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[发明专利]一种灰黄霉素单菌落冷冻菌的制备方法-CN201811492045.X在审
发明人：曹凤娟;张国银;胡建华;丛立双;付桂杰;张红玉;高峰 -专利权人：赤峰制药股份有限公司
申请日： 2018-11-30 - 公布日： 2019-02-22 - 主分类号： C12N1/14 文献下载
摘要：本发明公开了一种灰黄霉素单菌落冷冻菌的制备方法，它包括分离单菌落、制备单菌落甘油管、筛选单菌落菌种、制备单菌落冷冻菌等步骤，在分离纯化过程中的单菌落甘油孢子悬液分装于3支甘油管，其中2支单菌落甘油管分别用于摇瓶初筛和摇瓶复筛，另外1支单菌落甘油管直接用于单菌落冷冻菌的制备。
单菌落制备甘油管冷冻菌菌种灰黄霉素摇瓶分离单菌落传代发酵单位发酵效价分离纯化分生孢子菌种生长菌种制备无菌操作制备过程孢子悬液保藏复壮甘油初筛分装复筛染菌死亡率减慢中和繁殖筛选死亡环节保证

[发明专利]一种纤维素及石油烃降解细菌的分离方法-CN201910910605.7在审
发明人：宫春杰;王崇鞠 -专利权人：湖北工业大学
申请日： 2019-09-25 - 公布日： 2019-12-31 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：纤维素及石油烃降解细菌的分离方法，包括步骤：(1)富集培养：取常年落有草木、秸秆、落叶的森林土壤，采用浓度梯度法接种于富集培养基上，培养直至出现单菌落，转移至羧甲基纤维素为唯一碳源平板上进行纯化，直至出现单菌落；(2)复筛：将单菌落在羧甲基纤维素为唯一碳源平板上连续传代；(3)定向筛选：单菌落转移至以微晶纤维素粉为唯一碳源平板上，直至出现单菌落，连续传代；(4)原油降解细菌目标筛选：将单菌落通过平板划线法转移至原油平板上，培养至单菌落出现；(5)菌种鉴定：扩增单菌落的16SrDNA，将16SrDNA比对鉴定，比对后为细菌菌属的保留。
单菌落唯一碳源羧甲基纤维素石油烃降解细菌连续传代纤维素比对微生物分离技术富集培养基浓度梯度法平板划线法微晶纤维素定向筛选富集培养菌种鉴定目标筛选森林土壤细菌菌属原油降解复筛扩增落叶接种草木秸秆原油保留

[发明专利]一种降解阿特拉津及纤维素的细菌的筛选方法-CN201911220195.X在审
发明人：宫春杰;王崇鞠 -专利权人：湖北工业大学
申请日： 2019-12-03 - 公布日： 2020-03-20 - 主分类号： C12N1/22 文献下载
摘要：一种降解阿特拉津及纤维素的细菌的筛选方法，包括步骤：取常年落有草木、秸秆、落叶的森林土壤，采用浓度梯度法接种于富集培养基上，培养直至出现单菌落，转移至羧甲基纤维素为唯一碳源平板上进行纯化，直至出现单菌落；(2)将单菌落在羧甲基纤维素为唯一碳源平板上连续传代；(3)单菌落转移至以微晶纤维素粉为唯一碳源平板上，直至出现单菌落，连续传代；(4)将单菌落通过平板划线法转移至阿特拉津定向筛选培养基上，培养至单菌落出现；(5)扩增单菌落的16SrDNA，将16SrDNA比对鉴定，比对后为细菌菌属的保留。
一种降解阿特拉津纤维素细菌筛选方法

[发明专利]一种具有高效抑藻活性的菌株及其筛选鉴定方法与应用-CN202211214137.8在审
发明人：车淑平;张猛;吴侨军 -专利权人：广东核电合营有限公司;苏州热工研究院有限公司;中广核核电运营有限公司;中国广核集团有限公司;中国广核电力股份有限公司
申请日： 2022-09-30 - 公布日： 2023-04-04 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：；筛选鉴定方法包括以下步骤：S1、分离纯化：从海水中分离单菌落；S2、扩大培养与筛选：液体培养单菌落得到菌悬液；S3、纯化筛选菌落：将菌悬液划线纯化；S4、鉴定：对筛选菌落进行生理生化试验和16SrDNA
一种具有高效活性菌株及其筛选鉴定方法应用

[发明专利]一种唾液产气微生物的分离方法-CN202011410962.6在审
发明人：高茜;米其利;罗娜;王雪;许力;管莹;向海英;曾婉俐;杨光宇;李雪梅 -专利权人：云南中烟工业有限责任公司
申请日： 2020-12-03 - 公布日： 2021-03-16 - 主分类号： C12Q1/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种唾液产气微生物的分离方法，包括如下步骤：(1)稀释采集的唾液；(2)将稀释的唾液涂布于不同类型的培养基上，在厌氧环境中恒温培养；(3)待培养基上生长出菌落后，取无菌薄膜贴于培养基上，判断菌落是否产气；(4)选取产气的菌落进行划线纯化后，接种至同类型的培养基上；(5)重复执行步骤(3)和(4)；(6)对步骤(5)中得到产气菌落进行划线纯化，直到得到单菌落；(7)将单菌落接种至装有同类型的培养基并放置了杜氏小管的离心管中进行恒温培养，出现气泡的菌落即为唾液产气微生物。
一种唾液微生物分离方法

[发明专利]一种筛选PHA产生菌的方法-CN202010004163.2在审
发明人：陈宁远 -专利权人：陈宁远
申请日： 2020-01-03 - 公布日： 2021-07-06 - 主分类号： C12Q1/04 文献下载
摘要：本发明公开了一种筛选PHA产生菌的方法，步骤如下:1）培养基的制作；2）PHA产生菌的富集；3）PHA产生菌的的筛选：向培养基平板中喷洒溴百里酚蓝指示剂，对菌落周围变蓝的菌落做好标记，置于紫外灯下观察，若有橙色荧光出现则为PHA产生菌；用灭菌枪头挑取上述单菌落，涂片，置于荧光显微镜蓝光下观察验证，然后，挑取单菌落，摇床中振荡富集2h，用接种环蘸取少量菌液在新的平板培养基上划线分离，37℃倒置培养24h后，挑取单菌落并编号，如此反复纯化分离。本发明从众多筛选PHA产生菌的指示剂中，选择两种指示剂，采用一步筛选法，节约时间，节省材料，同时还能降低假阳性率，减少纯化分离所需周期。
一种筛选 pha 产生方法

[发明专利]一种长链烷烃降解菌及其应用-CN202111035194.5在审
发明人：刘音颂 -专利权人：东北石油大学
申请日： 2021-09-05 - 公布日： 2021-11-23 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：base:Sup>.....10‑8，10‑9，每个浓度涂布三个培养皿平行培养，于35℃恒温箱中倒置培养，待平板长出菌落后，根据菌落的形态、大小和颜色挑取不同的单菌落；（3）长链烷烃降解菌的纯化：取分离的单菌落，在分离培养基平板上采用划线法，于35℃恒温箱中倒置培养7d；如此反复转接三次，直至获得纯化的单菌落，得到长链烃降解菌
一种烷烃降解及其应用

[发明专利]一种广谱抑菌活性的贝莱斯芽孢杆菌HNt7及制备方法和应用-CN201810202569.4有效
发明人：徐文兴;赵梓茜;郭大勇;尤华锋;王利平;洪霓;王国平 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2018-03-13 - 公布日： 2019-12-24 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：步骤是：A、无菌环境下挑取贝莱斯芽孢杆菌HNt7菌株单菌落，接种于培养基，调节温度，振荡培养；B、每瓶装发酵液，按照比例加入单菌落菌液，放置在大振幅恒温冷冻摇床中，振荡培养；C、拮抗菌的分离：用浓度的酒精浸泡，再用无菌水漂洗，于培养箱中暗培养，将长出来的细菌菌落转移至新的培养基上划线分离纯化单菌落；D、分离纯化后，获得贝莱斯芽孢杆菌HNt7。
贝莱斯芽孢杆菌单菌落制备方法和应用广谱抑菌活性振荡培养培养基菌株梨树无菌水漂洗防病效果分离纯化恒温冷冻划线分离酒精浸泡无菌环境细菌菌落拮抗细菌暗培养发酵液腐烂病梨果实培养箱拮抗菌防效菌液喷施树势摇床制备接种落叶预防治疗应用

[发明专利]一种提高小单孢菌生产能力的培养方法-CN201810297884.X在审
发明人：黄凤珠;周兵兵;王为民;龚振宝;吴美蓉;巫秋萍 -专利权人：丽珠集团福州福兴医药有限公司
申请日： 2018-03-30 - 公布日： 2018-09-04 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：本发明属于工业微生物领域，特别涉及一种提高小单孢菌生产能力的培养方法；包括对小单孢菌菌落依次进行斜面培养、种子培养和发酵培养；将分离纯化培养得到的小单孢菌单菌落接种至斜面培养基，培养11d，得到第一菌落；将经过斜面培养基培养制得的第一菌落接种至种子培养基，培养40h，得到第一菌液；将经过种子培养基培养制得的第一菌液接种至发酵培养基，培养120h，得到第二菌液，所述第二菌液为具有高生产能力的小单孢菌；通过对斜面培养
小单孢菌菌液斜面培养基发酵培养斜面培养种子培养生产能力菌落种子培养基培养发酵培养基工业微生物培养基配方种子培养基分离纯化菌落接种菌液接种单菌落效价摇瓶接种验证改进

[发明专利]巨大芽孢杆菌及其制备方法、用途-CN200510091277.0有效
发明人：戴承镛 -专利权人：戴承镛
申请日： 2005-08-15 - 公布日： 2006-06-14 - 主分类号： C12N1/20 文献下载
摘要：包括以下步骤：取畜禽粪，采用营养琼脂进行平板稀释分离、挑取芽孢杆菌的单菌落、纯化，最后采用硫化氢和靛基质生化动力检测方法，将分离出呈阴性的单菌落，即巨大芽孢杆菌，可用于生产生物除臭剂和生物调理剂。
巨大芽孢杆菌及其制备方法用途

[发明专利]一种植物炭疽病菌分生孢子快速分离纯化方法-CN201910590670.6在审
发明人：于琳;何自福;佘小漫;蓝国兵;汤亚飞;李正刚;邓铭光 -专利权人：广东省农业科学院植物保护研究所
申请日： 2019-07-02 - 公布日： 2019-09-20 - 主分类号： C12N3/00 文献下载
摘要：本发明公开了一种植物炭疽病菌分生孢子快速分离纯化方法，包括如下步骤：S1.植物病斑组织炭疽病菌分生孢子的诱导；S2.分生孢子悬浮液的配置；S3.分生孢子悬浮液的浓度测定及稀释；S4.分生孢子的培养；S5.单孢子萌发形成的单菌落的标记；S6.继代培养单菌落获得纯化的单分生孢子分离物。本发明方法操作简单，将孢子液稀释法与显微镜相结合，通过一步法，能在48h内快速、高效的分离获得高纯度的植物炭疽病菌单分生孢子分离物，无需解剖显微镜，技术难度低，获得的分离物能确定是纯化的单分生孢子后代。
分生孢子炭疽病菌分离物分生孢子悬浮液快速分离单菌落种植物显微镜刺盘孢菌技术难度继代培养浓度测定研究植物植物病斑重要意义单孢子高纯度炭疽病稀释法一步法孢子液稀释病斑侵染诱导解剖后代防治配置

[发明专利]一种纯化金针菇单核菌株的方法-CN201310328010.3无效
发明人：张旬旬;黄聿长 -专利权人：超大（上海）食用菌有限公司
申请日： 2013-07-31 - 公布日： 2013-11-20 - 主分类号： A01G1/04 文献下载
摘要：本发明为一种纯化金针菇单核菌株的方法，其特征在于包含以下步骤：将从金针菇子实体收集的担孢子接种到带PDA培养基的平板培养至形成圆形菌落；在菌落边缘挑取连带PDA培养基的菌丝1～2mm作为接种块，接种至新的带PDA培养基的平板，培养至接种块周围有放射状菌丝长出；再次挑取单根菌丝至新的PDA培养基培养，继续培养6～7天得到纯化的菌落，任意挑选菌丝再次培养，得到纯化后的金针菇菌株；PDA培养基配方：去皮马铃薯200g本发明方法能获得高度纯化的单核菌株。
一种纯化金针菇单核菌株方法

[发明专利]一种菌株降解蓝藻毒素的方法-CN201910383602.2在审
发明人：陈道才;陆沙;王怀敏 -专利权人：江苏纳克生物工程有限公司
申请日： 2019-05-08 - 公布日： 2019-08-13 - 主分类号： C02F3/34 文献下载
摘要：本发明公开了一种通过原位分离纯化的菌株降解蓝藻毒素的方法，将云南滇池底泥作为藻毒素降解菌分离源，再通过底泥稀释、染毒涂平板、挑取单菌落、划线纯化、MC‑LR降解率测试得到MC‑LR降解菌。分离所得的气单孢菌属菌株对MC‑LR最大降解效率达54％，本发明方法实用简便，效果显著。
菌株蓝藻毒素底泥降解藻毒素降解染毒单孢菌属降解效率原位分离单菌落分离源降解菌降解率稀释划线测试

[发明专利]一种定量检测产2-甲基异莰醇菌株的方法及装置-CN201810724287.0在审
发明人：陈蕾;姜蕾 -专利权人：上海城市水资源开发利用国家工程中心有限公司
申请日： 2018-07-04 - 公布日： 2018-11-13 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明公开了一种定量检测产2‑甲基异莰醇菌株的方法及装置，该方法包括：取地表水水样，经过微孔过滤后，将滤膜进行总DNA提取纯化，得到DNA样本；以获得的DNA样本为模板进行PCR扩增；对PCR扩增产物进行纯化；将纯化后的DNA进行质粒转化过程，获得转化了质粒的白色菌落；选取饱满的单菌落接种于培养液中振荡培养过夜，以用于菌液PCR鉴定和测序分析；将经过鉴定分析的白色菌落提取质粒，测定质粒浓度后梯度稀释，将稀释后的质粒作为标准样品
质粒菌株白色菌落标准样品待测样本定量检测培养液标准曲线确定临界循环数总DNA提取标准曲线测序分析鉴定分析梯度稀释微孔过滤振荡培养质粒转化定量PCR 单菌落菌液滤膜水样稀释地表水接种转化

[发明专利]一种检测产微囊藻毒素蓝藻的方法及装置-CN201710997320.2在审
发明人：陈蕾;张东;姜蕾;王先云;吴雪飞 -专利权人：上海城市水资源开发利用国家工程中心有限公司
申请日： 2017-10-24 - 公布日： 2017-12-22 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明公开了一种检测产微囊藻毒素蓝藻的方法及装置，该方法包括取地表水水样，经过微孔过滤后，将滤膜进行总DNA提取纯化，得到DNA样本；以获得的DNA样本为模板进行PCR扩增；对PCR扩增产物进行纯化；将纯化后的DNA进行质粒转化过程，获得转化了质粒的白色菌落；选取饱满的单菌落接种于培养液中振荡培养过夜，以用于菌液PCR鉴定和测序分析；将经过鉴定分析的白色菌落提取质粒，测定质粒浓度后梯度稀释，将稀释后的质粒作为标准样品
一种检测产微囊藻毒素蓝藻方法装置

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