[发明专利]一种免疫细胞玻璃化冻存保护液及冻存免疫细胞的方法在审
申请号: | 201910853381.0 | 申请日: | 2019-09-10 |
公开(公告)号: | CN110495447A | 公开(公告)日: | 2019-11-26 |
发明(设计)人: | 李旺;胡璧梁;田景潇;何江 | 申请(专利权)人: | 湖南思为康医药有限公司 |
主分类号: | A01N1/02 | 分类号: | A01N1/02 |
代理公司: | 35101 厦门原创专利事务所(普通合伙) | 代理人: | 徐东峰<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
地址: | 410015 湖南省长沙市雨花*** | 国省代码: | 湖南;43 |
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摘要: | 本发明提供一种免疫细胞玻璃化冻存保护液及冻存免疫细胞的方法,冻存保护液是在基础培养基RPMI 1640培养液中加入聚乙烯醇、二甲亚砜、丙三醇、乙二醇、海藻糖、胎牛血清和人血清白蛋白。聚合物非渗透剂聚乙烯醇、人血清白蛋白的加入可以减少因降温而形成细胞内冰晶,减少损伤,在一定程度上替代二甲基亚砜或乙二醇的使用,从而可以减少二甲亚砜及乙二醇的用量,聚乙烯醇、二甲亚砜、乙二醇、人血清白蛋白的这种配合使用在降低了冻存液对细胞的毒性的同时,提升了细胞的存活率,保障细胞的正常发育。采用本发明的冻存保护液具有很好的玻璃化冻存效果,其存活率增加及细胞复苏后有更高活率。 | ||
搜索关键词: | 乙二醇 人血清白蛋白 二甲亚砜 聚乙烯醇 冻存保护液 免疫细胞 存活率 细胞 培养液 二甲基亚砜 基础培养基 细胞内冰晶 玻璃 胎牛血清 细胞复苏 聚合物 保护液 丙三醇 冻存液 非渗透 海藻糖 冻存 损伤 发育 替代 | ||
【主权项】:
1.一种免疫细胞玻璃化冻存保护液,其特征在于,所述冻存保护液是在基础培养基RPMI1640培养液中加入胎牛血清、人血清白蛋白、聚乙烯醇、二甲亚砜、丙三醇、乙二醇、海藻糖,各组分的用量如下(v/v为体积比):/n聚乙烯醇1%-5%(v/v)/n二甲亚砜2.0~3.0mol/L/n丙三醇2.0~3.0mol/L/n乙二醇2.0~3.0mol/L/n海藻糖1.0~2.0mol/L/n胎牛血清10~15%/n人血清白蛋白1%-3%。/n
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