[发明专利]一种利用新型dCas9调控基因表达的方法在审
| 申请号： | 201910923497.7 | 申请日： | 2019-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN110607317A | 公开（公告）日： | 2019-12-24 |
| 发明（设计）人： | 霍毅欣;郭丽微;刘玉美 | 申请（专利权）人： | 北京理工大学;苏州工业园区洛加大先进技术研究院 |
| 主分类号： | C12N15/70 | 分类号： | C12N15/70 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100081 *** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | CRISPRi系统由于可以阻断RNA聚合酶复合物的起始或延长来抑制基因转录，为了可控地调节基因的转录，dCas9基因会与各种诱导型启动子连接后进行表达。然而由于一些诱导型启动子宽松的调控机制，在不添加诱导剂的情况下，dCas9仍具有微弱的表达能力，进而对目的基因进行部分抑制。工业生产的大规模发酵中需要实现基因的精准调控，故诱导型启动子引起的泄露表达问题亟待解决。本发明的目的在于提供一种利用新型dCas9系统调控基因表达的方法，利用密码子偏好性和tRNA氨酰化水平的差异，在翻译水平上，简单有效地通过补加氨基酸实现dCas9基因的表达调控。将dCas9基因中的氨基酸替换为其稀有密码子形式，外源添加对应氨基酸，可以使其恢复表达有功能的蛋白而发挥抑制作用。 | ||
| 搜索关键词： | 诱导型启动子 基因 转录 氨基酸 密码子偏好性 氨基酸替换 大规模发酵 稀有密码子 表达调控 调节基因 调控机制 基因表达 精准调控 目的基因 系统调控 抑制基因 氨酰化 有效地 诱导剂 补加 可控 外源 泄露 蛋白 翻译 恢复 | ||
【主权项】：
1.一种利用新型dCas9系统调控基因表达的方法，其是通过生物对密码子的偏好性，胞内翻译过程中个别密码子利用频率和其对应的tRNA在宿主胞内浓度较低，实现在翻译水平上更加精准地调节基因的表达。/n
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