[发明专利]靶向间充质干细胞药物递送系统的制备方法及其应用在审
| 申请号： | 201911163143.3 | 申请日： | 2019-11-25 |
| 公开（公告）号： | CN110777119A | 公开（公告）日： | 2020-02-11 |
| 发明（设计）人： | 段莉;王大平;徐晓;李兴福;熊建义;欧阳侃 | 申请（专利权）人： | 深圳市第二人民医院 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/113 |
| 代理公司： | 11531 北京汇捷知识产权代理事务所(普通合伙) | 代理人： | 马金华 |
| 地址： | 518000 广东省深*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了靶向间充质干细胞药物递送系统的制备方法及其应用，S1：采集干细胞；S2：检测细胞；S3：制作转染混合液；S4：间充质干细胞预处理；S6：碱性培养。本发明中的间充质干细胞来源广泛，可以是自体的，也可以是异体的，来源充足，细胞的增殖、存活、分化、迁移、合成与分泌因子等各方面能力优良，无伦理问题、免疫原性低，应用前景广阔。本发明公开的组织损伤靶向间充质干细胞可以高效定植于组织损伤部位，避免血流冲刷或者自然脱落，增加归巢细胞量，并且低表达smad蛋白，避免移植MSCs存在的促纤维化风险。 | ||
| 搜索关键词： | 间充质干细胞 靶向 预处理 药物递送系统 应用前景广阔 组织损伤部位 细胞 伦理问题 免疫原性 血流冲刷 组织损伤 低表达 干细胞 混合液 细胞量 纤维化 定植 转染 自体 分泌 制备 增殖 存活 合成 迁移 采集 移植 分化 检测 制作 应用 | ||
【主权项】：
1.靶向间充质干细胞药物递送系统的制备方法及其应用，其特征在于，该方法包括以下步骤：/nS1：采集干细胞,采集间充质干细胞组织平铺接种于75cm2培养瓶，10％FBS+L-DMEM，37℃，饱和湿度下，5％CO2培养箱内进行培养；/nS2：检测细胞，取1代-5代传代细胞，制成单细胞悬液，以0.4％台盼蓝作为染色剂，用细胞计数板计数活细胞和死细胞，共3次，取3次平均值，计算细胞活率；/nS3：制作转染混合液，将miR-26b模拟物与转染试剂分别用L-DMEM稀释后混合，室温静置得到转染混合液；/nS4：间充质干细胞预处理，培养至第4代～8代、汇合度达80％～90％的间充质干细胞经PBS洗涤，再加入转染混合液；/nS5：培养细胞，在37℃培养箱中孵育5h～6h，接着把转染混合液更换为完全培养基，继续培养36h～48h；/nS6：碱性培养，转入miR-26b的间充质干细胞置入带有碱性成纤维细胞生长因子的培养基中，处理0.5h～24h得到靶向间充质干细胞。/n
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