[发明专利]溶液共混法包埋复合微生态制剂的工艺

摘要

本发明涉及固定化技术，以海藻酸钠(SA)、聚乙烯醇(PVA)为原料，氯化钙、硼酸为交联剂，添加少量改性沸石粉为载体，加入复合微生态制剂菌液，制备成PVA‑SA‑沸石粉共聚物微球包埋体。本发明生产工艺简单易于操作、生产原料高效、安全、可降解、易于推广和应用。在海参养殖中应用，可以提高复合微生态制剂的净水效果，延长水质净化时间，相比于菌液的产品形式更易于保存和运输，解决了微生态制剂在应用过程中存在的作用周期短、运输和储藏不便的问题。

主权项

1.一种利用溶液共混法包埋复合微生态制剂的工艺，包括以下步骤：a.复合微生态制剂菌悬液的制备：将芽孢杆菌CICC20037，乳酸菌ACCC11016，酿酒酵母ACCC20165，光合细菌CCREMSDMCC150016共4种菌按照各属种比1:1:1:1，接种量为3％同时接菌，在25℃，初始pH为7.0，180rpm/min条件下混合培养24h，得到复合微生态制剂菌液；在4℃、10000rpm/min转速下离心5min，弃上清后，用生理盐水洗涤三次并离心收集菌体，最后用生理盐水定容至浓度为10¹²‑10¹⁵cfu/mL，得复合微生态制剂菌悬液；步骤b.共聚物凝胶的配制：将6％的PVA溶液，3％的SA溶液按照体积比1:1比例混合，加入2g改性沸石粉，水浴锅恒温90℃搅拌1h，即得到共聚物凝胶；所述6％的PVA溶液采用称取6g聚乙烯醇、加入到100mL蒸馏水中，90℃水浴加热，恒温搅拌1h，即配成质量分数为6％的PVA溶液；3％的SA溶液采用称取3g海藻酸钠加入到100mL蒸馏水中，90℃水浴加热，恒温搅拌1h，即配成质量分数为3％的SA溶液；所述改性沸石粉采用将沸石浸泡盐酸中24h，冲洗至中性后烘干，再放入饱和NaCl溶液中浸泡24h，去离子水冲洗至中性，105℃下烘干3h，粉碎过筛，即制得改性沸石粉；步骤c.PVA‑SA‑沸石粉微球的制备：用注射器吸取共聚物凝胶，在磁力搅拌下，距交联剂液面上方5cm左右垂直滴入，然后低温固定24h，蒸馏水冲洗三次即得PVA‑SA‑沸石粉微球，于4℃冰箱冷藏；所述交联剂液采用称取3g CaCl₂固体、4g硼酸固体溶于100mL蒸馏水中制得凝胶；无菌条件下，取复合微生态制剂菌悬液加入冷却的凝胶溶液中，按菌液：凝胶的体积比为1：15混合均匀，即得交联剂。