[发明专利]一种可以结合脂多糖的蛋白酶PCK及其制备和应用有效
| 申请号： | 202210016038.2 | 申请日： | 2022-01-07 |
| 公开（公告）号： | CN115181736B | 公开（公告）日： | 2023-05-30 |
| 发明（设计）人： | 邱丽梅;尹肖婷;刘青 | 申请（专利权）人： | 中国科学院海洋研究所 |
| 主分类号： | C12N9/50 | 分类号： | C12N9/50;C12N15/70;C12N15/57;A61K38/48;A61P31/04 |
| 代理公司： | 沈阳科苑专利商标代理有限公司 21002 | 代理人： | 高笑 |
| 地址： | 266071 *** | 国省代码： | 山东;37 |
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| 摘要： | 本发明涉及分子生物学，具体地说是一种可以结合脂多糖的蛋白酶PCK及其制备和应用。蛋白酶其氨基酸序列中磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶激活位点、GTP结合位点、草酰乙酸作为底物的结合位点和金属结合位点。将含有PCK对应核苷酸的质粒转化到大肠杆菌中，随后进行诱导表达，采用Ni‑NTA亲和层析柱对PCK蛋白分离纯化；获得的PCK蛋白不仅具有催化草酰乙酸转变为磷酸烯醇式丙酮酸和二氧化碳的催化活性，亦可应用于脂多糖的清除或者中和。本发明利用原核表达和亲和层析的方法大量制备PCK蛋白酶，采用ELISA方法对脂多糖的结合活性进行鉴定，旨在降低药物清除LPS的毒副作用和成本，同时为蛋白酶在LPS清除剂上的应用提供新思路，为结合脂多糖的酶制剂的工业化推广奠定基础。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 可以 结合 多糖 蛋白酶 pck 及其 制备 应用 | ||
【主权项】：
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