[发明专利]一种双水相体系分离纯化蛋白质的方法

摘要

本发明涉及天然产物的分离提纯技术领域，具体涉及一种双水相体系分离纯化蛋白质的方法，包括以下步骤：A、双水相体系萃取蛋白质：将低共熔溶剂和含有蛋白质的无机盐水溶液混合均匀，然后离心得到液‑液两相体系，收集下相萃取液；B、反萃取蛋白质：将步骤A中的下相萃取液用水稀释后离心得到液‑固两相体系；C、蛋白质纯品制备：将步骤B中的固相用水溶解，并进行超滤离心后冷冻干燥，即得蛋白质纯品；其中，所述步骤A中，低共熔溶剂由季铵盐和六氟异丙醇配制而成。本发明采用基于HFIP的DES‑盐双水相体系，DES相易于收集，对蛋白质的萃取率和反萃取率高，蛋白质纯度高，蛋白质结构和活性均得到保持；操作简便。

主权项

1.一种双水相体系分离纯化蛋白质的方法，其特征在于，包括以下步骤：A、双水相体系萃取蛋白质：A1、取待分离纯化蛋白质的样品，用无机盐水溶液溶解或稀释，混匀得到混合溶液；A2、将低共熔溶剂和步骤A1中的混合溶液混合均匀，然后离心得到液‑液两相体系，收集下相萃取液；B、反萃取蛋白质：B1、将步骤A2中的下相萃取液用水稀释，混合均匀后离心得到液‑固两相体系；C、蛋白质纯品制备：C1、将步骤B1中的固相用水溶解，并进行超滤离心，除去残留的低共熔溶剂组分和无机盐，得到蛋白质溶液；C2、将步骤C1中的蛋白质溶液冷冻干燥，即得蛋白质纯品；其中，所述步骤A2中，低共熔溶剂由季铵盐和六氟异丙醇配制而成。