[发明专利]一种提高双特异性抗体纯度的分离纯化方法在审
申请号: | 202010175303.2 | 申请日: | 2020-03-13 |
公开(公告)号: | CN111410688A | 公开(公告)日: | 2020-07-14 |
发明(设计)人: | 李智;诸葛鑫 | 申请(专利权)人: | 苏州智享众创孵化管理有限公司 |
主分类号: | C07K16/00 | 分类号: | C07K16/00;C07K1/34 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 李宝硕 |
地址: | 215000 江苏*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明公开了一种提高双特异性抗体纯度的分离纯化方法,包括以下步骤:分别配置澄清过滤平衡缓冲液、EDTA‑2Na母液;串联压力表,采用硅胶管将MD0HC过滤器、MX0HC过滤器以及0.22μm除菌过滤器依次连接;分别采用注射用水和澄清过滤缓冲液依次清洗MD0HC过滤器、冲洗MX0HC过滤器;将转染表达的双特异性抗体在生物反应器中进行培养,培养结束后将生物反应器的温度调整为20±5℃,向培养上清液加入EDTA‑2Na母液;将上述培养上清液过滤,滤液收集至收集容器;过滤时同时向培养上清液、滤液中通入氧气;最后对滤液进行蛋白纯度进行检测。该方法操作简单,在过滤收集过程中双特异性抗体稳定性好,可有效减少轻链与重链结合的二硫键被破坏,从而获得纯度更高的双特异性抗体。 | ||
搜索关键词: | 一种 提高 特异性 抗体 纯度 分离 纯化 方法 | ||
【主权项】:
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