[发明专利]一种荆半夏组织培养快速繁殖方法

摘要

本发明提供了一种荆半夏组织培养快速繁殖方法，包括如下步骤：(1)培养基的配制；(2)外植体的选择；(3)诱导获得愈伤组织；(4)愈伤组织增殖培养；(5)愈伤组织分化培养；(6)加速培养；(7)壮苗培养；(8)炼苗移栽。本发明采用特制的培养基及通过对愈伤组织进行液体培养十天，体积和重量增大300％，愈伤组织质量较好；当固体培养基出现绿色芽点时，再次转入液体培养基时，经过十天培养，愈伤组织分化，出现大量根系和芽点，体积和重量明显增大；然后转移至固体培养基上，根系继续增长，芽点继续发育，形成大量叶片，15d即可形成完整的半夏植株，繁殖系数达到20以上，生根率达95％以上，移栽成活率在99％以上。

主权项

1.一种荆半夏组织培养快速繁殖方法，其特征在于，具体包括如下步骤：步骤1、培养基的配制：基本培养基：用MS培养基，蔗糖或白糖20～30g/L，琼脂7～9g/L，pH5.6～5.8；诱导培养基：MS+2,4‑D 0.4～0.6mg/L+6‑BA 0.4～0.6mg/L+NAA 0.1～0.3mg/L+琼脂0.7mg/L+蔗糖30g/L，pH5.8；愈伤组织增殖培养基：MS+2,4‑D 0.4～0.6mg/L+6‑BA 0.8～1.2mg/L+NAA 0.1～0.3mg/L+葡萄糖30g/L，pH5.8；愈伤组织分化培养基：MS+2,4‑D 0.4～0.6mg/L+6‑BA 0.8～1.2mg/L+NAA 0.1～0.3mg/L+琼脂0.7mg/L+蔗糖30g/L，pH5.8；或者为MS+TDZ 0.5mg/L+琼脂0.7mg/L+蔗糖30g/L，pH5.8；液体加速培养基：MS+2,4‑D 0.4～0.6mg/L+6‑BA 0.8～1.2mg/L+NAA 0.1～0.3mg/L+葡萄糖30g/L，pH5.8；固体壮苗培养基：MS+2,4‑D 0.4～0.6mg/L+6‑BA 0.8～1.2mg/L+NAA 0.1～0.3mg/L+葡萄糖30g/L，pH5.8；步骤2、外植体的选择：取半夏的种子，经灭菌处理，催芽，取其茎段作为脱毒组培用的外植体；步骤3、培养基诱导获得愈伤组织：将外植体置于诱导培养基中诱导得到愈伤组织；步骤4、愈伤组织增殖培养：将步骤3得到的愈伤组织切成块，置于愈伤组织增殖培养基中进行增殖培养获得大量愈伤组织；步骤5、愈伤组织分化培养：将步骤4中得到的愈伤组织置于愈伤组织分化培养基中进行分化培养获得大量绿色丛芽；步骤6、加速培养：将带有绿色丛芽的愈伤组织置于液体加速培养基培养初步分化好的半夏幼苗；步骤7、壮苗培养：将步骤6得到的初步分化好的半夏幼苗置于固体壮苗培养基中培养形成高度5cm以上的组培苗；步骤8、炼苗移栽：将所述组培苗的根系冲洗干净，栽培于草炭土上培养。