[发明专利]一种单碱基突变方法及采用的系统在审
申请号: | 202110782625.8 | 申请日: | 2019-03-26 |
公开(公告)号: | CN113403342A | 公开(公告)日: | 2021-09-17 |
发明(设计)人: | 包煜贤 | 申请(专利权)人: | 珠海舒桐医疗科技有限公司 |
主分类号: | C12N15/85 | 分类号: | C12N15/85;C12N15/113;C12N15/10 |
代理公司: | 苏州创元专利商标事务所有限公司 32103 | 代理人: | 汪青;周敏 |
地址: | 519000 广东省珠海市横琴新区*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | 本发明涉及一种单碱基突变方法及采用的系统,针对欲突变基因的点突变位点设计sgRNA并构建CRISPR/Cpf1质粒;截取欲突变成基因的突变点附近的碱基序列,并在碱基序列中引入无义突变合成donor1;将CRISPR/Cpf1质粒和donor1共转染含有欲突变基因的细胞得到含有无义突变的细胞;针对含有无义突变的细胞中的含有无义突变的序列的点突变位点设计Re‑sgRNA并构建Re‑CRISPR/Cpf1质粒;截取欲突变成基因的突变点附近的碱基序列合成donor2;将Re‑CRISPR/Cpf1质粒和donor2共转染含有无义突变的细胞得到含有欲突变成基因的细胞。本发明能够达到无痕修复的目的。 | ||
搜索关键词: | 一种 碱基 突变 方法 采用 系统 | ||
【主权项】:
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