[发明专利]一种Ec-cLYZ和MEL基因共表达重组毕赤酵母的构建方法及应用在审
| 申请号： | 202210665040.2 | 申请日： | 2022-10-19 |
| 公开（公告）号： | CN115322914A | 公开（公告）日： | 2022-11-11 |
| 发明（设计）人： | 金天明;陈婷;何敬文;赵微;扈立伟;任君 | 申请（专利权）人： | 天津市农业科学院 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N15/81;C12N15/56;C12N15/12;A61K38/17;A61K38/47;A61P31/04;C12R1/84 |
| 代理公司： | 天津市杰盈专利代理有限公司 12207 | 代理人： | 朱红星 |
| 地址： | 300192*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明公开了共表达石斑鱼c型溶菌酶（Ec‑cLYZ）及蜂毒肽（MEL）重组毕赤酵母的构建方法及抗菌活性。将目的基因Ec‑cLYZ和MEL序列用T‑2A连接肽连接，克隆至载体pPICZαA，获得高效稳定表达的重组质粒pPICZαA‑Ec‑cLYZ‑MEL；将测序和验证正确的重组质粒用限制性内切酶Sac I单酶切线性化，电转化至毕赤酵母表达菌株GS115内，筛选得到高效表达的Mut+菌株；利用0.5%甲醇诱导表达以及His‑tag蛋白纯化试剂盒纯化；利用溶血性试验评价其的溶血活性；通过测定重组蛋白的抑菌率，牛津杯法测定重组蛋白对实验菌株的抑菌圈直径，评价重组蛋白的抑菌活性。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 ec clyz mel 基因 表达 重组 酵母 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
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