[发明专利]一种重组蛋白酶K工业化纯化及冻干方法在审
申请号: | 202010960308.6 | 申请日: | 2020-09-14 |
公开(公告)号: | CN114181925A | 公开(公告)日: | 2022-03-15 |
发明(设计)人: | 占全;杨代常 | 申请(专利权)人: | 武汉禾元生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N9/58 | 分类号: | C12N9/58 |
代理公司: | 北京律诚同业知识产权代理有限公司 11006 | 代理人: | 黄韧敏;魏紫 |
地址: | 430000 湖北省*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明公开了一种重组蛋白酶K工业化纯化及冻干方法。将毕赤酵母表达的重组蛋白酶K发酵液澄清过滤后加入稀释液稀释,并经过超滤步骤进行浓缩和透析,获得含微量金属离子和色素的蛋白酶K透析液,将该透析液经过阳离子交换层析分离纯化,获得含重组蛋白酶K的洗脱液;将含重组蛋白酶K的洗脱液放在室温结晶沉淀4‑6h,搅拌混匀后倒入正压过滤装置中,压滤获得蛋白酶K滤饼;该滤饼复溶后,加入冻干赋形剂,按照优化的冻干工艺进行冻干,分包装后获得蛋白酶K成品。该方法工艺步骤简单、收率高、成本低,易于工业化放大生产。所获得的蛋白酶K目标物产量高、活性好。 | ||
搜索关键词: | 一种 重组 蛋白酶 工业化 纯化 方法 | ||
【主权项】:
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