[发明专利]对外来火蚁有特异性的抗体和SCFV免疫毒素及其应用

摘要

本发明涉及一种制备安全、成本低、对环境无害，并且在生态学上安全的经生物工程改造用来对付外来火蚁的产品的方法。用免疫学和基因工程技术来产生单克隆抗体(mAb)以及展示scFv重链和/或轻链Ig片段的病毒(噬菌体)，这些抗体和Ig片段表现出和外来火蚁蚁后中肠微绒毛细胞高亲合力特异结合。将特异性单克隆抗体和噬菌体展示的抗体Fab片段偶联于毒素，以定向输递和破坏外来火蚁蚁后，但不消灭本地的种类，从而将恢复天然的生态系统。

主权项

1.一种生产与毒素活性结构域相连的对外来火蚁中肠微绒毛抗原有特异性的scFv或Fab片段的方法，该方法包括下列步骤：用经外来火蚁中肠区细胞免疫的动物所得的cDNA产生一个表达scFv重链和/或轻链Ig片段的噬菌体展示文库；使所述表达scFv重链和/或轻链Ig片段的噬菌体展示文库和外来火蚁的中肠细胞反应；洗涤所述被反应的中肠细胞，除去所表达的scFv Ig片段不与所述中肠细胞结合的噬菌体；从所述中肠细胞中洗脱表达结合性scFv Ig片段的噬菌体；使所述洗脱的、表达scFv Ig片段的噬菌体和本地火蚁的中肠细胞反应；洗涤所述被反应的本地火蚁中肠细胞，除去未与本地火蚁中肠细胞结合的、洗脱的、表达scFv Ig片段的噬菌体；工程改造scFv片段，使其不再被展示，而是在大肠杆菌中生产时被分泌；在大肠杆菌中扩增scFv重链和/或轻链Ig片段；收集分泌的scFv Ig片段；用基因工程方法或化学交联方法将所述scFv Ig片段和毒素的酶促活性结构域相连，从而产生了由对外来火蚁中肠微绒毛抗原有结合特异性的Ig片段和毒素活性结构域组成的单个多肽。