[发明专利]一种发根农杆菌介导的中间锦鸡儿毛状根一步转化方法

摘要

本发明公开了一种发根农杆菌介导的中间锦鸡儿毛状根一步转化方法，包括如下步骤：S1.将含有e‑GFP表达载体的质粒电转化进发根农杆菌K599感受态细胞中；S2.制备OD600nm为0.8～0.95的发根农杆菌菌悬液，并加入乙酰丁香酮；S3.培养侵染所用的细菌膏；S4.选取中间锦鸡儿幼苗，斜切幼苗子叶节下1cm处，弃去下部分，将切口进行侵染，然后将幼苗移栽回土中，给幼苗浇1/4B5培养基后，置于光照培养箱中进行培养。本发明通过一步法转化中间锦鸡儿毛状根使基因在毛状根中过量表达，相比于组培方法转化中间锦鸡儿毛状根，这种方法操作更加简单，不需要制备无菌苗，检测时间更短，基因表达水平高且检测方便。