[发明专利]海水寄生纤毛虫刺激隐核虫的外泌体提取分离方法及应用在审
申请号: | 202110170946.2 | 申请日: | 2021-02-08 |
公开(公告)号: | CN112795484A | 公开(公告)日: | 2021-05-14 |
发明(设计)人: | 乔莹;马笑晚;陈旭阳;陈佳;潘莹 | 申请(专利权)人: | 自然资源部第四海洋研究所(中国—东盟国家海洋科技联合研发中心) |
主分类号: | C12N1/10 | 分类号: | C12N1/10;C12N1/02;A61K47/46;C12R1/90 |
代理公司: | 北京远大卓悦知识产权代理有限公司 11369 | 代理人: | 李开成 |
地址: | 536000 广西壮族*** | 国省代码: | 广西;45 |
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摘要: | 本发明公开了一种海水寄生纤毛虫刺激隐核虫的外泌体提取分离方法,其包括以下步骤:一、收集刺激隐核虫包囊后,将包囊清洗干净,置于含有抗生素的无菌海水中进行孵化;二、使用无菌滤网收集感染期幼虫,在含有抗生素、无外泌体胎牛血清的培养基中,孵育培养;三、离心去除感染期幼体,收集上清液;四、上清液通过滤膜除菌,浓缩滤液;五、浓缩液离心收集外泌体粗沉淀;六、外泌体粗沉淀使用无菌预冷的PBS重悬,并加入蛋白酶抑制剂;七、离心去除上清液,使用重悬沉淀,获得所述外泌体。本发明能够有效分离提取刺激隐核虫的外泌体,提取后的外泌体具有典型的碟形或茶托形囊泡状结构,粒径大小整体符合标准,且外泌体提取浓度较高。 | ||
搜索关键词: | 海水 寄生 纤毛虫 刺激 隐核虫 外泌体 提取 分离 方法 应用 | ||
【主权项】:
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