[发明专利]一种新金色分枝杆菌工程菌的基因编辑方法及系统在审

专利信息
申请号: 202111325156.3 申请日: 2021-11-10
公开(公告)号: CN114085859A 公开(公告)日: 2022-02-25
发明(设计)人: 柳志强;王鑫鑫;柯霞;郑裕国 申请(专利权)人: 浙江工业大学
主分类号: C12N15/74 分类号: C12N15/74;C12N15/55;C12N15/113;C12N15/53;C12N1/21;C12R1/32
代理公司: 杭州浙科专利事务所(普通合伙) 33213 代理人: 沈渊琪
地址: 310014 浙*** 国省代码: 浙江;33
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摘要: 一种新金色分枝杆菌工程菌的基因编辑方法及系统,属于基因工程技术领域。本发明公开的编辑系统包括pMV261‑rAPOBEC/n(d)Cas9/UGI质粒和pTarget‑sgRNA质粒,pMV261‑rAPOBEC/n(d)Cas9/UGI质粒可以融合表达丧失切割活性的Cas9蛋白、胞嘧啶脱氨酶和尿嘧啶糖苷酶抑制剂,在sgRNA的引导下可在靶向目的基因,对序列N20片段中的胞嘧啶(C)进行脱氨反应,转变为尿嘧啶(U),并在后续复制过程中变为胸腺嘧啶(T)形成TAG,TGA和TAA终止密码子,达到沉默或中断目的基因正常反应的目的。该系统对宿主的毒性低,可特异性编辑,且稳定传代,编辑效率最高可以达到50%。
搜索关键词: 一种 金色 分枝杆菌 工程 基因 编辑 方法 系统
【主权项】:
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