[发明专利]一种促进地衣芽胞杆菌高产聚谷氨酸钠的方法有效
申请号: | 201910334193.7 | 申请日: | 2019-04-24 |
公开(公告)号: | CN109988788B | 公开(公告)日: | 2022-11-15 |
发明(设计)人: | 陈守文;李鑫;周梦林;占杨杨;郑新驰;钟良邦;杨欢;陈建刚 | 申请(专利权)人: | 武汉骏安生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P13/02 | 分类号: | C12P13/02;C12R1/10 |
代理公司: | 武汉天领众智专利代理事务所(普通合伙) 42300 | 代理人: | 王能德 |
地址: | 430075 湖北省武汉市东湖开发区高新大道666*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | 本发明涉及发酵工程领域,具体涉及一种通过控制亚硝酸盐积累来促进地衣芽胞杆菌高产聚谷氨酸钠的方法。该方法以地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis)为出发菌株,通过菌种活化和种子培养,将菌种接入发酵培养基中,初始培养基中不含有硝酸钠,而是在发酵过程中,采用恒速流加和pH反馈流加的方式补加硝酸钠溶液,从而避免发酵过程中亚硝酸盐的积累,确保地衣芽胞杆菌正常代谢(粗)甘油,促进聚谷氨酸钠合成。本发明的方法采用(粗)甘油为发酵原料,并使用硝酸钠部分替代谷氨酸,降低了发酵成本,同时也为微生物代谢硝酸盐产生亚硝酸盐的发酵问题提供一种新的解决策略。 | ||
搜索关键词: | 一种 促进 地衣 杆菌 高产 谷氨酸 方法 | ||
【主权项】:
1.一种促进地衣芽胞杆菌高产聚谷氨酸钠的方法,其特征在于,以地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis)为出发菌株,通过液体深层发酵制备,包括如下步骤:步骤1、菌种活化:取地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis)原始菌株接种于LB固体培养基上,37℃培养12‑18h,制备活化后的单菌落;步骤2、种子培养:将步骤1活化的单菌落接种于种子培养基中,37℃,摇床转速220rpm培养至对数生长期,得到聚谷氨酸钠种子液;步骤3、液体发酵:按照发酵培养基体积计,将步骤2的种子液以1.5%的接种量接种于发酵培养基中培养24‑66.5h,发酵温度28‑40℃,通风量0.5‑1.5vvm,搅拌转速300‑700rpm;在发酵至0‑24h后,开始补加流加硝酸钠溶液至补加硝酸钠的总浓度至10g/L。
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