[发明专利]一种经济高效的淡水鱼类DNA提取方法在审
申请号: | 201910259260.3 | 申请日: | 2019-04-02 |
公开(公告)号: | CN110079519A | 公开(公告)日: | 2019-08-02 |
发明(设计)人: | 黄艳伟;余炎炎;刘影 | 申请(专利权)人: | 信阳学院 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 464000 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | 本发明公布了一种淡水鱼类DNA的经济、高效提取方法,包括以下步骤:(1)取样(2)样品消化(3)消化好的样品离心去沉淀;(4)加入苯酚温和的混匀两相后离心;(5)转移上清液加入酚氯仿后离心;(6)转移上清液氯仿异戊醇后离心;(7)取上清加入醋酸钠无水乙醇后离心,弃上清;(8)加入70%乙醇洗脱后离心弃上清液。将试管在室温下自然干燥;(9)溶解DNA,保存备用。本发明在传统提取动物DNA的方法基础上对操作步骤进行优化,极大地节省了在淡水鱼类肌肉中提取DNA的成本,该方法经济、高效、稳定性好,可广泛应用于分子鉴定、各种PCR扩增所需的各种淡水鱼类DNA。 | ||
搜索关键词: | 淡水鱼类 上清液 氯仿 传统提取 分子鉴定 高效提取 无水乙醇 样品消化 乙醇洗脱 动物DNA 提取DNA 醋酸钠 异戊醇 试管 苯酚 混匀 两相 取样 备用 沉淀 肌肉 溶解 消化 保存 应用 优化 | ||
【主权项】:
1.一种经济高效的淡水鱼类DNA提取方法,包括以下步骤:(1)剪取豆粒大小的肌肉组织,用超纯水洗净肌肉上沾附的酒精,充分剪碎,放入1.5mL离心管中;(2)向离心管中加入500μl的裂解液和5μl的蛋白酶K,在55℃水浴锅中消化至少3小时,每隔10分钟左右摇动一次,直至溶液澄清透明;(3)将消化好的样品离心5分钟(5000rpm,4℃)使沉淀除去,取上清液移至新的管中。
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