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[发明专利]具有卡那霉素抗性的重组pUC57载体及其构建方法-CN201210178980.5无效
发明人：董亢;陈文柱;徐士军;卢圣东;王珠银 -专利权人：南京金斯瑞生物科技有限公司
申请日： 2012-06-01 - 公布日： 2013-12-18 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明属于基因工程领域，公开了具有卡那霉素抗性的重组pUC57载体及其构建方法。具有卡那霉素抗性的重组pUC57载体，其特征在于其序列如SEQ ID NO.1所示。将克隆得到的pUC57载体骨架与含有卡那霉素抗性基因的片段发生同源重组得到了本发明具有卡那霉素抗性的重组pUC57载体。
具有卡那霉素抗性重组 puc57 载体及其构建方法

[发明专利]一种消除卡那霉素耐药基因活性的重组载体及其构建方法-CN201510920436.7在审
发明人：李国才;徐桐桐;卞晓锐;单彩龙;赵丹;焦红梅 -专利权人：扬州大学
申请日： 2015-12-11 - 公布日： 2016-04-06 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明提供了一种消除卡那霉素耐药基因活性的重组载体,以消除生物体内耐药细菌，解决细菌具有卡那霉素耐药性的问题。所述消除卡那霉素耐药基因活性的重组载体的特征在于，包括消除了氯霉素抗性的pCas9载体和针对卡那霉素抗性基因kan的gRNA核酸序列：KR58或KR208，其具体核酸序列分别如下：KR58：GCCGCGAT其构建方法主要包括：利用基因编辑新工具CRISPR/Cas9系统携带该间区核酸，去除重组载体上的氯霉素抗性基因后转化入减毒沙门菌等疫苗载体菌，重组菌与卡那霉素耐药菌共培养，重组菌细胞内的重组载体通过接合方式进入卡那霉素耐药菌，有效抑制卡那霉素抗性基因kan的活性，使原来耐药的细菌在卡那霉素培养基上不能生长。
一种消除卡那霉素耐药基因活性重组载体及其构建方法

[发明专利]带内含子的卡那霉素抗性基因及其应用-CN00119594.8无效
发明人：姚泉洪;彭日荷;熊爱生 -专利权人：上海市农业科学院生物技术研究中心
申请日： 2000-08-11 - 公布日： 2004-04-21 - 主分类号： C12N15/11 文献下载
摘要：利用PCR方法，在卡那霉素抗性基因编码区N端13位插入一个189bp植物内含子，合成带内含子的卡那霉素抗性基因。在转基因植物中，该基因不但可以用来替换卡那霉素抗性基因作为转化体抗性筛选，而且比卡那霉素抗性基因更具优点：(1)在转化过程中，不需加入其它抗生素即可完成植物转化体选择和杀灭农杆菌的双重目的，防止了其它抗生素对转化的影响(2)该基因在原核细菌中没有活性，消除了抗性基因对环境的污染。
内含卡那霉素抗性基因及其应用

[发明专利]一种产两性霉素B的重组结节链霉菌及其应用-CN201710962492.6有效
发明人：郑裕国;柳志强;张博;黄恺;周奕腾;张海东 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2017-10-17 - 公布日： 2020-04-14 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种产两性霉素B的重组结节链霉菌及其应用，所述重组结节链霉菌是将SEQ ID NO.1所示卡那霉素抗性基因序列导入结节链霉菌(Streptomyces nodosus)ZJB2016050获得的；通过导入卡那霉素抗性基因，使原本不具抗性的生产菌株带有卡那霉素抗性，提高种子培养基的菌种纯度和质量，实验室种子培养未出现染菌现象。
一种两性霉素重组结节霉菌及其应用

[发明专利]一种温控裂解质粒及其构建以及在菌蜕制备中的应用-CN201811448234.7在审
发明人：汪玮;汪浩;施慧;许文军 -专利权人：浙江省海洋水产研究所
申请日： 2018-11-30 - 公布日： 2019-03-01 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明涉及一种温控裂解质粒及其构建以及在菌蜕制备中的应用，其特征在于：所述温控裂解质粒为具有卡那霉素抗性的温控裂解质粒220E‑Kn，该220E‑Kn的核苷酸序列为SEQ ID NO：1，与现有技术相比，本发明具有如下优点：所构建的温控裂解质粒具有卡那霉素抗性，可用于对卡那霉素敏感的致病菌的菌蜕构建，同时，相比于带有卡那霉素抗性的自杀质粒，本发明构建的质粒只需一轮抗性筛选即可获得用于菌蜕制备的阳性菌株
质粒构建裂解温控卡那霉素抗性制备致病菌核苷酸序卡那霉素抗性筛选阳性菌株自杀质粒基因组宿主菌可用应用复制遗传敏感

[发明专利]一种穿梭质粒及其衍生质粒-CN200810084486.6有效
发明人：丁久元;李开;刘桂明;赵智;王宇;张英姿 -专利权人：中国科学院微生物研究所
申请日： 2008-03-25 - 公布日： 2008-08-27 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明所提供的穿梭质粒的核苷酸序列是序列表中的序列1；序列表中序列1的自5′末端第4872－5664位脱氧核糖核苷酸为卡那霉素抗性基因及其启动子。本发明还公开了该穿梭质粒的衍生质粒，它是将序列表中序列1的自5′末端第4872－5664位的卡那霉素抗性基因及其启动子进行倒位后，在其多克隆位点插入报告基因和谷氨酸棒杆菌LeuB基因的转录终止子得到的；所述报告基因的方向与所述卡那霉素抗性基因及其启动子方向相反；所述谷氨酸棒杆菌LeuB基因的转录终止子位于所述报告基因与所述卡那霉素抗性基因之间。
一种穿梭质粒及其衍生

[发明专利]一种基于自然转化的拟态弧菌高效遗传重组方法及应用-CN201710470525.5有效
发明人：耿毅;余泽辉;邓钊宾;汪开毓;陈德芳;欧阳萍;黄小丽;杨泽晓 -专利权人：四川农业大学
申请日： 2017-06-20 - 公布日： 2021-01-08 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明公开了一种基于自然转化的拟态弧菌高效遗传重组方法及应用，该方法以拟态弧菌SCCF01株基因组为模板，使用目的基因上臂和目的基因下臂引物对扩增目的基因上臂序列和下臂序列；并扩增卡那霉素抗性基因片段；将扩增得到的卡那霉素抗性基因片段、目的基因上臂序列和下臂序列片段进行融合，得到含有卡那霉素抗性基因片段、目的基因上臂序列和下臂序列片段的融合PCR产物；将获得融合PCR产物与受体拟态弧菌SCCF01株进行自然转化，经过对抗性标记基因的筛选，获得拟态弧菌SCCF01株的缺失株。
一种基于自然转化拟态弧菌高效遗传重组方法应用

[发明专利]一种源于红球菌属微生物的卡那霉素抗性基因-CN95115824.4无效
发明人：汤不二夫;加藤真美 -专利权人：三菱人造丝株式会社
申请日： 1995-08-04 - 公布日： 2002-03-06 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明涉及一种源于红球菌属微生物并对宿主赋予卡那霉素抗性的DNA，所说DNA携带可编码SEQNO1的氨基酸序列或含其部分氨基酸序列的多肽的DNA序列。本发明的卡那霉素抗性基因用于构建红球菌属微生物载体，特别是玫瑰色红球菌的自主克隆载体。$#!
一种源于球菌微生物卡那霉素抗性基因

[发明专利]一种酪氨酸酚裂解酶基因重组质粒及应用-CN201910571335.1在审
发明人：郑仁朝;汤晓玲;郑裕国 -专利权人：浙江工业大学
申请日： 2019-06-28 - 公布日： 2019-10-25 - 主分类号： C12N15/70 文献下载
摘要：本发明公开了一种酪氨酸酚裂解酶基因重组质粒及应用，本发明在质粒上将cer基因座插入到含有卡那霉素抗性基因的质粒上，在不加卡那抗生素情况下，在cer作用下，发酵20‑48h后，质粒稳定性维持在60％‑90本发明在含有卡那霉素抗性基因和cer1基因座，在加了卡那霉素情况下，发酵20‑48h后，质粒稳定性维持为100％，Fn‑TPL体积酶活达到12000‑15000U/L。
卡那霉素抗性基因裂解酶基因质粒稳定性重组质粒基因座酪氨酸酶活质粒发酵卡那霉素抗生素应用

[发明专利]一种重组工程介导的苜蓿中华根瘤菌Rm1021基因敲除方法-CN201410295367.0无效
发明人：尚广东;陈中秋;庄浩;李玲 -专利权人：南京师范大学
申请日： 2014-06-26 - 公布日： 2014-09-17 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：具体实施步骤为首先通过重叠－延伸聚合酶链式反应扩增获得两侧为针对待敲除基因的约500bp同源片段、中间为卡那霉素抗性基因的融合DNA片段。其次将此DNA片段电转化至异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导重组酶表达的Rm1021细胞中，在卡那霉素抗性筛选之下，卡那霉素抗性基因取代目的基因而获得基因敲除变株。
一种重组工程苜蓿中华根瘤菌 rm1021 基因方法

[发明专利]结核杆菌蛋白质内含子剪接抑制剂筛选系统、构建方法及其应用-CN202110749575.3有效
发明人：齐兴梅;熊思东;李弈阳;章佳兰 -专利权人：苏州大学
申请日： 2021-07-01 - 公布日： 2022-06-14 - 主分类号： C12N15/74 文献下载
摘要：本发明涉及一种结核杆菌蛋白质内含子剪接抑制剂筛选系统，以耻垢分枝杆菌为模式菌，将受蛋白质内含子调控的蛋白质的基因序列插入卡那抗性蛋白基因的65S处，以具有第一抗生素抗性的载体构建重组质粒，转入耻垢分枝杆菌后于含有第一抗生素和卡那霉素的培养基中培养，得到结核杆菌蛋白质内含子剪接抑制剂筛选系统，其中，第一抗生素为非卡那霉素的任一抗生素。通过抑制intein的剪接活性影响卡那抗性蛋白活性，从而影响重组耻垢分枝杆菌在含有卡那霉素的培养基中的生长，筛选出对intein具有抑制作用的药物，实现简单、高效、快速地筛选抗结核新药。
结核杆菌蛋白质内含剪接抑制剂筛选系统构建方法及其应用

[发明专利]一种复制子DNA疫苗载体及其构建方法与应用-CN201310179586.8有效
发明人：于继云;阎瑾琦;贾锐;张亮;徐元基;张巍;王宇;朱晓明 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院基础医学研究所
申请日： 2013-05-15 - 公布日： 2013-08-28 - 主分类号： C12N15/63 文献下载
摘要：本发明具有卡纳霉素抗性的复制子DNA疫苗载体，是将复制子DNA疫苗载体pSCA1中的氨苄青霉素抗性基因置换为卡那霉素抗性基因后得到的，从而使得用该载体制备的复制子DNA疫苗能够适应临床上对氨苄青霉素类药物的实际需求
一种复制子 dna 疫苗载体及其构建方法应用

[发明专利]一种基于脂肪酸去饱和酶基因的抗寒转基因烟草的构建方法-CN201410438235.9在审
发明人：马建忠;刘丹;肖成斌;马燕林;王永刚;张伟杰 -专利权人：兰州理工大学
申请日： 2014-08-29 - 公布日： 2014-12-10 - 主分类号： C12N15/84 文献下载
摘要：连接该基因至植物遗传转化载体pBI121上；经核苷酸序列分析克隆并重组正确的载体转化至农杆菌Agrobacterium tumefaciens LBA4404中；含重组质粒的农杆菌以叶盘法转化烟草无菌苗外植体，筛选出卡那霉素抗性植株并移栽于花盆中，生长成熟后收集种子；种子播种于含卡那霉素的MS培养基上使其萌发生长；从卡那霉素抗性植株的叶片提取核DNA进行PCR检测、点杂交及Southern杂交鉴定；最后，以分子鉴定的阳性转基因烟草作为实验材料，
一种基于脂肪酸饱和基因抗寒转基因烟草构建方法

[发明专利]具有对卡那霉素抗性和增强的L－赖氨酸生产力的棒杆菌属微生物及生产L－赖氨酸的方法-CN200610163706.5有效
发明人：朴英薰;林相曹;文准玉;成珍锡 -专利权人： CJ株式会社
申请日： 2006-11-30 - 公布日： 2007-06-06 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：提供了能够生产L－赖氨酸并对卡那霉素有抗性的棒杆菌属微生物，以及使用其生产L－赖氨酸的方法。
具有卡那霉素抗性增强赖氨酸生产力杆菌微生物生产方法

[发明专利]一种重组工程介导的大肠杆菌基因组点突变的方法-CN201210203212.0有效
发明人：尚广东;蒋伏欢;张飞飞;石牡丹 -专利权人：南京师范大学
申请日： 2012-06-19 - 公布日： 2012-10-03 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本方法是先通过重叠－延伸聚合酶链式反应获得一个两端为与靶位点两侧序列一致的各50bp同源臂，中间为突变位点、与靶位点下游序列一致的30bp同源片段、两侧为两个归巢核酸酶I-SceI酶切位点的卡那霉素抗性基因的修饰片段；然后将50bp同源臂之间的片段整合至大肠杆菌基因组，突变位点取代基因组上的靶位点，获得卡那霉素抗性突变株。随后热失活的氯四环素诱导I-SceI酶的表达，催化30bp同源片段与靶位点下游30bp之间发生同源重组，从而将30bp同源片段、两个I-SceI酶切位点及卡那霉素抗性基因消除，获得发生点突变的大肠杆菌突变株
一种重组工程大肠杆菌基因组突变方法

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