稳定，方差比磁珠法和蛋白酶K裂解法都小。
一种检测重组相关病毒宿主细胞 dna 残留方法

[发明专利]具有条件性复制起点的环形DNA分子及其制备方法-CN200710162091.9无效
发明人： F·苏布里耶 -专利权人：森泰莱昂公司
申请日： 2003-10-14 - 公布日： 2008-05-21 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：提供了具有条件性复制起点的环形DNA分子及其制备方法。描述了原核重组宿主细胞，该细胞包含激活条件性复制起点的异源复制起始蛋白质以及包含异源治疗性基因和条件性复制起点的染色体外DNA分子，该条件性复制起点在原核重组宿主细胞中的功能需要宿主细胞外源的复制起始蛋白质该宿主细胞可以包括具有至少一个突变的pir基因，该突变可以发生在pir基因拷贝数控制区、pir基因亮氨酸拉链样基序或pir基因DNA结合区。
具有条件复制起点环形 dna 分子及其制备方法

[发明专利]诱导型质粒自毁辅助重组-CN202080051035.1在审
发明人：左芳雷;曾珠;哈罗德·马科特 -专利权人：鹿园益生菌和酵素有限公司
申请日： 2020-05-15 - 公布日： 2022-07-15 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明提供了一种环状DNA载体，其可以用于在宿主细胞的靶区中引入特异性突变。本发明进一步提供了使用环状DNA载体来生成工程化宿主细胞的方法。环状DNA载体和方法可用于研究基因功能和生成产生重组基因产物的细胞。
诱导质粒自毁辅助重组

[发明专利]一种病毒性疫苗大规模生产的纯化方法-CN201010605535.3无效
发明人：于洪涛;李光谱;胡晓明;张莹;周庆玲;李淑兰;郭岩;岳振齐;董唤;董鹏 -专利权人：吉林亚泰生物药业股份有限公司
申请日： 2010-12-27 - 公布日： 2011-04-20 - 主分类号： A61K39/12 文献下载
摘要：本发明提供了病毒性疫苗大规模生产的纯化方法，利用疏水层析方法去除宿主细胞DNA和杂蛋白。疏水柱层析采用低吸附疏水层析介质进行纯化，主要是利用病毒在一定硫酸铵浓度下，充分暴露其疏水性，从而使其能够结合在层析柱上，而部分杂蛋白由于疏水性弱，残余宿主细胞DNA不具有疏水性，不能结合，所以流穿出来，这样就可以达到去除杂蛋白及宿主细胞DNA目的，其中杂蛋白去除率在90%以上，宿主细胞残余DNA含量达到500pg左右。经疏水层析后宿主细胞残余DNA在500pg/ml左右，再辅以离子交换等纯化方法可以达到国家药典标准。
一种病毒性疫苗大规模生产纯化方法

[发明专利]筛选方法-CN03815552.4有效
发明人： T·贾斯博森;M·贝克;J·库特钦斯基;S·P·奥尔森;R·泰伯瑞斯基 -专利权人：索菲昂生物科学有限公司
申请日： 2003-06-06 - 公布日： 2005-09-07 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明涉及筛选方法，具体地讲，涉及筛选DNA文库，以便鉴定当在宿主细胞中表达时能够导致所述宿主细胞的表型发生至少一种改变的DNA分子的方法，所述表型改变可使用膜片钳芯片构建体检测。另外，本发明涉及与产生所述细胞表型改变的DNA分子相当的mRNA的分离。
筛选方法

[发明专利]无抗生素状态下产生多肽的表达系统-CN200880014749.4无效
发明人：斯爱琳·卡多特;啼娜·普劳斯;璐斯·史维尔德福哲;布如诺·文因特 -专利权人： AB多酶两合公司
申请日： 2008-03-12 - 公布日： 2011-01-19 - 主分类号： C12N15/75 文献下载
摘要：本发明涉及一种用于产生一种或一种以上靶多肽的表达系统，其包含宿主细胞，在所述宿主细胞的基因组中，编码3-磷酸甘油脱氢酶的DNA序列失活，或者部分或完全缺失，并且所述宿主细胞经包含编码所述靶多肽和3-磷酸甘油脱氢酶的DNA序列的染色体外元件转化，由此所述宿主细胞基因组与所述染色体外元件都不携带抗生素抗性基因。
抗生素状态产生多肽表达系统

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