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[发明专利]DNA连接酶介导的DNA扩增技术-CN201710206888.8有效
发明人：范建兵;高杨滨;许伟宏 -专利权人：广州市基准医疗有限责任公司
申请日： 2017-03-30 - 公布日： 2021-07-30 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本公开提供了一种DNA连接酶介导的DNA扩增技术,具体公开了在DNA水平上扩增目标区域的方法，包括重复循环下列步骤的扩增：变性DNA模板以获得单条目标DNA链；将包括一个上游引物和一个下游引物的引物对杂交至所述目标DNA链上，其中上游引物杂交至目标区域的第一核酸序列，下游引物杂交至目标区域的第二核酸序列，并且第一核酸序列在所述目标DNA链上位于第二核酸序列的下游，下游引物包含磷酸化的5’端；将上游引物或其延伸产物与下游引物或其延伸产物连接得到半扩增产物本申请还公开了一种用于在包括在DNA上扩增目标区域的试剂盒。
dna 连接酶扩增技术

[发明专利]植物基因组的构建方法、新品种的选育方法及新品种-CN201310220583.4有效
发明人：林少扬 -专利权人：本田技研工业株式会社
申请日： 2009-07-07 - 公布日： 2013-12-18 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明的植物基因组构建方法，是对每一个靶区设定DNA标记M1～M5，使DNA标记M2位于靶区的上游侧末端或其上游、DNA标记M1位于所述DNA标记M2的上游、DNA标记M4位于所述靶区的下游侧末端或其下游、DNA标记M5位于所述DNA标记M4的下游、DNA标记M3位于所述靶区中；并使含有所述靶区且被源自所述外源品种的染色体片段所置换的所述原品种染色体中的置换区成为其上游侧末端位于所述DNA标记M1与所述DNA标记M2之间、所述置换区的下游侧末端位于所述DNA标记M4与所述DNA标记M5之间的方式构建基因组。
植物基因组构建方法新品种选育

[发明专利]植物基因组的构建方法、新品种的选育方法及新品种-CN201310220211.1有效
发明人：林少扬 -专利权人：本田技研工业株式会社
申请日： 2009-07-07 - 公布日： 2013-12-18 - 主分类号： C12Q1/68 文献下载
摘要：本发明的植物基因组构建方法，是对每一个靶区设定DNA标记M1～M5，使DNA标记M2位于靶区的上游侧末端或其上游、DNA标记M1位于所述DNA标记M2的上游、DNA标记M4位于所述靶区的下游侧末端或其下游、DNA标记M5位于所述DNA标记M4的下游、DNA标记M3位于所述靶区中；并使含有所述靶区且被源自所述外源品种的染色体片段所置换的所述原品种染色体中的置换区成为其上游侧末端位于所述DNA标记M1与所述DNA标记M2之间、所述置换区的下游侧末端位于所述DNA标记M4与所述DNA标记M5之间的方式构建基因组。
植物基因组构建方法新品种选育

[发明专利]植物基因组的构建方法、新品种的选育方法及新品种-CN200980126662.0有效
发明人：林少扬 -专利权人：本田技研工业株式会社
申请日： 2009-07-07 - 公布日： 2012-08-01 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明的植物基因组构建方法，是对每一个靶区设定DNA标记M1～M5，使DNA标记M2位于靶区的上游侧末端或其上游、DNA标记M1位于所述DNA标记M2的上游、DNA标记M4位于所述靶区的下游侧末端或其下游、DNA标记M5位于所述DNA标记M4的下游、DNA标记M3位于所述靶区中；并使含有所述靶区且被源自所述外源品种的染色体片段所置换的所述原品种染色体中的置换区成为其上游侧末端位于所述DNA标记M1与所述DNA标记M2之间、所述置换区的下游侧末端位于所述DNA标记M4与所述DNA标记M5之间的方式构建基因组。
植物基因组构建方法新品种选育

[发明专利]一种基于线性双链DNA分子在哺乳动物细胞系内构建单域抗体库的方法-CN202010062601.0有效
发明人：童欣 -专利权人：天津达济科技有限公司
申请日： 2020-01-20 - 公布日： 2021-07-06 - 主分类号： C12N15/85 文献下载
摘要：本发明提供了一种基于线性双链DNA分子于哺乳动物细胞系内构建单域抗体库的方法，包括如下过程：步骤一：制备含有编码单域抗体互补决定区(CDR)随机氨基酸序列的核苷酸序列的上、下游线性双链DNA；步骤二：将步骤一获得的上、下游线性双链DNA转染到哺乳动物细胞系中，上、下游线性双链DNA之间发生连接，生成能够产生单域抗体的全长线性双链DNA。本发明开发了在哺乳动物细胞内建立单域抗体库的新方法，所产生单域抗体库其复杂性来自于1)PCR过程中将随机氨基酸编码序列引入上、下游线性双链DNA；2)上、下游线性双链DNA之间发生的随机连接反应。
一种基于线性 dna 分子哺乳动物细胞系构建抗体方法

[发明专利]一种DNA片段体外组装方法和试剂盒-CN201580083695.7有效
发明人：陈泰;赵宏翠;范楚珧;陈世宏;王云;沈玥;徐讯 -专利权人：深圳华大生命科学研究院
申请日： 2015-10-21 - 公布日： 2022-12-06 - 主分类号： C12N15/64 文献下载
摘要：一种DNA片段体外组装方法和试剂盒，能够将多个DNA片段和组装载体按照设定的顺序组装起来，其中第一个片段上游和最后一个片段下游分别带有与组装载体相同的重叠序列，其它片段上游带有与上一个片段下游相同的重叠序列，下游带有与下一个片段上游相同的重叠序列；组装载体的重叠序列的内侧任选地分别带有酶切位点，任选地在酶切位点之间带有筛选标记；本发明的方法使多个DNA片段和组装载体与DNA内切酶、DNA外切酶、DNA聚合酶和DNA连接酶进行反应，实现组装。
一种 dna 片段体外组装方法试剂盒

[发明专利]根皮层特异性基因启动子-CN96197068.5无效
发明人： M·A·果克林;N·门都;宋文 -专利权人：北卡罗来纳州大学
申请日： 1996-07-24 - 公布日： 2004-06-23 - 主分类号： C12N15/82 文献下载
摘要：本发明的分离的DNA分子包含DNA启动子序列，所说的启动子序列指导植物细胞中下游异源DNA片段的根皮层特异性转录。DNA构建体包含表达盒，所说的表达盒在5′-3′的方向上包含本发明的启动子和定位在此启动子下游并与之可操作性地结合的异源DNA片段。转化的植物(如烟草)包含含有异源DNA构建体的转化的植物细胞，所说的DNA构建体包含以上所述的表达盒。
皮层特异性基因启动子

[发明专利]TRACP5b的生产方法-CN200780051865.9有效
发明人：清川岩;大桥建也;三浦俊英;片山胜博;田村俊树;小林功;瀬筒秀树 -专利权人：日东纺绩株式会社;独立行政法人农业生物资源研究所
申请日： 2007-12-28 - 公布日： 2009-12-30 - 主分类号： C12N9/16 文献下载
摘要：制备了一种家蚕，其具有以下的(i)和(ii)的DNA：(i)编码转录调控因子的DNA，该DNA可操作连接在编码丝腺特异性地表达的蛋白质的DNA的启动子的下游；(ii)编码TRACP5的DNA，该DNA可操作连接在该转录调控因子的目标启动子的下游
tracp5b 生产方法

[发明专利]一种检测唾液中具核梭杆菌的引物探针组、试剂盒和检测方法-CN201911421076.0在审
发明人：张义;张欣;张亚平 -专利权人：山东大学齐鲁医院
申请日： 2019-12-31 - 公布日： 2020-04-10 - 主分类号： C12Q1/689 文献下载
摘要：本发明提供了一种检测唾液中具核梭杆菌的引物探针组、试剂盒和检测方法，属于微生物分子生物学检测技术领域，所述引物探针组包括以下组分：具核梭杆菌DNA上游引物、具核梭杆菌DNA下游引物、具核梭杆菌DNA探针、GAPDH上游引物、GAPDH下游引物、GAPDH探针、TERT上游引物、TERT下游引物和TERT探针。利用本发明的引物探针组能够同时对唾液中具核梭杆菌DNA和内参基因进行检测，通过内参基因的校正来修正具核梭杆菌DNA检测偏差，达到准确定量的目的。另外，相对于其他内参基因组合，本发明的GAPDH和TERT的组合在唾液样本DNA定量方面具有较好的稳定性，为准确对靶分子定量提供保障。
一种检测唾液中具核梭杆菌引物探针试剂盒方法

[发明专利]含pH081启动子的转化株及其应用-CN90108131.0无效
发明人：大泰治;荒木弘之;金子嘉信 -专利权人：武田药品工业株式会社
申请日： 1986-08-20 - 公布日： 1991-06-05 - 主分类号： C12N15/09 文献下载
摘要：本发明涉及有调节磷酸酶产生的pH081基因启动子活性的DNA，这种DNA是从啤酒酵母得到的；具有上述pH081启动子下游的结构基因的DNA；含有上述pH081启动子DNA的转化子；含有上述pH081启动子DNA和pH081启动子下游的结构基因的转化子；获得基因产物的过程，它包括在适合的培养基中培养含有上述pH081启动子和位于其下游的结构基因的DNA的转化子，直到形成基因产物和从培养物中回收基因产物。
ph081 启动子转化及其应用

[发明专利]一种游离DNA文库构建方法以及游离DNA中低频突变的检测方法-CN201610273808.6有效
发明人：田埂 -专利权人：元码基因科技（苏州）有限公司
申请日： 2016-04-28 - 公布日： 2019-03-19 - 主分类号： C40B50/06 文献下载
摘要：本发明涉及一种游离DNA的文库构建方法，在单链游离DNA的3’端连接唯一序列标签，其中，唯一序列标签由随机序列和接头序列组成；加入PCR扩增用上游引物和下游引物进行PCR扩增，其中，上游引物为针对目标低频突变设计的引物，下游引物为与接头序列对应的引物。此外，本发明还涉及一种游离DNA中低频突变的检测方法，在单链游离DNA的3’端连接唯一序列标签，加入PCR扩增用上游引物和下游引物进行PCR扩增，上游引物和下游引物的一端分别与测序标签连接，将扩增后的DNA
一种游离 dna 文库构建方法以及低频突变检测

[发明专利]放大微量DNA并用于多种核酸检测的方法及核酸检测装置-CN202110355064.3在审
发明人：徐飞岳;陈如龙;管少华;黎亿爱;缑灵山 -专利权人：深圳易倍科华生物科技有限公司
申请日： 2021-04-01 - 公布日： 2021-07-06 - 主分类号： C12Q1/6844 文献下载
摘要：本发明提供一种连接扩增放大微量DNA并用于下游多种核酸检测的方法，包括：提供DNA样本变性形成单链DNA并经多聚核苷酸激酶处理得到修饰的单链DNA；对所述单链DNA进行保守序列接头连接，以获得第一产物；对所述第一产物进行纯化处理以得到第二产物；对所述第二产物进行扩增处理以得到第三产物；使用所述第三产物进行下游核酸检测。本发明提供技术方案，实现将微量DNA扩增至几百纳克甚至微克级别以满足下游核酸检测，确保在进一步核酸检测中能够有足量的DNA投入，提升核酸检测的准确性；并且操作简单，无需用到特殊的酶和原材料即可实施，有效降低了实施的总体成本
放大微量 dna 用于多种核酸检测方法装置

[发明专利]两个DNA片段一步PCR融合的方法-CN201410640984.X在审
发明人：陈国梁;贺晓龙;张向前 -专利权人：延安大学
申请日： 2014-11-13 - 公布日： 2015-04-22 - 主分类号： C12N15/10 文献下载
摘要：本发明两个DNA片段一步PCR融合的方法，具体按照以下步骤实施：步骤1、获取DNA1片段、DNA2片段模板及DNA1片段的第一上游引物U1、第一下游引物L1、DNA2片段的第二上游引物U2、第二下游引物L2；步骤2、对步骤1中得到的DNA1片段以第一上游引物U1、第一下游引物L1为引物，DNA2片段以第二上游引物U2、第二下游引物L2为引物，在PCR仪中进行PCR一步扩增得到融合DNA片段。
两个 dna 片段一步 pcr 融合方法

[发明专利]DNA重组中的或与DNA重组相关的改进-CN201680055125.1有效
发明人：迈克尔·贾维斯;艾斯灵·墨菲;彼得·巴里 -专利权人：普利茅斯大学;加利福尼亚大学董事会
申请日： 2016-08-05 - 公布日： 2022-07-29 - 主分类号： C12N15/90 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于构建DNA重组片段的不基于PCR的方法，所述DNA重组片段具有靶DNA的基于重组的操作所需的与所述靶DNA内的所需遗传操作位点同源的必需的侧接区，所述方法包括下述步骤：A)鉴定所述靶DNA中用于遗传元件的所需插入位点；B)对存在于待靶向用于遗传操作的DNA内所述位点上游的所选限制性内切核酸酶的内源的、本源的半位点进行定位，并由此确定上游同源区的5'范围；C)对存在于待靶向用于遗传操作的DNA内所述位点下游的同一所选限制性内切核酸酶的内源的、本源的半位点进行定位，并由此确定下游同源区的3'范围；D)合成侧接区基因盒，其引起所述上游和下游半位点的并置，从而导致形成侧接有所述上游和下游同源区的所选限制性内切核酸酶的完整限制性位点；以及E)将所述侧接区基因盒插入到包含用于操作所述靶DNA的遗传元件的质粒载体中，在所述质粒载体上提供所述必需的侧接同源区，用于在所述所需插入位点处在所述靶DNA内的重组。
dna 重组中的相关改进

[发明专利]一种环状RNA全长序列的检测方法-CN201910670600.1在审
发明人：龚畅;刘子豪;梁格豪 -专利权人：中山大学孙逸仙纪念医院
申请日： 2019-07-23 - 公布日： 2020-02-28 - 主分类号： C12Q1/6869 文献下载
摘要：本发明公开了一种环状RNA全长序列的检测方法，包括步骤：(1)在数据库中查找目的环状RNA的DNA序列；(2)任意取环状RNA对应到DNA序列的外显子和/或内含子区紧邻的两个核苷酸中间作为断开点，断开为两条DNA，取其中一条DNA序列的3’末端和另一条序列的5’末端连接，形成一条新的DNA序列；(3)设计新的DNA全长序列的上、下游引物；(4)验证步骤(3)中设计的上、下游引物，以保证所述上、下游引物不能扩增出线性
一种环状 rna 全长序列检测方法

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