[发明专利]一种高灵敏的三维核磁共振谱方法

摘要

本发明提供了一种获得高灵敏的三维核磁共振谱方法。首先施加质子90度硬脉冲，延时，然后同时施加质子和X核180度硬脉冲，再延时，施加一个质子脉冲。然后，同时施加质子和X核90度硬脉冲，延时，施加质子180度硬脉冲，再延时，施加SMSQ10.100梯度场脉冲。之后，施加X核180度硬脉冲，延时，同时施加质子和X核90度硬脉冲，延时，施加质子180度硬脉冲。之后延时，施加X核180度硬脉冲。再延时，施加TOCSY自旋锁定组合脉冲，然后延时δ，施加质子180度硬脉冲，之后施加SMSQ10.100梯度场脉冲，开始采样，采样期间对X核进行Garp组合脉冲去耦。对数据进行三维傅立叶变换，得到HSQC‑TOCSY核磁共振谱。

主权项

1.一种高灵敏的三维核磁共振谱方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将样品装入核磁样品管，并将样品管放入核磁共振谱仪，实验温度可选择范围为298～318K，等待5～10分钟以便使样品内的温度达到平衡；然后采集一维氢谱，测定质子的90度硬脉冲的脉冲宽度，同时对氢的谱宽进行优化；2)采集二维¹H‑¹³C HSQC谱，对碳的谱宽进行进一步优化，优化后碳的谱宽为10～50ppm，氢的谱宽为5～10ppm；3)导入编译好的脉冲序列：首先施加一个质子90度硬脉冲，延时0.5*Δ时间，然后同时施加质子和X核180度硬脉冲，再延时0.5*Δ时间，施加一个1～2.5毫秒的质子硬脉冲；然后，同时施加质子和X核90度硬脉冲，延时0.5*t₁时间，施加一个质子180度硬脉冲，再延时0.5*t₁时间后，施加一个系统自带1～2ms的梯度场脉冲；之后，施加一个X核180度硬脉冲，延时δ时间后，同时施加质子和X核90度硬脉冲，延时0.5*Δ时间，施加一个质子180度硬脉冲；之后延时0.5*t₂时间，施加一个X核180度硬脉冲；再延时0.5*t₂时间后，施加一个系统自带质子的TOCSY自旋锁定组合脉冲，然后延时δ，施加一个质子180度硬脉冲，之后施加一个系统自带1～2ms的SMSQ10.100梯度场脉冲；设置化学位移和J耦合演化时间Δ的值为1.4～2.1毫秒；t₁为F1维对应的X核化学位移演化时间，其初始值为0.1～0.15毫秒；t₂为F2维对应的质子化学位移演化时间，其初始值为0.15～0.2毫秒；设置演化时间δ的值为1～2毫秒；设置TOCSY自旋锁定组合脉冲混合时间20～150毫秒，三维采样点数分别为400～1024、40～120和48～128，扫描次数16～64，空扫次数16～64，扫描时间间隔为1～2秒，然后开始采集核磁共振信号，在采样期间对X核进行Garp组合脉冲去耦；4)将所采集的时域信号进行三维傅立叶变换得到三维HSQC‑TOCSY核磁共振谱，调整三维的相位为纯吸收线形。