本发明提供了人白细胞介素-12的编码基因、真核宿主细胞和表达方法。具体而言,本发明的人白细胞介素-12的编码基因包含(a)编码人白细胞介素-12的P35亚基的核苷酸序列SEQ ID NO:9或其互补核苷酸序列以及编码人白细胞介素-12的P40亚基的SEQ ID NO:10或其互补核苷酸序列;或者(b)编码人白细胞介素-12的P35亚基的核苷酸序列SEQ ID NO:21或其互补核苷酸序列以及编码人白细胞介素-12的P40亚基的SEQ ID NO:22或其互补核苷酸序列本发明的核苷酸序列能够使IL-12在真核宿主细胞,特别是中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中稳定高效表达,尤其是在无血清条件下稳定高效表达。
本发明提供了人白细胞介素-12的编码基因、真核宿主细胞和表达方法。具体而言,本发明的人白细胞介素-12的编码基因包含(a).编码人白细胞介素-12的P35亚基的核苷酸序列SEQ ID NO:9或其互补核苷酸序列以及编码人白细胞介素-12的P40亚基的SEQ ID NO:10或其互补核苷酸序列;或者(b).编码人白细胞介素-12的P35亚基的核苷酸序列SEQ ID NO:21或其互补核苷酸序列以及编码人白细胞介素-12的P40亚基的SEQ ID NO:22或其互补核苷酸序列本发明的核苷酸序列能够使IL-12在真核宿主细胞,特别是中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)中稳定高效表达,尤其是在无血清条件下稳定高效表达。
本发明公开了一种长效重组白细胞介素‑18结合蛋白及其生产方法与应用,属于生物技术领域。所述重组白细胞介素‑18结合蛋白包含人IL‑18BP亚型a的序列、人IgG Fc的序列,所述重组白细胞介素‑18结合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示。还公开了生产所述的重组白细胞介素‑18结合蛋白的方法,将表达所述的融合蛋白的编码基因插入细胞表达载体,并将所述载体导入原核细胞中以表达重组白细胞介素‑18结合蛋白。本发明通过采用原核表达系统表达重组白细胞介素‑18结合蛋白,促进蛋白正确折叠,增强蛋白稳定性和降低体内降解速率,增强其生物学活性。
本发明公开了一种人白细胞介素21的核苷酸序列及生产成熟的人白细胞介素21的方法和应用。该核苷酸序列为SEQ ID No.1;该方法通过制备人白细胞介素21突变编码基因序列SEQ ID No.1,将该序列导入表达载体,形成重组载体,将重组载体转化原核细胞,培养增殖,诱导,提取,纯化,即可得到序列为SEQ ID No.2的成熟人白细胞介素21。本发明提供的核苷酸序列可以在原核细胞中直接高效表达出成熟的具有生物学活性的人白细胞介素21,该方法适于工业化大规模生产人白细胞介素21,该核苷酸序列及其表达的氨基酸序列可用于制备基因工程药物。