[发明专利]一种降低可复制性腺病毒的细胞株NHEK-C28的建立与应用在审
| 申请号： | 202210395109.4 | 申请日： | 2022-04-15 |
| 公开（公告）号： | CN115232835A | 公开（公告）日： | 2022-10-25 |
| 发明（设计）人： | 王志民;卢双双;连雪琪;钟晶晶;杨晓燕;褚永超;黄磊 | 申请（专利权）人： | 郑州大学 |
| 主分类号： | C12N15/85 | 分类号： | C12N15/85;C12N15/64;C12N15/55;C12N15/113;C12N5/10;C12N5/071;C12N7/01;C12N15/861;C12R1/93 |
| 代理公司： | 北京棘龙知识产权代理有限公司 11740 | 代理人： | 张开 |
| 地址： | 450001 河南省郑*** | 国省代码： | 河南;41 |
| 权利要求书： | 暂无信息 | 说明书： | 暂无信息 |
| 摘要： | 本发明公开了一种降低可复制性腺病毒的细胞株NHEK‑C28的建立与应用，包括以下步骤:步骤S1:针对E1A基因，设计sgRNA序列；步骤S2:构建PX459‑sgRNA载体；步骤S3:将PX459‑sgRNA1～6质粒分别转染到单克隆细胞JH293‑Cl one21中；步骤S4:验证各sgRNA的敲除效率；步骤S5:选PX459‑sgRNA 6质粒敲除的细胞进行单克隆的筛选；步骤S6:筛选出的单克隆细胞鉴定敲除效果，选择一株敲除效果好的单克隆；步骤S7:再次敲除筛选出的C14细胞；步骤S8:敲除细胞NHEK‑C28中E1A蛋白水平表达；步骤S9:敲除细胞NHEK‑C28功能验证；本发明，通过改造腺病毒的包装细胞系，增强病毒使用的安全性，从而不影响腺病毒产毒同时降低可复制型腺病毒的单克隆细胞株NHEK‑C28，并在GMP条件下建立三级细胞库，便于用于后续腺病毒的大规模生产应用。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 降低 复制 性腺 病毒 细胞株 nhek c28 建立 应用 | ||
【主权项】：
暂无信息
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