[发明专利]一种植物样品中内源性磷酸糖类化合物的前处理方法及定量检测方法

摘要

本发明公开了一种植物样品中包括内源性海藻糖‑6‑磷酸在内的多种磷酸糖类化合物的分析方法。该方法先以溶剂提取内源性磷酸糖，之后用反相SPE小柱吸附并除去提取液中的疏水性杂质，再利用衍生化试剂中的重氮基团与磷酸糖类化合物共有的磷酸基团发生衍生化反应，结合液相色谱‑质谱，实现了植物样品中内源性磷酸糖同分异构体的分离检测。该方法简单、准确、高通量，既能实现磷酸糖同分异构体在亲水色谱柱上的基线分离，又能保证较高的检测灵敏度，最终可实现在微量植物组织样品中内源性磷酸糖的分离检测。

主权项

1.一种植物样品中内源性磷酸糖类化合物的前处理方法，其特征在于主要包括以下步骤：1)在植物样品中定量加入磷酸糖的同位素内标，然后以溶剂提取，得到植物样品提取溶液；2)将步骤1)所得植物样品提取溶液用氮气吹干，之后用硼酸缓冲溶液复溶，所得复溶溶液通过SPE小柱并收集流出液；3)向步骤2)所收集的流出液中加入重氮衍生化试剂进行化学衍生，实现对磷酸糖化合物的衍生标记，之后经振荡、离心后，得到上清液，即完成对植物样品中内源性磷酸糖类化合物的前处理，所述上清液直接用于高效液相色谱‑串联质谱进行分析检测。