[发明专利]基于单量子点的纳米传感器检测人烷基糖基化酶的方法

摘要

本公开提供了基于单量子点的纳米传感器检测人烷基糖基化酶的方法，hAAG引发发夹探针裂解产生触发探针，触发探针与AP探针杂交，在APE1酶的作用产生裂解释放出触发探针，并获得引物，释放的触发探针继续与AP探针杂交APE1的辅助下形成循环裂解，从而获得大量引物，获得引物与捕获探针杂交后，通过聚合将改性脱氧核糖核苷三磷酸聚合至双链DNA中，双链DNA通过生物素与单量子点的链霉亲和素的结合，使双链DNA自组装至单量子点的表面，然后经过激发后使Cy5产生荧光共振能量转移，并通过荧光显微镜测量。本公开提供的方法能够实现对hAAG的超灵敏检测。

主权项

1.一种基于单量子点的纳米传感器，其特征是，包括发夹探针、AP探针、捕获探针、改性单量子点、APE1酶、改性脱氧核糖核苷三磷酸；所述发夹探针为茎‑环结构的单链DNA，茎结构的一条互补链修饰次黄嘌呤，茎结构中次黄嘌呤至末端序列为能够与AP探针配对杂交的触发探针；所述AP探针为含有AP位点的单链DNA，所述AP位点位于能够与触发探针互补的AP探针的序列中，AP位点至AP探针末端的序列为能够与捕获探针配对杂交的引物；所述捕获探针为一个末端修饰有生物素的单链DNA，捕获探针长度高于引物的长度，所述捕获探针分为两部分序列，一部分序列为能够与引物配对杂交的序列，另一部分序列中含有若干能够与改性脱氧核糖核苷三磷酸的位点，生物素修饰在另一部分序列的末端；所述改性脱氧核糖核苷三磷酸为修饰有Cy5的一种脱氧核糖核苷三磷酸；所述改性单量子点为表面修饰链霉亲和素的单量子点。