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[发明专利]胎盘间充质干细胞的分离和纯化方法-CN202011568941.7有效
发明人：王正;刘冰;肖海蓉;汤乐 -专利权人：博雅干细胞科技有限公司
申请日： 2020-12-25 - 公布日： 2023-03-21 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及胎盘间充质干细胞的分离和纯化方法。具体涉及用于传代培养胎盘间充质干细胞的培养基，其是以DMEM‑F12培养基为基质配制并包含：血小板裂解物、人血白蛋白、重组胰岛素、EGF等等。分离和传代培养胎盘间充质干细胞的方法包括(a)分离培养原代胎盘间充质干细胞和(b)传代培养胎盘间充质干细胞两个阶段，其中在分离培养原代胎盘间充质干细胞的阶段使用原代完全培养基培养得到原代胎盘间充质干细胞，P0代及后续的代次使用传代完全培养基培养细胞得到P1至P10代的间充质干细胞。本发明方法呈现如说明书所述优异效果，尤其是通过使用无血清的培养基获得高收率且高活率的间充质干细胞。
胎盘间充质干细胞分离纯化方法

[实用新型]间充质干细胞原代培养皿-CN201920857399.3有效
发明人：袁光宇;刘敏;孙琰;田祥 -专利权人：贵州中观生物技术有限公司
申请日： 2019-06-10 - 公布日： 2020-07-07 - 主分类号： C12M3/00 文献下载
摘要：本实用新型涉及培养皿领域，具体涉及技术领域为间充质干细胞原代培养皿。间充质干细胞原代培养皿包括，皿盖、皿底、样品托。本实用新型能够解决较长的原代培养时间里游离出来的间充质干细胞与组织块融合密切不易分离，换液过程导致组织块松动，不利于间充质干细胞的游离问题。
间充质干细胞培养皿

[发明专利]一种脐带间充质干细胞的制备方法-CN202310719859.7在审
发明人：韦艳;蒋杰球;方晓 -专利权人：广西先康达生物科技有限公司
申请日： 2023-06-17 - 公布日： 2023-09-29 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及细胞培养技术领域，具体为一种脐带间充质干细胞的制备方法，分别在脐带间充质干细胞的原代和传代培养过程中采用不同的培养基和操作办法，其中在原代中采用消化法，有效缩短脐带间充质干细胞的原代培养时间，提高培养效率，在传代中使用验证的接种密度以及更换培养液时间，提高脐带间充质干细胞的增殖活性。本发明的制备方法有助于短时间内就有细胞从组织边缘长出，提高了初始细胞数量，在常规原代细胞生长时间内能扩增出更多的原代细胞，提高细胞增殖率与数量；有助于缩短脐带间充质干细胞原代培养时间，使用克瑞斯普消化液，加快了脐带间充质干细胞自组织中爬出的速度，缩短了培养周期，降低了培养成本。
一种脐带间充质干细胞制备方法

[发明专利]间充质干细胞体外传代基因组稳定性检测方法-CN201410025142.3在审
发明人：王有为;韩之波 -专利权人：北京汉氏联合生物技术有限公司
申请日： 2014-01-20 - 公布日： 2014-05-14 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测间充质干细胞体外传代基因组稳定性的方法，由下述步骤组成：（1）原代分离间充质干细胞；（2）对原代分离的间充质干细胞进行短期传代，冻存建库。定义为供者原代传代细胞库；（3）复苏供者原代传代细胞，并对其进行长期传代；（4）提取低代次和高代次脐带间充质干细胞之基因组DNA；（5）采用高通量的生物芯片或测序技术，比较低代次和高代次间充质干细胞基因组DNA的差异；（6）基于高通量分析结果，对供者原代传代细胞基因组稳定性做出评价。本发明可以排除基因组不稳定的间充质干细胞，筛选出基因组稳定的间充质干细胞，增加干细胞临床应用的安全性。
间充质干细胞体外传代基因组稳定性检测方法

[发明专利]从脐带组织中获取原代间充质干细胞的方法-CN201910096096.9有效
发明人：赵进军;谷广其;杨桂花;赵宇飞;李张鹏 -专利权人：和携科技（北京）有限公司
申请日： 2019-01-31 - 公布日： 2021-02-19 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种从脐带组织中获取原代间充质干细胞的方法，与现有技术相比，本发明采用组织块贴壁法对华通氏胶组织进行多次培养，可获得更多的原代间充质干细胞，提高了原代间充质干细胞的产量；而且使用无血清培养基加血清代替物培养，培养过程不使用胎牛血清，避免了因动物源成分的引入造成污染和对所述干细胞后期使用的不良影响；另外，用消化酶TrypLE消化细胞，该酶为非动物来源，且对细胞作用温和，大大降低细胞的消化损伤；获得原代间充质干细胞后，通过滤网过滤掉细胞悬液中的残余组织块，提高了原代间充质干细胞的均一度。
脐带组织获取原代间充质干细胞方法

[发明专利]一种胎盘间充质干细胞的分离及培养方法-CN201710067278.4在审
发明人：张凤宁 -专利权人：贵州泛特尔细胞生物技术有限公司
申请日： 2017-02-06 - 公布日： 2017-11-10 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种胎盘间充质干细胞的分离及培养方法，属于间充质干细胞领域，所述分离及培养方法按如下步骤实施原代组织剥取步骤、组织块消化步骤、接种处理步骤、原代细胞培养及收获步骤以及原代细胞传代步骤。本发明公开的胎盘间充质干细胞的分离及培养方法，其采用组织块法对胶体进行分离，能够获得数量可观的原代细胞，适合大规模工业化生产，胎盘间充质干细胞原代培养符合标准要求，能有效保证续代的遗传稳定性，为临床医学种子细胞的应用提供了良好的基础
一种胎盘间充质干细胞分离培养方法

[发明专利]间充质干细胞的培养方法及应用-CN202210325730.3在审
发明人：刘赢滢;姜舒;张芸;赵传鑫;李欣 -专利权人：深圳市茵冠生物科技有限公司
申请日： 2022-03-30 - 公布日： 2022-06-07 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及细胞培养技术领域，具体涉及一种间充质干细胞的培养方法及应用。所述间充质干细胞的培养方法，包括间充质干细胞原代细胞的提取、间充质干细胞原代细胞的培养扩增以及间充质干细胞的分离等步骤。本发明提供了一种间充质干细胞的培养方法，生产成本低，过程简单，易于操作，培养出来的干细胞可用于生产组织和细胞。
间充质干细胞培养方法应用

[发明专利]一种原代脐带间充质干细胞的培养基及其应用-CN202110835360.3有效
发明人：成芳;苏晓华 -专利权人：廊坊康宝汇泰生物技术有限公司
申请日： 2021-07-23 - 公布日： 2022-09-20 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明细胞培养技术领域，具体涉及一种原代脐带间充质干细胞的培养基及其应用。本发明采用脐带间充质干细胞上清液和/或银胶菊内酯培养原代细胞，相较于传统组织块贴壁法，能有效缩短原代脐带间充质干细胞的制备时间，且保持其较好的细胞活率、表型及功能。
一种脐带间充质干细胞培养基及其应用

[发明专利]间充质干细胞悬浮液及其制备方法与应用-CN201810155580.X在审
发明人：杨涛;隋昳 -专利权人：深圳至博生物科技有限公司
申请日： 2018-02-23 - 公布日： 2018-08-28 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，提供一种间充质干细胞悬浮液及其制备方法与应用。一种间充质干细胞悬浮液的制备方法，包括：获取间充质干细胞原代细胞；间充质干细胞原代细胞的培养扩增；及间充质干细胞悬浮液的制备。本发明还提供一种间充质干细胞悬浮液，利用上述间充质干细胞悬浮液的制备方法制备得到。本发明还提供一种间充质干细胞悬浮液的应用，将上述的间充质干细胞悬浮液用于治疗糖尿病的药物注射。
悬浮液间充质干细胞制备充质干细胞种间原代细胞生物技术领域应用药物注射扩增糖尿病治疗

[发明专利]间充质干细胞的分离培养方法及冻存、复苏方法-CN201810155579.7在审
发明人：杨涛;隋昳 -专利权人：深圳至博生物科技有限公司
申请日： 2018-02-23 - 公布日： 2018-07-24 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，提供一种间充质干细胞的分离培养方法及冻存、复苏方法。一种间充质干细胞的分离培养方法，包括：获取间充质干细胞原代细胞；间充质干细胞原代细胞的培养扩增：间充质干细胞的分离。该间充质干细胞的分离培养方法，能得到具有良好的细胞质量、安全性以及生物学效应的间质干细胞。并且针对上述间充质干细胞的分离培养方法所得到的间质干细胞，本发明还提供一种间充质干细胞的冻存、复苏方法，能很好的保存并复苏该间质干细胞。
间充质干细胞分离培养充质干细胞间质干细胞冻存种间复苏原代细胞生物技术领域生物学效应扩增细胞保存

[发明专利]一种脐带来源原代间充质干细胞的分离培养方法-CN202010058155.6在审
发明人：姚远;巩燕山;杜亚静;郑晓光 -专利权人：北京永华燕芸生物科技有限公司
申请日： 2020-01-18 - 公布日： 2020-05-08 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及一种脐带来源原代间充质干细胞的分离培养方法，属于生物技术领域。本发明的分离培养方法包括组织的保存液的配制、脐带采集、脐带消毒清洗、华通氏胶分离、华通氏胶剪碎、离心分离和接种处理。本发明以人脐带为材料提取原代间充质干细胞，提取培养过程无需消化酶，对组织内细胞无伤害，原代细胞分离也无需过滤，提高了提取效率；本发明的培养周期短，效率高，获得的原代间充质干细胞稳定。
一种脐带来源原代间充质干细胞分离培养方法

[发明专利]一种脐带间充质干细胞的分离及培养方法-CN201710067279.9在审
发明人：张凤宁 -专利权人：贵州泛特尔细胞生物技术有限公司
申请日： 2017-02-06 - 公布日： 2017-05-31 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明公开了一种脐带间充质干细胞的分离及培养方法，属于间充质干细胞领域，所述分离及培养方法按如下步骤实施胶体分离步骤、组织块制备步骤、接种处理步骤、原代细胞培养及收获步骤、原代细胞传代步骤以及细胞传代步骤本发明公开的脐带间充质干细胞的分离及培养方法，其采用组织块法对胶体进行分离，能够获得数量可观的原代细胞，适合大规模工业化生产。
一种脐带间充质干细胞分离培养方法

[发明专利]一种滑膜间充质干细胞的制备方法及应用-CN202211504540.4在审
发明人：刘赢滢;胡波浔;谢亮;赵传鑫;李欣;谢元进;姜舒;张芸 -专利权人：深圳市茵冠生物科技有限公司
申请日： 2022-11-29 - 公布日： 2022-12-27 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及生物技术领域，具体公开了一种滑膜间充质干细胞的制备方法及应用。所述制备方法中，加入了完全培养基进行培养，完全培养基包括基础培养基、人AB血清、NEAA、谷氨酰胺和薏苡仁提取物。本发明创新性地提供了一种用于制备滑膜间充质干细胞的完全培养基，该培养基有利于滑膜间充质干细胞的培养，大大缩短了原代滑膜间充质干细胞的产出时间（≤6天），同时提高了原代滑膜间充质干细胞的生产数量，采用本发明的完全培养基制备的滑膜间充质干细胞存活率高，细胞纯度也较高，原代的滑膜间充质干细胞经过多次传代，其细胞的存活率仍然较高，细胞总数也较多，为批量生产提供基础。
一种滑膜间充质干细胞制备方法应用

[发明专利]一种人脐带间充质干细胞制剂及其制备方法和应用-CN202211743191.1在审
发明人：郭丰彪;潘庆军;潘权任;刘华锋;李爱芬;廖淑珍;肖增智 -专利权人：广东医科大学附属医院
申请日： 2022-12-30 - 公布日： 2023-04-28 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明属于自身免疫性疾病防治技术领域，公开了一种人脐带间充质干细胞制剂及其制备方法和应用。本发明制备方法包括以下步骤：获取原代人脐带间充质干细胞；所述原代人脐带间充质干细胞来自足月剖宫产新生儿脐带组织；所述新生儿的母亲年龄为20～25；所述脐带组织为脐带新生儿一端8～12cm的位置截取的长度为5～10cm的脐带组织；培养和扩增所述原代人脐带间充质干细胞，得传代人脐带间充质干细胞；将所述传代人脐带间充质干细胞制备细胞悬液，即成。本发明所制备的人脐带间充质干细胞对早期或轻症SLE具有优异的疗效，具有调节紊乱的免疫功能，减缓或改变疾病进程的效果，为早期或轻症SLE的治疗提供了一种新的治疗策略。
一种脐带间充质干细胞制剂及其制备方法应用

[发明专利]乳牙牙髓在制备间充质干细胞中的应用和乳牙牙髓间充质干细胞的培养方法-CN201210318439.X无效
发明人：刘忱;蔡鹏;张京 -专利权人：沙船（天津）生物科技发展有限公司
申请日： 2012-08-31 - 公布日： 2012-12-05 - 主分类号： C12N5/0775 文献下载
摘要：本发明涉及一种乳牙牙髓在制备间充质干细胞的应用及乳牙牙髓间充质干细胞培养方法，步骤如下：将乳牙经过原代培养获得乳牙牙髓间充质干细胞原代细胞混合液，再将乳牙牙髓间充质干细胞原代细胞混合液经传代培养即获得乳牙牙髓间充质干细胞本发明采用了乳牙牙髓作为制备间充质干细胞的组织材料，这与骨髓、脐带血、胎盘不同，采集的方式为自然脱落或手术拔除的儿童完整乳牙。以上下颚各6颗乳牙培养出之乳牙干细胞最好，由于不必一出生就取样，而且还有20次采集的机会，所以即使错过胎盘和脐带组织采集机会的人，和目前已曾掉落来不及收集的儿童，20颗中的任何一颗乳牙，皆有机会获得乳牙间充质干细胞
乳牙牙髓制备间充质干细胞中的应用培养方法

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