[发明专利]一种检测抗肾小球基底膜抗体的方法在审
| 申请号： | 201811643156.6 | 申请日： | 2018-12-29 |
| 公开（公告）号： | CN109738649A | 公开（公告）日： | 2019-05-10 |
| 发明（设计）人： | 陆上苏 | 申请（专利权）人： | 镇江金太医学检验实验室有限公司 |
| 主分类号： | G01N33/68 | 分类号： | G01N33/68 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 212016 江苏省镇*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种检测抗肾小球基底膜抗体的方法，包括如下步骤：先纯化处理抗肾小球基底膜抗原；然后，将纯化后的抗原置于前处理液中；接着，用包被缓冲液稀释抗肾小球基底膜抗原后加入酶标板中，至于适宜环境中孵化然后洗板；再加入封闭液，然后至于适宜温度下封闭0.5‑4h小时，然后洗板；然后，将酶标抗体进行稀释后，与待检血清进行稀释后加入孔内；最后加入显色液，然后每孔加入终止液终止反应。本发明提供的方法证明抗肾小球基底膜抗体经过纯化处理后，再用前处理液处理，测试结果显示诊断的灵敏度和特异性均显著提升。 | ||
| 搜索关键词： | 肾小球基底膜 抗原 稀释 抗体 纯化处理 前处理液 种检测 洗板 测试结果显示 包被缓冲液 酶标抗体 封闭液 灵敏度 酶标板 显色液 终止液 血清 孵化 诊断 封闭 | ||
【主权项】：
1.一种检测抗肾小球基底膜抗体的方法，包括如下步骤：抗原纯化：纯化处理抗肾小球基底膜抗原，将纯化后的抗原置于PH=6.0‑7.2的缓冲溶液中，在适宜环境中静置30分钟以上，获取纯化后的抗原；抗原前处理：将步骤a中纯化后的抗原置于前处理液中，将其置于适宜的温度中处理至少两小时；抗原包被：用包被缓冲液稀释抗肾小球基底膜抗原至1‑10ug/ml，以每孔50‑100ul加入酶标板中，至于适宜环境中孵化至少30分钟，然后洗板；封闭：以每孔150‑200μL的量加入封闭液，然后至于适宜温度下封闭0.5‑4h小时，然后洗板；酶标抗体：将酶标抗体进行稀释后，与待检血清进行1 ∶10‑20稀释后，每孔加入50‑100μL，在适宜温度下静置，然后洗板；显色：每孔加入显色液，然后每孔加入终止液终止反应。
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