[发明专利]一种(+)γ-内酰胺酶生产工艺在审

专利信息
申请号: 202011169344.7 申请日: 2020-10-28
公开(公告)号: CN112280772A 公开(公告)日: 2021-01-29
发明(设计)人: 田伟;王丹;卢方洲;路锐;张跃敏;蒋程博;顾红炼 申请(专利权)人: 江苏威奇达药业有限公司
主分类号: C12N9/86 分类号: C12N9/86;C12N1/20;C12R1/19
代理公司: 南京苏科专利代理有限责任公司 32102 代理人: 蒋慧妮
地址: 226133 江苏*** 国省代码: 江苏;32
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摘要: 发明公开一种(+)γ‑内酰胺酶生产工艺,包括:种子摇瓶培养:冻管取出菌种接入母瓶培养;种子罐培养:配制种子罐培养基,火焰接种,控制温度40‑42℃,通气量1.5‑1.8vvm,转速为600‑1000rpm;发酵:配制发酵培养基,接种前加入硫酸镁灭菌,降温,通过无菌管道移种后,设置初始溶氧为100%,控制温度40‑42℃,通气量1.5‑1.8vvm,氨水调节pH值6.8‑7.0,调节转速,菌浓达到30‑35g/L时,加诱导剂,控制溶氧10%‑60%,当溶氧迅速反升时,补加甘油;放罐及酶活检测,纯化及固定化:发酵第18‑20h放罐,湿重菌浓大于200g/L,细胞破壁率大于95%,酶活对映体过量值ee%(40min)>95%,最终批次反应200批,反应时间3.5h,ee%99.0%。本发明(+)γ‑内酰胺酶生产工艺,灭菌难度降低,步骤简化,高效率、高产率生产高纯度(+)γ‑内酰胺酶。
搜索关键词: 一种 内酰胺 生产工艺
【主权项】:
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