[发明专利]一种测定饲料中不同价态铁离子含量的方法

摘要

本发明公开了一种测定饲料中不同价态铁离子含量的方法，采取硫代硫酸钠对铜离子进行掩蔽，用盐酸羟胺将饲料中的三价铁离子还原为二价铁离子，在pH=6和室温条件下亚铁离子与菲咯嗪络合形成稳定性好的紫色络合物，反应30分钟，通过酶标仪在562 nm处进行检测，结合绘制标准曲线，快速、高通量计算出饲料中不同价态铁离子的含量，无需复杂的样品前处理和贵重仪器，非常适合于在基层实验室推广使用。

主权项

1.一种测定饲料中不同价态铁离子含量的方法，其特征在于，其测定步骤如下：（1）配制溶液A₁液：菲咯嗪总铁工作溶液，包括4.0 mM菲咯嗪溶液、0.1M盐酸羟胺溶和0.1 M硫代硫酸钠溶液，缓冲液为pH=6的醋酸溶液；A₂液：菲咯嗪亚铁工作溶液，包括4.0 mM菲咯嗪溶液和0.1 M硫代硫酸钠溶液，缓冲液为ph=6的醋酸溶液；B液：空白溶液，0.2M 醋酸缓冲溶液；C液：铁标准溶液0、0.1、0.5、1、2、4、6、8μg/mL，分别为C1‑C8铁标准液；（2）样品前处理将饲料样品经粉碎后与1%‑4%的三氯乙酸溶液混合，比例为1:100（g/ml），振摇5分钟，超声提取15‑30分钟，通过定量滤纸过滤或离心得到上清液进行测定；（3）检测标准曲线组：酶标板孔中每孔加入不同浓度的C1‑C8铁标准液，随后每孔加入等量的A1液；样品组：每个样品测定需两组酶标板孔，一组测定孔中先加样品液，再加等量 A1液，另一组测定孔中先加样品液，再加等量A2液；将样品组与标准曲线组进行颜色比对，对铁离子浓度进行半定量检测。