[发明专利]一种人胎盘亚全能干细胞的分离方法在审

专利信息
申请号: 201910457902.0 申请日: 2019-05-29
公开(公告)号: CN110172441A 公开(公告)日: 2019-08-27
发明(设计)人: 宋丽霞;胡燕;张潇;李彬;刘伟 申请(专利权)人: 内蒙古银宏干细胞生命科技投资有限公司
主分类号: C12N5/073 分类号: C12N5/073
代理公司: 深圳市威世博知识产权代理事务所(普通合伙) 44280 代理人: 刘彩霞
地址: 010070 内蒙古自治区呼和浩*** 国省代码: 内蒙古;15
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摘要: 发明公开了一种人胎盘亚全能干细胞的分离方法,包括S1.羊膜样品制备;S2.羊膜试样制备;S3.酶解;本方案流程短,工序简单,而且在羊膜试样制备步骤中,采用分区剥离羊膜的方式,羊膜不易碎,一方面规则的羊膜便于后续的冲洗、去凝血和胶状物、一次酶解和二次酶解作业,另一方面分区剥离羊膜的方式能够确保羊膜取干净,保证了人胎盘亚全能干细胞的收得率。本方案分区剥离的羊膜规则整齐,便于清理,羊膜上的凝血和胶状物清理干净,保证了酶解效果;而且清理后的羊膜试样采用两次酶解,第一次酶解去除羊膜上的杂细胞,因此无需再使用Ficoll淋巴细胞分离液分离,也能得到纯度较高的人胎盘亚全能干细胞。
搜索关键词: 羊膜 亚全能干细胞 人胎盘 试样制备 剥离 分区 胶状物 次酶 凝血 淋巴细胞分离液 易碎 二次酶解 方案流程 酶解效果 样品制备 一次酶解 收得率 杂细胞 再使用 冲洗 酶解 去除 保证 整齐
【主权项】:
1.一种人胎盘亚全能干细胞的分离方法,其特征在于,包括如下步骤:S1.羊膜样品制备;S2.羊膜试样制备;S3.酶解;其中:所述S1.羊膜样品制备:将待取羊膜的胎盘盘面分为规则的区域,而后揭起羊膜并按照分好的区域裁剪,得到规则的羊膜样品;所述S2.羊膜试样制备:将所述羊膜样品用pH=7.2‑7.4的磷酸盐缓冲液冲洗,并用镊子和细胞刮处理羊膜样品上的凝血和胶状物,待羊膜样品呈半透明状,得到羊膜试样;所述S3.酶解,将羊膜试样酶解,制得人胎盘亚全能干细胞。
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