[发明专利]一种金针菇培育中霉菌检测方法

摘要

本发明提供了一种金针菇培育中霉菌检测方法,本发明将柠檬皮和韭黄混合液、甘蔗、小米粉、南瓜、氯化钠、蚕蛹粉、酵母粉、番茄提取液、多效唑粉、防落素粉、壳聚糖、碳酸镁、海藻糖、纳米碳酸钙，月桂醇磺酸钠，诱导剂H‑Pen，按照重量份的多效唑粉和重量份的防落素粉加入所述水溶液中溶解本发明提供的金针菇培育中霉菌检测方法，通过在培养基中增加霉菌的诱发剂，并且，在培育过程中控制压力与温度的关系，并在对金针菇培育过程中，控制自然光与人工光，以获取霉菌的测定结果。通过采用本发明的测定方法，并未降低金针菇的培育效果。

主权项

1.一种金针菇培育中霉菌检测方法，其特征在于，包括：步骤a：选取新鲜柠檬剥皮后，每个柠檬皮片重量在2‑3g之间，在3％的氯化钠溶液中浸泡3‑4d，晾干，粉碎成粉末状，备用；步骤b：选取新鲜韭黄，裁剪为长度为0.5‑1cm的小段，与上述粉末状的柠檬皮份混合，搅拌均匀，加10倍重量的水，在25‑40℃的渐升温度下，振荡，静置；步骤c：选取无虫害、无病害的甘蔗，每根甘蔗的直径为2‑2.5cm，长度为2.2‑2.5m，清洗表面后，切成大小为2‑3cm的均匀圆柱状切段，以反渗透膜包裹后，在1％聚维酮碘溶液中浸泡2‑4小时；在种植期间和收获后分别用浸泡和注射器注射的方法向甘蔗中注入维生素A和维生素E混合液20‑40mL；步骤d：将上述制备的柠檬皮和韭黄混合液、甘蔗、小米粉、南瓜、氯化钠、蚕蛹粉、酵母粉、番茄提取液、多效唑粉、防落素粉、壳聚糖、碳酸镁、海藻糖、纳米碳酸钙，月桂醇磺酸钠，诱导剂H‑Pen，按照重量份的多效唑粉和重量份的防落素粉加入所述水溶液中溶解，在75‑95℃的反应罐中持续加热，反应罐压力在0.7‑1MPa，湿度为25‑30％，二氧化碳浓度在12‑15％，并采用紫外灯照射45‑50min，静置10‑12小时,得到培养基原液；在上述步骤d中，反应罐按照下述反应罐压力与加热温度的关系进行压力控制，其中，在第一温度段，在75‑80℃温度范围内：式中，p₁表示第一温度段的实时压力值，T表示第一温度段内的实时温度，T₀表示参考预设温度值，温度为75℃，m表示加入的混合液中的韭黄重量，M表示加入的混合液中的柠檬皮的质量，c表示混合液的比热，P₀表示第一温度段的预设压力值，其为0.7MPa；其中，在第二温度段，在80‑85℃温度范围内：式中，P₂表示第二温度段的实时压力值，T表示第二温度段内的实时温度，T₁₀表示参考预设温度值，恒温温度为80℃，m表示加入的混合液中的韭黄重量，M表示加入的混合液中的柠檬皮的质量，c表示混合液的比热，P₁₀表示第二温度段的预设压力值，其为0.8MPa；升温至85℃时，在85‑95℃温度范围内：式中，P₃表示第三温度段的实时压力控制值频率，T表示第三温度段内的实时温度，T₂₀表示参考预设温度值，温度为95℃，c表示混合液的比热，P₂₀表示第一温度段的预设压力值，其为0.9MPa；其中，在降温过程中，在75‑95℃温度范围内：式中，P₄表示第四温度段的实时压力值，T表示第四温度段内的实时温度，c表示混合液的比热，m表示加入的混合液中的韭黄重量，M表示加入的混合液中的柠檬皮的总质量，P₃₀表示第四温度段的预设压力值，其0.8MPa；步骤e：将步骤d制作好的基质装入菌瓶，装瓶过程中每个菌瓶内的基质要均匀，周围无空隙，其重量控制在1.6‑2.0Kg，菌瓶装好后，将瓶口及其四周清理干净，封口放入设备中在100℃下恒温灭菌12‑18h，灭菌后的菌瓶移入接种反应罐内，待菌瓶温度下降到25℃以下；步骤f：菌种培养：将步骤e中所得菌瓶悬挂在反应罐内，保持反应罐温度为20‑25℃，空气湿度≤75％，每隔3‑5h开启紫光灯全方位的照射菌瓶10‑20min,同时辅以红外辐射，直至菌丝发满瓶菌，使菌丝暴露出来接受阳光照晒，并间断性喷水，直至金针菇长大为止；在上述步骤f中，在菌种培养3‑4天的时间时，打开菌瓶，取出10g待测菌种置于125ml生理盐水中，所述生理盐水预先盛装在第一无菌均质袋中，并将所述待测样品在转速为10000r/min的条件下进行第一均质处理1分钟；取第一均质处理后样品10g置于第二无菌均质袋中，并向第二无菌均质袋中加入15ml孟加拉红培养基，并对所述第一均质处理后样品在转速为8000r/min的条件下进行第二均质处理1分钟；将所得的第二均质处理后样品进行刮涂处理，并在27～29℃下培养5天，对所述待测样品中霉菌的含量进行测定。