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[发明专利]多重PCR检测方法及试剂盒-CN201310227525.4有效
发明人：张建东;谭晓利 -专利权人：瀚吉康生物科技（北京）有限公司
申请日： 2013-06-08 - 公布日： 2013-09-04 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了多重PCR检测方法及试剂盒。本发明所提供的多重PCR检测方法，包括以下步骤：（1）根据靶标基因序列，分别设计上游引物、下游引物、共同引物和探针序列；（2）配置多重PCR反应体系；（3）进行PCR扩增，在PCR扩增周期结束后，进行熔解曲线分析本发明在PCR扩增过程中针对每一扩增子引入特异性外源核酸序列标签，在扩增过程中与之后采用完全互补与有限错配的单标记荧光寡聚合核苷酸探针荧光杂交与熔解分析实现多重检测。本发明所提供的多重PCR检测方法，有效地提高了实时荧光定量PCR的检测重数、检测通量，并缩短检测时间。
多重 pcr 检测方法试剂盒

[发明专利]四种猪肠道病毒多重荧光RT-PCR试剂盒及检测方法-CN201910120378.8在审
发明人：施开创;王睿敏;粟艳琼;黎宗强;尹彦文;陆文俊;屈素洁;冯淑萍 -专利权人：广西壮族自治区动物疫病预防控制中心
申请日： 2019-02-18 - 公布日： 2019-06-21 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种四种猪肠道病毒多重荧光RT‑PCR试剂盒及检测方法，所述的四种猪肠道病毒多重荧光RT‑PCR试剂盒，包括四对引物及相应的四种TaqMan探针，它们分别针对PEDV、TGEV、PDCoV和PRoV四种猪肠道病毒；所述的四种猪肠道病毒多重荧光RT‑PCR检测方法，是同时检测PEDV、TGEV、PDCoV、PRoV四种猪肠道病毒的多重TaqMan荧光定量RT‑PCR检测方法。本发明针对PEDV、TGEV、PDCoV、PRoV设计特异性引物和探针，优化扩增反应条件，获得同时检测并区分这4种病毒的多重荧光定量RT‑PCR方法，为实验室鉴别检测病原提供了有效的技术手段。
肠道病毒种猪多重荧光检测病原扩增反应条件特异性引物技术手段鉴别检测荧光定量对引物试剂盒探针病毒优化

[发明专利]一种多重荧光PCR检测试剂盒及其应用-CN201310238231.1有效
发明人：吴忠华;郑伟;吕沁风;杨永耀;朱旭平;熊磊;高旭光;杨双彪 -专利权人：浙江国际旅行卫生保健中心;上海之江生物科技股份有限公司
申请日： 2013-06-14 - 公布日： 2013-09-18 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种利用多重荧光PCR法对登革热、基孔肯亚和黄热病毒在单管同时进行检测的引物、探针及试剂盒。本发明的登革热、基孔肯亚和黄热病毒多重荧光PCR检测用引物及探针，其核苷酸序列如SEQIDNO：1-9所示；登革热、基孔肯亚和黄热病毒多重PCR检测试剂盒，包括多重荧光PCR检测混合液，所述多重荧光PCR检测混合液中含有前述的引物和探针。利用本发明的试剂盒和引物探针能快速检测登革热病毒、基孔肯亚病毒和黄热病毒，具有操作简便、灵敏度高、特异性好等优点；及时发现和确诊可疑病例，提高对该类疾病的监测水平。
一种多重荧光 pcr 检测试剂盒及其应用

[发明专利]一种XNA分子钳-多重荧光PCR法基因突变检测方法-CN202210854682.7在审
发明人：李建平;周涛;高智勇;何奕辉;张爱国 -专利权人：南京帝基生物科技有限公司
申请日： 2022-07-18 - 公布日： 2022-10-18 - 主分类号： C12Q1/6858 文献下载
摘要：本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种XNA分子钳‑多重荧光PCR法基因突变检测方法；包括制备待测样品；提取所述待测样品中的DNA和RNA，并将所述RNA逆转处理，得到cRNA，再将所述cRNA和所述DNA混合后进行多重荧光PCR扩散，得到荧光样品；通过荧光PCR扩增仪检测所述荧光样品，并显示所述荧光样品的ct值判定检测结果，该方法引入多重荧光PCR扩散技术，通过采用特异性引物和探针技术，三色荧光通道检测模式，建立了实时PCR体系，可以同时检测多种融合基因和多种突变基因，具备特异性好，准确率高，快速廉价，解决现有试剂盒对基因突变状态进行检测耗时长的问题。
一种 xna 分子多重荧光 pcr 基因突变检测方法

[发明专利]多重荧光定量PCR检测食品中肉类种源的引物组及方法-CN202110280501.X在审
发明人：雷庆;赵中开 -专利权人：自贡检验检测院（自贡市食品药品检验检测中心、自贡市药品不良反应监测中心）
申请日： 2021-03-16 - 公布日： 2021-06-11 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明属于肉类种源检测技术领域，公开了一种多重荧光定量PCR检测食品中肉类种源的引物组及方法，所述多重荧光定量PCR检测熟制食品中肉类种源的引物组包括：牛、鸡、猪、鸭特异性引物和探针；所述多重荧光定量PCR检测熟制食品中肉类种源的方法包括：DNA的提取及浓度、纯度的测定；多重实时荧光PCR反应体系与条件的筛选；实验对照设置；检出限的确定；牛、鸡、猪、鸭源性成分的多重检测；定量标准曲线的制作。本发明建立在牛、猪、鸡、鸭物种的特异性引物和探针体系上，具有较高的准确性、抗干扰能力和可移植性，能够通过多重荧光定量PCR技术在一个反应孔中一次性准确快速检测出四种肉类成分并定量，节省检测时间和成本。
多重荧光定量 pcr 检测食品肉类引物方法

[发明专利]一种用于多重PCR的荧光探针及其应用-CN201810301626.4在审
发明人：洪冉;肖伟明 -专利权人：苏州创澜生物科技有限公司
申请日： 2018-04-04 - 公布日： 2018-08-31 - 主分类号： C12Q1/6883 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于多重PCR的荧光探针及含其的试剂盒及用于多重PCR的检测方法和制备诊断试剂的用途。所述荧光探针至少其5’末端的第一个核苷酸被2’‑(2,4‑二硝基苯)基团修饰。本发明还公开了一种含有2,4‑二硝基苯基团的化合物在制备用于多重PCR反应的荧光探针中的应用。利用本发明荧光探针能够有效避免PCR扩增过程中现有探针的水解，从而更好应用于PCR后的温度梯度荧光检测；而且本发明荧光探针的Tm值能被灵活地调节，使得多重PCR熔解曲线的峰图设计更加方便。利用本发明荧光探针的检测方法或诊断试剂或试剂盒具有探针设计方便灵活、检测速度快、检测通量高的特点，可以更好地适用于感染性疾病的检测。
荧光探针多重PCR 检测诊断试剂试剂盒制备应用多重PCR反应二硝基苯基感染性疾病二硝基苯基团修饰熔解曲线探针设计温度梯度荧光检测核苷酸灵活水解探针通量

[发明专利]高危人乳头瘤病毒试剂盒及检测方法-CN201710146271.1在审
发明人：王本敬;戴建荣;李文静;王挺;刘敏娟;李海波;侯顺玉;霍薇薇;李红 -专利权人：苏州市立医院
申请日： 2017-03-13 - 公布日： 2017-06-13 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供了一种高危人乳头瘤病毒检测试剂盒，包括HPV扩增引物，在多重PCR体系中引入了通用的荧光标记引物，设计三种荧光标记引物，就能够扩增出十几种不同长度或不同荧光的扩增子，特异性扩增引物的5’端引入20bp的特异性接头，并且在PCR体系中引入荧光标记的通用引物，通过多重PCR扩增，得到荧光标记的扩增子长度比目的扩增区域多两个接头的长度，然后多重PCR产物应用于毛细管电泳分析，得到基因型；本发明进一步降低荧光标记多重PCR的费用，并且解决HPV亚型的增多与检测成本线性增加的问题，本方法以检测14种高危HPV亚型为例，可以使多重PCR成本降低50％，并且随着检测HPV亚型的种类增多，成本降低幅度更大。
高危乳头病毒试剂盒检测方法

[实用新型]一种高通量的转基因检测装置-CN201821679491.7有效
发明人：石盼盼;李旭;魏法山;程海芳;谢文佳;王璐;金峻节;葛静静;陈蕾;赵芳 -专利权人：河南省产品质量监督检验院
申请日： 2018-10-17 - 公布日： 2019-06-18 - 主分类号： C12M1/38 文献下载
摘要：本实用新型公开了一种高通量的转基因检测装置，包括底座、多重荧光PCR试剂盒和承载转盘，底座顶部的一端通过支撑架固定安装有检测样品料斗，底座顶部的另一端通过支撑架固定安装有多重荧光PCR试剂盒，多重荧光PCR试剂盒和检测样品料斗之间的底座上开设有凹槽，凹槽的内部转动安装有承载转盘，承载转盘通过联轴器与伺服电机的输出端转动连接，承载转盘上开设有多个试管槽，试管槽内插入有检测试管，检测样品料斗和多重荧光PCR试剂盒的输出端均连接有导液管该高通量的转基因检测装置，实现对食品转基因的高通量检测，促进样品与多重荧光PCR试剂的混合，使得食品转基因检测的效率和精度得到提高，避免滴漏造成的检测误差、及对检测装置造成的污染。
多重荧光PCR 转基因检测试剂盒转盘检测样品高通量承载料斗支撑架固定底座顶部试管槽输出端底座本实用新型高通量检测检测误差检测装置伺服电机转动安装转动连接导液管联轴器转基因试管滴漏检测污染

[发明专利]用于定性检测艾滋病病毒的试剂和方法-CN202010396986.4有效
发明人：姚均;蒋岩;王爱玲 -专利权人：中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心;中国疾病预防控制中心妇幼保健中心
申请日： 2020-05-12 - 公布日： 2022-08-09 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供一组用于通过多重荧光PCR扩增反应检测艾滋病病毒的引物对，包含该引物对以用于通过多重荧光PCR扩增反应检测艾滋病病毒的试剂盒，以及使用该引物对或试剂盒通过多重荧光PCR扩增反应对艾滋病病毒进行检测的方法通过本发明，可以实现低至10cps的检测下限，并且相对于现有检测方法更为准确。
用于定性检测艾滋病病毒试剂方法

[发明专利]基于数字PCR技术的多重核酸定量检测方法-CN202211221849.2在审
发明人：徐刚伟;赵哲浩;吴东平 -专利权人：江苏圣极基因科技有限公司
申请日： 2022-10-08 - 公布日： 2023-03-28 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明提了一种基于数字PCR的多重核酸定量检测方法，所述多重核酸定量检测方法利用荧光探针编码技术结合多重数字PCR技术，可在单一的反应体系中实现定量检测的靶核酸序列数目明显大于当前数字PCR仪器所具有的荧光通道数目本方法先将荧光探针进行荧光编码标记，再基于数字PCR原理，把编码探针和反应体系分割到成千上万个独立的微液滴中进行扩增反应，根据扩增后每个微液滴在各个荧光通道下的荧光信号强度和荧光阈值，通过单阳性微液滴和共阳性微液滴的不同比例关系，利用统计学公式，可以实现对多重靶核酸序列进行精准的定量检测分析。
基于数字 pcr 技术多重核酸定量检测方法

[发明专利]一种可用于微卫星检测的多重荧光PCR通用接头及检测方法和应用-CN201410345866.6有效
发明人：赵建;朱新平;李伟;王亚坤;文萍 -专利权人：中国水产科学研究院珠江水产研究所
申请日： 2014-07-18 - 公布日： 2014-12-03 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种可用于微卫星检测的多重荧光PCR通用接头，包括4条接头，分别为接头1、接头2、接头3和接头4，接头1～4的核苷酸序列如SEQ ID：1～4中所示，该通用接头PCR扩增效率高，不互相干扰，还公开了一种利用上述可用于微卫星检测的多重荧光PCR通用接头进行微卫星多重荧光PCR检测的方法，该方法进行多重PCR时只需合成4条活3条荧光接头即可进行引物筛选和分型实验，步骤简洁，实验时间短，实验成本低
一种用于卫星检测多重荧光 pcr 通用接头方法应用

[发明专利]禽流感病毒NA亚型多重探针组合荧光定量RT-PCR分型方法-CN201710094558.4有效
发明人：彭大新;孙志豪;陈素娟;秦涛;孟菲菲;王宵;刘秀梵;顾敏 -专利权人：扬州大学
申请日： 2017-02-21 - 公布日： 2021-02-19 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明提供了一种禽流感病毒NA亚型RT‑PCR单重检测引物组，以及禽流感病毒NA亚型RT‑PCR多重检测引物组与禽流感病毒NA亚型RT‑PCR多重检测试剂盒，其中禽流感病毒NA亚型RT‑PCR多重检测引物组包括3组禽流感病毒NA亚型RT‑PCR检测引物组，每组禽流感病毒NA亚型RT‑PCR检测引物组包括一对特异性引物对和一个荧光基团标记的探针。本发明建立的3个多重探针荧光定量组合RT‑PCR体系，每个体系中的各个成分互不干扰，且都能特异地检测出3个不同NA亚型。本发明只需要同时进行3个体系的荧光定量PCR，根据CT值就能直接判断出NA亚型，实验流程更加省时、方便，实验结果更加直观、可信。
禽流感病毒 na 多重探针组合荧光定量 rt pcr 方法

[发明专利]一种基于毛细管四色荧光电泳检测和多重荧光PCR扩增的高通量棉花品种指纹库构建方法-CN201810338628.0有效
发明人：吴玉珍;匡猛;周大云;黄龙雨;单峰 -专利权人：中国农业科学院棉花研究所
申请日： 2018-04-16 - 公布日： 2021-07-30 - 主分类号： C12Q1/686 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于毛细管四色荧光电泳检测和多重荧光PCR扩增的高通量棉花品种指纹库构建方法，该方法包括将分布于棉花A亚组或D亚组全基因组26条染色体上的52对核心引物进行多重荧光PCR组合，提取棉花DNA作为待测样品，使用52对核心引物按照多重荧光PCR组合方式组合得到的5个组合分别对待测样品进行pSSR‑PCR扩增反应，得到PCR扩增产物，将PCR扩增产物进行毛细管四色荧光电泳检测与数据分析。本发明能极大地提高检测通量，检测效率高，该方法尤其适用于大批量棉花品种DNA指纹库的构建。
一种基于毛细管荧光电泳检测多重 pcr 扩增通量棉花品种指纹构建方法

[发明专利]新型鹅星状病毒、鹅副黏病毒、鹅细小病毒多重荧光定量PCR检测引物、试剂盒及应用-CN201811337259.X在审
发明人：孟凯;王友令;于江;袁小远;张玉霞;杨金星;李莉;黄玉珍;冯友涛 -专利权人：山东省农业科学院家禽研究所（山东省无特定病原鸡研究中心）
申请日： 2018-11-12 - 公布日： 2019-07-05 - 主分类号： C12Q1/70 文献下载
摘要：本发明涉及病毒检测技术领域，特别涉及新型鹅星状病毒、鹅副黏病毒、鹅细小病毒多重荧光定量PCR检测引物对及特异性探针的应用。本发明建立的多重荧光定量PCR体系可准确检测新型鹅星状病毒、鹅副黏病毒、鹅细小病毒的单一或混合感染，并对该多重荧光定量PCR体系进行了优化，确定了最佳的引物浓度和最佳的探针浓度，使检测精度更高，在病毒鉴别领域具有重要优势
多重荧光定量PCR 鹅细小病毒星状病毒检测引物病毒病毒检测技术特异性探针病毒鉴别混合感染重要优势准确检测试剂盒探针引物应用检测优化

[发明专利]一种高效的多重荧光定量PCR试剂盒及其制备方法-CN201811651557.6在审
发明人：张清仪;李新瑞;缪丹;任加庆;臧赢 -专利权人：吴江近岸蛋白质科技有限公司
申请日： 2018-12-31 - 公布日： 2019-03-29 - 主分类号： C12Q1/6851 文献下载
摘要：本发明提供了本发明其中一方面开发了一种高效的多重荧光定量PCR反应液及试剂盒、制备方法和荧光定量PCR方法。本发明的其中一方面提供了一种高效的多重荧光定量PCR反应液,该高效的多重荧光定量PCR反应液包含基础缓冲液和蛋白质保护液。通过对试剂灵敏度及扩增性能的检测，发现本研究提供的多重荧光定量PCR试剂具有比传统试剂更高的灵敏度及扩增性能。本发明优化了多重荧光定量PCR反应液，特别是通过加入一些特定的添加剂，如一定比例的甘油、BSA和DTT等，提高了反应的灵敏度、特异性及稳定性。
多重荧光定量PCR 灵敏度试剂盒扩增制备荧光定量PCR 蛋白质保护基础缓冲液传统试剂甘油添加剂检测优化发现开发研究

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