[发明专利]一种从动物组织中提取AAV DNA的方法在审
申请号: | 202111489560.4 | 申请日: | 2021-12-08 |
公开(公告)号: | CN114250222A | 公开(公告)日: | 2022-03-29 |
发明(设计)人: | 大明;蔡中山;孔令洁;隋礼丽 | 申请(专利权)人: | 苏州博腾生物制药有限公司 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 苏州新知行知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32414 | 代理人: | 郑丽玲 |
地址: | 215000 江苏省苏州市苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种从动物组织中提取AAV DNA的方法,其步骤包括:配制所需的溶液1‑6,获取组织样本并匀浆;取适量样本加入容器管并添加适量的溶液1;先后加入适量的溶液2和溶液6,振荡孵育并使样本细胞裂解完成;冷却至室温,向其中添加溶液5,孵育后加入适量的溶液3,混合并降温;离心然后过滤;向上清液中加入1倍体积的乙醇;溶液加载到回收柱中,用溶液4洗涤回收柱若干次;用水对回收柱洗脱若干次,取适量洗脱溶液转移至新容器管中,涡旋并剪切洗脱溶液中的染色体DNA;添加适量的10X的核酸外切酶V缓冲液;添加适量的ATP溶液;添加适量的核酸外切酶V,去除宿主DNA和非附加型病毒DNA,添加适量的溶液5,孵育过夜;使用DNA纯化试剂盒进行纯化等步骤。 | ||
搜索关键词: | 一种 动物 组织 提取 aav dna 方法 | ||
【主权项】:
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