[发明专利]一种(+)γ-内酰胺酶生产工艺在审
申请号: | 202011169344.7 | 申请日: | 2020-10-28 |
公开(公告)号: | CN112280772A | 公开(公告)日: | 2021-01-29 |
发明(设计)人: | 田伟;王丹;卢方洲;路锐;张跃敏;蒋程博;顾红炼 | 申请(专利权)人: | 江苏威奇达药业有限公司 |
主分类号: | C12N9/86 | 分类号: | C12N9/86;C12N1/20;C12R1/19 |
代理公司: | 南京苏科专利代理有限责任公司 32102 | 代理人: | 蒋慧妮 |
地址: | 226133 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开一种(+)γ‑内酰胺酶生产工艺,包括:种子摇瓶培养:冻管取出菌种接入母瓶培养;种子罐培养:配制种子罐培养基,火焰接种,控制温度40‑42℃,通气量1.5‑1.8vvm,转速为600‑1000rpm;发酵:配制发酵培养基,接种前加入硫酸镁灭菌,降温,通过无菌管道移种后,设置初始溶氧为100%,控制温度40‑42℃,通气量1.5‑1.8vvm,氨水调节pH值6.8‑7.0,调节转速,菌浓达到30‑35g/L时,加诱导剂,控制溶氧10%‑60%,当溶氧迅速反升时,补加甘油;放罐及酶活检测,纯化及固定化:发酵第18‑20h放罐,湿重菌浓大于200g/L,细胞破壁率大于95%,酶活对映体过量值ee%(40min)>95%,最终批次反应200批,反应时间3.5h,ee%99.0%。本发明(+)γ‑内酰胺酶生产工艺,灭菌难度降低,步骤简化,高效率、高产率生产高纯度(+)γ‑内酰胺酶。 | ||
搜索关键词: | 一种 内酰胺 生产工艺 | ||
【主权项】:
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