[发明专利]基于生物酶定向剪切技术的人源胶原蛋白制备方法在审
申请号: | 202211056722.X | 申请日: | 2022-08-31 |
公开(公告)号: | CN115626955A | 公开(公告)日: | 2023-01-20 |
发明(设计)人: | 梁雅玲;宋健强;岑子铮;葛雪琴 | 申请(专利权)人: | 苏州素颜素心生物科技有限公司 |
主分类号: | C07K14/78 | 分类号: | C07K14/78;C07K1/16;C12N15/12;C12N15/81;C12N1/19;C12R1/84 |
代理公司: | 成都厚为专利代理事务所(普通合伙) 51255 | 代理人: | 夏柯双 |
地址: | 215400 江苏省苏州市太*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种基于生物酶定向剪切技术的人源胶原蛋白制备方法,包括如下步骤(1)优选人源蛋白中III型胶原蛋白基因螺旋区的DNA片段,进行密码子优化和拼接重组,将基因片段切成粘性末端,并与相应酶切处理过的pET‑22b的表达载体共孵育,加入T4DNA连接酶;用氨苄青霉素钠‑LB平板筛选挑出白斑克隆,将其命名为pET22b‑NTOD;(2)将得到的pET22b‑NTOD与毕赤酵母进行混合转化,挑取单克隆,并对其扩大培养后获得重组基因工程菌;(3)将步骤(2)获得的重组基因工程菌接种后进行发酵培养获得发酵液;(4)收集步骤(3)中的发酵液纯化。解决现有人源胶原蛋白的技术领域,没有一种各方面都较好的人源胶原蛋白,同时解决现有人源胶原蛋白批量生产技术差的问题。 | ||
搜索关键词: | 基于 生物酶 定向 剪切 技术 胶原 蛋白 制备 方法 | ||
【主权项】:
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