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[发明专利]反刍动物乳腺上皮细胞的保存方法-CN201010162042.7无效
发明人：刘红云;刘建新;赵珂 -专利权人：浙江大学
申请日： 2008-11-24 - 公布日： 2010-10-20 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种反刍动物乳腺上皮细胞的保存方法，包括以下步骤：1)制备冷冻保护液，该冷冻保护液由以下体积百分比的组份组成：10％DMSO、40％胎牛血清和50％细胞悬液；2)将上述步骤1)所得的冷冻保护液逐步慢速降温，直至冷冻保护液被降温至-196℃；将上述-196℃的冷冻保护液采用液氮冷冻保存。
反刍动物乳腺上皮细胞保存方法

[发明专利]细胞的保存方法-CN202180018636.7在审
发明人：柳田康友;李家中豪;石田尾武文;南一成 -专利权人：细胞外泌体治疗株式会社
申请日： 2021-03-30 - 公布日： 2022-10-25 - 主分类号： C12N1/04 文献下载
摘要：取得冷冻保护剂浓度低的细胞悬液。使用包括以下工序的细胞的保存方法。工序(a)：从含有细胞和冷冻保护液的细胞悬液浓缩细胞，生成浓缩组分；工序(b)：将所述浓缩组分冷冻，生成冷冻物。或者可以使用包括以下工序的细胞悬液的生产方法工序。工序(a)：从含有细胞和冷冻保护液的细胞悬液浓缩细胞，生成浓缩组分；工序(b)：将所述浓缩组分冷冻，生成冷冻物；工序(c)：将所述冷冻物解冻，生成解冻物的工序；以及工序(d)：将所述解冻物与溶液混合，生成细胞悬液
细胞保存方法

[发明专利]一种人胎盘羊膜和绒毛膜的冷冻保护液及其制备方法-CN201711241799.3在审
发明人：董明珠;李霞云;潘新;刘世红;卢家堃 -专利权人：北京世纪劲得生物技术有限公司
申请日： 2017-11-30 - 公布日： 2019-06-07 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明提供一种人胎盘羊膜和绒毛膜的冷冻保护液及其制备方法，该冷冻保护液主要DMSO、十二烷基氨基丙酸钠、卡波姆微球和卵磷脂按照一定重量份的组成，该冷冻保护液在DMSO内加入十二烷基氨基丙酸钠、卡波姆微球和卵磷脂的混合物制成的冷冻保护液可显著提高该冷冻保护液对人胎盘羊膜和绒毛膜冻存的时间
冷冻保护液人胎盘绒毛膜羊膜十二烷基氨基丙酸钠卵磷脂卡波姆微球制备长期保存混合物重量份冻存细胞

[发明专利]一种玻璃化冷冻液及其制备方法-CN202310887823.X在审
发明人：李培尚;李兴艳;杨云 -专利权人：迈得诺医疗科技集团有限公司
申请日： 2023-07-19 - 公布日： 2023-10-24 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明提出了一种玻璃化冷冻液，所述玻璃化冷冻液包括平衡液和冷冻液；所述平衡液包含如下组分：130～205g/L的渗透性保护剂，9～15g/L的非渗透性保护剂；所述冷冻液包含如下组分：265～405g/L的渗透性保护剂，140～225g/L的非渗透性保护剂；所述渗透性保护剂为乙二醇和/或丙二醇。本发明要提出了一种不使用二甲基亚砜的玻璃化冷冻液，该种玻璃化冷冻液以乙二醇和/或丙二醇作为渗透性的低温保护剂，通过与非渗透性保护剂的复配，实现了良好的玻璃化冷冻效果，并且对细胞损伤较低，细胞存活率和囊胚形成率高
一种玻璃化冷冻及其制备方法

[发明专利]人脐带华通氏胶组织块冻存保护液-CN201110343425.9无效
发明人：欧阳溪;杨兵;李伟;宋云庆;胡祥 -专利权人：江苏省北科生物科技有限公司
申请日： 2011-11-03 - 公布日： 2012-05-02 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了人脐带华通氏胶组织块冻存保护液，1L冻存保护液包括渗透性冷冻保护剂1-1.4mol、非渗透性冷冻保护剂0.1-0.5mol，余量为基础液。本发明的冻存保护液同时含有渗透性冷冻保护剂和非渗透性冷冻保护剂，且渗透性冷冻保护剂的浓度较低，既能达到良好的冻存效果，又对细胞的毒性比较小，同时冻存保护液中含有基础液，既可以为脐带华通氏胶组织块提供营养，又降低了冷冻保护剂对华通氏胶组织块内细胞的毒性，通过本冻存保护液冻存的脐带华通氏胶组织块可以制备出高质量的脐带间充质干细胞，细胞损伤少，冻存保护液残留低，毒副作用小，临床使用时对人体无伤害。
脐带华通氏胶组织块冻存保护

[发明专利]一种关节软骨冷冻保护液及软骨冷冻保存方法-CN201910079425.9在审
发明人：徐艳红 -专利权人：徐艳红
申请日： 2019-01-28 - 公布日： 2019-04-19 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明提供一种关节软骨冷冻保护液，所述冷冻保护液，以重量份计，包括以下组分：羧甲基淀粉18‑22份、鼠李糖2‑3份、鲸蜡烯1‑2份、微晶纤维素2‑4份、半乳甘露糖4‑6份、胞壁酰二肽4‑6份、三棕榈酰五肽本发明还提供一种采用关节软骨冷冻保护液进行软骨冷冻保存方法，包括淋洗、滴加部分冷冻保护液、加入剩余冷冻保护液、程序降温。本发明不使用二甲基亚砜等对细胞有害的冷冻保护剂；本发明所述关节软骨冷冻保存方法，冷冻保存第8周取出复温后，关节软骨的细胞成活率为82‑85%，第10周关节软骨的细胞成活率为78‑80%。
冷冻保护液关节软骨冷冻保存细胞成活率软骨半乳甘露糖胞壁酰二肽二甲基亚砜冷冻保护剂微晶纤维素羧甲基淀粉程序降温去离子水鼠李糖熊果苷重量份滴加复温鲸蜡淋洗五肽棕榈取出细胞

[发明专利]人类卵母细胞冷冻保护剂-CN201510077424.2有效
发明人：曹云霞;章志国 -专利权人：安徽医科大学
申请日： 2015-02-13 - 公布日： 2015-06-03 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了人类卵母细胞冷冻保护剂，包括卵子冷冻液和卵子解冻液，所述卵子冷冻液包括平衡液和冷冻液，所述卵子解冻液包括复苏液、稀释液-1、稀释液-2和清洗液。本发明联合应用了丙二醇和乙二醇两种渗透性冷冻保护剂，并应用海藻糖（Trehalose,α-D-glucopyranosyl α-D-glucopyranoside，C12H22O11）作为非渗透性保护剂为基础开发了本发明本发明开发了一种适合于人类卵母细胞冷冻的非渗透性冷冻保护剂，不仅能抑制细胞内冰晶的形成，而且能使冻融后卵子的功能得以保护，大大改善冻融后卵母细胞的发育潜能，临床结果证明冻融后卵母细胞的受精率、卵裂率、优质囊胚率大大改善
人类细胞冷冻保护

[发明专利]一种猪组织长期保存液及其使用方法-CN202210645972.0在审
发明人：顾以韧;梁艳;杨雪梅;陶璇;王言;杨跃奎;吕学斌;龚建军 -专利权人：四川省畜牧科学研究院
申请日： 2022-06-08 - 公布日： 2022-10-11 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明涉及猪组织保存技术领域，且公开了一种猪组织长期保存液，包括保护液P、冷冻液A以及冷冻液B；所述保护液P包括HTF溶液和5％的HSA；所述冷冻液A包括保存液P、8％的乙二醇和8％的二甲基亚砜；所述冷冻液B包括保存液P、16％的乙二醇、14％的二甲基亚砜和8mg/ml的Ficoll400、以及0.6mol/l的蔗糖。该猪组织长期保存液，通过保护液P、冷冻液A和冷冻液B的作用，可保护组织样本中的细胞免受溶液损伤和冰晶损伤，保护剂P可以通过在细胞内外维持一定的摩尔浓度，降低细胞内外未结冰溶液中电解质的浓度，使细胞免受溶质的损伤，冷冻剂可同组织样本中的水分子结合，弱化水的结晶过程使溶液的粘性增加从而减少冰晶的形成。
种猪组织长期保存及其使用方法

[发明专利]一种高效抗氧化的人卵母细胞冷冻保护剂-CN201910939412.4在审
发明人：章志国;丁丁;穆耀琴;邹慧娟;邹薇薇;陈蓓丽;周平;魏兆莲;曹云霞 -专利权人：安徽医科大学
申请日： 2019-09-27 - 公布日： 2019-12-10 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种高效抗氧化的人卵母细胞冷冻保护剂，包括卵子冷冻液和卵子解冻液，所述卵子冷冻液包括平衡液和冷冻液，所述卵子解冻液包括复苏液、稀释液‑1、稀释液‑2和清洗液。本发明联合应用了丙二醇和乙二醇两种渗透性冷冻保护剂、海藻糖非渗透性保护剂以及褪黑素(melatonin)抗氧化剂。本发明在人卵母细胞冷冻保护剂中添加具备高效抗氧化特性的褪黑素，不仅抑制了冻融后人卵母细胞胞浆内空泡的形成，而且降低了细胞内的氧自由基水平以及钙离子水平，具备保护线粒体功能，防止了人卵子在冻融过程中所遭受的氧化损伤，进而有效地保护了冻融后的人卵子质量。
卵子冷冻液冻融冷冻保护剂人卵母细胞解冻液稀释液黑素渗透性冷冻保护剂非渗透性保护剂抗氧化特性线粒体功能抗氧化剂联合应用卵母细胞氧化损伤氧自由基复苏液钙离子海藻糖抗氧化平衡液清洗液乙二醇有效地胞浆内空细胞

[发明专利]一种冷冻载杆及其操作方法-CN202110943874.0在审
发明人：云新 -专利权人：武汉互创联合科技有限公司
申请日： 2021-08-17 - 公布日： 2021-11-12 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种冷冻载杆，包括胚胎装载区、冷冻滴液区和解冻移胚胎区，胚胎装载区两侧分别与冷冻滴液区和解冻移胚胎区连通，胚胎装载区处于最低位；其操作方法包括将胚胎同培养液一起转移至胚胎装载区内；移除多余的培养液；将平衡液滴加至冷冻滴液区内；使胚胎在平衡液中静置T1分钟；移除平衡液；将冷冻保护剂滴加至冷冻滴液区内；使胚胎在冷冻保护剂中静置T2分钟；移除冷冻保护剂；将冷冻载杆浸没至液氮中。在使用本冷冻载杆进行操作时，只需要对胚胎进行一次转移操作，相较于现有冷冻操作中使用到的冷冻载杆，减少了胚胎转移次数，降低了可能因转移对胚胎造成的损伤。
一种冷冻及其操作方法

[发明专利]生物保存液及其在卵母细胞和卵巢组织保存中的应用-CN202210284579.3在审
发明人：焦芹芹 -专利权人：上海慧存医疗科技有限公司
申请日： 2022-03-22 - 公布日： 2022-05-24 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明提供了一种生物保存液，由平衡液、玻璃化液和N种解冻液组成，N为不小于2的正整数。本发明的所述生物保存液通过控制所述玻璃化液中的非渗透冷冻保护剂的含量高于所述平衡液中的非渗透性冷冻保护剂的含量；所述玻璃化液中的渗透性冷冻保护剂的含量高于所述平衡液中的渗透性冷冻保护剂的含量；不同解冻液中的非渗透性冷冻保护剂的含量不同所述生物保存液有利于提供卵母细胞和卵巢组织生存的微环境，提高细胞和组织的冻存复苏后活率，保存生物活性和功能。本发明还提供了所述生物保存液在卵母细胞和卵巢组织冷冻保存和复苏过程中的应用。
生物保存及其细胞卵巢组织中的应用

[发明专利]红景天多糖在制备抗冻剂中的新用途及其产品和制备方法-CN200610104978.8无效
发明人：李青旺;江中良;胡建宏;赵红卫;李文烨 -专利权人：西北农林科技大学
申请日： 2006-11-27 - 公布日： 2007-05-16 - 主分类号： C12N5/00 文献下载
摘要：本发明公开了红景天多糖在制备生物细胞冷冻抗冻剂、制备保护哺乳动物精液冷冻抗冻剂、制备保护卵母细胞冷冻抗冻剂、制备保护体细胞冷冻抗冻剂、制备保护早期胚胎冷冻抗冻剂、制备保护器官组织冷冻抗冻剂中的新用途，其产品的制备方法是：先将所述重量的葡萄糖、Tris、柠檬酸钠等用无离子水配置成基础液；再将基础液和卵黄按照5～9∶1～5配制，然后加入所述重量青霉素和所述重量链霉素配制成I液，在I液中加入所述重量的甘油配制成II液；在II液中加入所述重量红景天多糖，即得到本发明的生物细胞冷冻抗冻剂。本发明红景天多糖的新用途对于哺乳动物精液、体细胞、卵母细胞、早期胚胎及器官组织冷冻保存具有十分广阔的市场应用前景。
红景天多糖制备抗冻剂中的用途及其产品方法

[发明专利]褐牙鲆精子快速冷冻保存方法-CN200710043611.4无效
发明人：章龙珍;庄平;闫文罡;黄晓荣;张涛;冯广朋;赵峰 -专利权人：中国水产科学研究院东海水产研究所
申请日： 2007-07-09 - 公布日： 2009-01-14 - 主分类号： A61K35/52 文献下载
摘要：褐牙鲆精子快速冷冻保存方法，涉及海水鱼类精子保存方法，需要提供一种操作简便，快速保存褐牙鲆精子，能获得较高精子活率的冷冻保存方法。本发明包括稀释液、抗冻剂、冷冻保护液配制，液氮中保存，其特征是将天然海水稀释，以不能激活精子的稀释海水作为保存精子的稀释液；采用浓度为14g/100ml乙二醇作为抗冻剂；将稀释液+抗冻剂作为褐牙鲆精子的低温冷冻保护液，将冷冻保护液在4℃的恒温箱预冷；精子与保护液按1∶1至1∶3比例均匀混合放入离心管中，将离心管置于液氮罐口下－20℃平衡1min，然后快速投入液氮中保存。本发明用于冷冻保存褐牙鲆精子。
褐牙鲆精子快速冷冻保存方法

[发明专利]一种可使细胞长时间存活的细胞冷冻保护液、细胞制剂及制备方法-CN201510945191.3在审
发明人：魏俊宁;韩莹;杨轶 -专利权人：北京佳宸弘生物技术有限公司
申请日： 2015-12-17 - 公布日： 2016-02-24 - 主分类号： A01N1/02 文献下载
摘要：本发明公开了一种可使细胞长时间存活的细胞冷冻保护液、细胞制剂及制备方法。所述细胞冷冻保护液是包含有人血白蛋白和CryoSure-DEX40冻存液的混合液体。所述细胞制剂包括如前面所述的细胞冷冻保护液和细胞。所述制备方法是，先将CryoSure-DEX40冻存液与人血白蛋白混匀形成如前面所述可使细胞长时间存活的细胞冷冻保护液，再将该细胞冷冻保护液缓慢注入洗涤好的细胞沉淀中，边注入边混匀，最后形成所述细胞制剂使用本发明的制备方法制备出的细胞制剂经过长时间的冷冻保存或长途运输后，细胞的存活率仍然很高，具有临床级别的应用价值，突破了以往细胞制剂只能现制备现回输的局限性，扩大了细胞制剂使用的地理范围。
一种细胞长时间存活冷冻保护制剂制备方法

[发明专利]红细胞深低温保存预处理液、冷冻保护液及其应用-CN200610066310.9无效
发明人：权国波;韩颖;刘敏霞;郭永;张亮;王艳;王捷熙;刘安 -专利权人：中国人民解放军军事医学科学院野战输血研究所
申请日： 2006-03-28 - 公布日： 2006-11-08 - 主分类号： A61K35/18 文献下载
摘要：本发明公开了一种红细胞深低温保存的方法，以及该方法中用到的红细胞预处理液和红细胞冷冻保护液。该方法是将红细胞在预处理液中孵育后，再用冷冻保护液保护后冷冻，其中，预处理液是在基础缓冲液基础上添加小分子糖组分，而冷冻保护液是在原大分子保护液基础上添加小分子糖与白蛋白组分。本发明不使用甘油，而是借助小分子糖对红细胞内膜实施保护，协同大分子物质与白蛋白等有效组分，对红细胞内膜和外膜均形成保护，免除甘油保护后的细胞洗涤过程，并有效提高细胞回收率以及降低解冻后的红细胞溶血率。
红细胞低温保存预处理冷冻保护及其应用

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