[发明专利]一种基于改造核糖体结合位点提高ε-己内酯产量的方法

摘要

本发明公开了一种基于改造核糖体结合位点提高ε‑己内酯产量的方法。该方法以pRSFDuet为出发载体，将chmo基因和RBS21‑adh序列插入空载pRSFDuet中，得到pRSF‑RBS10‑CHMO‑RBS21‑ADH载体；根据核糖体结合位点的特征，设计新的CHMO RBS序列，构建含CHMO RBS序列的重组菌株，并诱导重组菌株表达ADH蛋白和CHMO蛋白后，收集活细胞进行静息催化，实现环己醇被催化高产ε‑己内酯。本发明提供的方法中得到的重组菌株能在16h内完全催化60mM环己醇，得到43.98mM的ε‑己内酯。该方法高效，周期短，节约资源，为工业高产ε‑己内酯提供了可能性。