[发明专利]于体外将人多能干细胞诱导为神经中胚层祖细胞并维持自我更新的培养体系、方法及应用在审
申请号: | 202110035731.X | 申请日: | 2021-01-12 |
公开(公告)号: | CN112746057A | 公开(公告)日: | 2021-05-04 |
发明(设计)人: | 李文林;孙平新;袁媛;虞欣璐;吕竺蔓;马昊鑫 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军海军军医大学 |
主分类号: | C12N5/0797 | 分类号: | C12N5/0797;C12N5/0735;C12N5/10;C12N5/0793;C12N5/077 |
代理公司: | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人: | 孙跃虹 |
地址: | 200433 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及生物医药工程技术领域,提供了一种于体外将人多能干细胞诱导为神经中胚层祖细胞并维持自我更新的培养体系,该培养体系包括基础培养基以及添加在该基础培养基内的诱导分化因子,包括0.01‑500μMTGFβ抑制剂、0.01‑500μMBMP抑制剂、0.01‑50μMGSK3抑制剂、0.01‑500ng/mLFGF家族生长因子、0.01‑500ng/mLEGF家族生长因子。其中基础培养基包括液体基础培养基、0‑5×B27添加剂、0‑5×N2添加剂、1%青霉素/链霉素、0‑500μg/mL2‑磷酸‑维生素C。诱导方法如下:A、采用hPSCs培养基将hPSCs培养至细胞密度为50%‑70%;B、使用上述培养体系进行细胞诱导,每天半量换液,在细胞密度达到90%时按1:6进行细胞传代,传代培养时向培养体系内添加Blebbistatin,连续诱导10天以上。 | ||
搜索关键词: | 体外 多能 干细胞 诱导 神经 中胚层 细胞 维持 自我 更新 培养 体系 方法 应用 | ||
【主权项】:
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