[发明专利]小分子化合物诱导鸡胚成纤维细胞CEFs成iPSCs的体系建立方法在审
| 申请号： | 201910810444.4 | 申请日： | 2019-08-29 |
| 公开（公告）号： | CN110484493A | 公开（公告）日： | 2019-11-22 |
| 发明（设计）人： | 李碧春;李婷婷;左其生;金晶;张晨;袁霞;张亚妮;孙红艳 | 申请（专利权）人： | 扬州大学 |
| 主分类号： | C12N5/074 | 分类号： | C12N5/074;C12N5/077 |
| 代理公司： | 32222 扬州苏中专利事务所(普通合伙) | 代理人： | 沈志海<国际申请>=<国际公布>=<进入 |
| 地址： | 225009 *** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 小分子化合物诱导鸡胚成纤维细胞CEFs成iPSCs的体系建立方法，其特征是，设置不同浓度的小分子化合物组合体系，细胞形态学观察、毒性试验及qRT‑PCR检测相关基因的表达，验证小分子化合物在鸡CEFs诱导重编程中是否适用及其适宜诱导浓度；然后利用剔除法结合qRT‑PCR、间接免疫荧光、细胞流式分析技术、AKP染色、EDU细胞增值技术手段优化诱导体系，建立适宜鸡CEFs重编程诱导体系。本发明解决了器官来源及免疫排斥问题，同时为个体发育及遗传修饰与保存的研究提供了新方法；为后续诱导多能干细胞的使用奠定理论和技术基础，也为其他物种的化学诱导重编程研究提供参考。 | ||
| 搜索关键词： | 小分子化合物 诱导 重编程 鸡胚成纤维细胞 细胞形态学观察 诱导多能干细胞 间接免疫荧光 免疫排斥问题 诱导重编程 毒性试验 化学诱导 技术基础 器官来源 体系建立 相关基因 遗传修饰 增值技术 组合体系 细胞流 染色 剔除 验证 物种 发育 细胞 参考 研究 保存 优化 分析 | ||
【主权项】：
1.小分子化合物诱导鸡胚成纤维细胞CEFs成iPSCs的体系建立方法，其特征是，首先，设置不同浓度的小分子化合物组合体系，细胞形态学观察、毒性试验及qRT-PCR检测相关基因的表达，验证小分子化合物在鸡CEFs诱导重编程中是否适用及适宜诱导浓度；然后利用剔除法结合qRT-PCR、间接免疫荧光、细胞流式分析技术、AKP染色、EDU细胞增值技术手段优化诱导体系，建立适宜鸡CEFs重编程诱导体系。/n
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