[发明专利]一种纳豆激酶的分离纯化方法在审
| 申请号: | 202111586604.5 | 申请日: | 2021-12-23 |
| 公开(公告)号: | CN114250216A | 公开(公告)日: | 2022-03-29 |
| 发明(设计)人: | 欧志敏;程朋朋;卢媛;王金美;张楚玥 | 申请(专利权)人: | 浙江工业大学 |
| 主分类号: | C12N9/56 | 分类号: | C12N9/56;C07K1/18;C07K1/34;C07K1/14 |
| 代理公司: | 杭州天正专利事务所有限公司 33201 | 代理人: | 黄美娟;李世玉 |
| 地址: | 310014 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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| 摘要: | 本发明公开了一种纳豆激酶的分离纯化方法,将纳豆激酶粗品用缓冲液溶解后过滤,滤液作为上样液进行DEAE‑Sephadex A‑50阴离子交换柱层析;上样结束后,先以0.1M、pH7.4的磷酸缓冲液进行洗脱,洗脱速度10s/滴,采用色谱工作站监测流出液,出峰前按每10min/管收集,出峰处每个峰收集,洗脱至流出液不出峰;合并含有纳豆激酶蛋白和酶活的流出液,超滤,滤液冻干,即为纳豆激酶纯酶。本发明方法简化了纯化步骤,降低了纯化过程中酶的损失,大幅缩减纯化所需时间和成本,电泳纯纳豆激酶,比活达到了90080.6U/mg,纯化倍数为3.2,酶活回收率为82.62%。 | ||
| 搜索关键词: | 一种 激酶 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】:
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