[发明专利]一种华北豹粪便中雌激素的提取方法

摘要

本发明属于激素提取方法技术领域，具体涉及一种华北豹粪便中雌激素的提取方法，包括以下步骤：称取1g解冻的华北豹粪便于离心管中，加入10mL质量浓度为80％的乙醇溶液；于70℃的振荡水浴中15min，冷却至4℃，放入离心机中4000r/min离心15min，取上清液；下层沉淀再加入5mL质量浓度为80％的乙醇溶液，漩涡振荡1min，放入离心机中4000r/min离心15min，合并上清液；将合并的上清液60℃水浴空气吹干；加入PB复溶，复溶完全后置于‑20℃保存。本发明操作简单，雌激素提取率高，对华北豹无损伤，且提取过程中不会使华北豹产生应激反应，检测结果可靠性高。

主权项

1.一种华北豹粪便中雌激素的提取方法，其特征在于包括以下步骤：(1)将冷冻的华北豹粪便样品解冻后，称取1g华北豹粪便于离心管中，向离心管中加入10mL‑15mL质量浓度为70％‑95％的乙醇溶液；(2)将离心管置于65℃‑80℃的振荡水浴中15min‑20min，然后将离心管从振荡水浴中取出冷却至4℃，之后将离心管放入离心机中3500r/min‑4500r/min离心15min‑20min，取上清液至玻璃试管中；(3)向离心管的下层沉淀中再加入5‑8mL质量浓度为70％‑95％的乙醇溶液，使下层沉淀重新悬浮起，漩涡振荡1min，之后再将离心管放入离心机中3500r/min‑4500r/min离心15min‑20min，取离心管中的上清液至步骤(2)中的玻璃试管中；(4)将盛装有两次合并的上清液的玻璃试管置于60℃‑70℃水浴中，将含有乙醇溶液的上清液60℃‑70℃水浴空气吹干；(5)向步骤(4)的玻璃试管中加入600ul 0.1M PB复溶，复溶完全后置于‑20℃保存。