[发明专利]一种栗子的组织培养技术

摘要

本发明公开了一种栗子的组织培养技术，栗子又名板栗，我国东此、华南、华北、西南、西北有产。其中北京的延庆盛产，培育催芽有的要用水浸透催芽，有的用物理手段打启种子，有些要经过发酵或者鸡采食后排出的排泄物浸泡发芽。涉及栗子通过离体快繁技术获得优质种苗的育苗方法，以栗子带芽茎段为外植体，经过外植体消毒、丛生芽诱导、生根培养、炼苗移栽等过程从而建立了栗子组织培养快速繁殖体系，加速栗子良种的推广和资源开发利用具有重要的现实意义。

主权项

1.一种栗子的组织培养技术，其特征在于包括以下步骤：步骤1，丛生芽诱导：选取生长健壮无病虫的幼树当年生的带芽茎段作为外植体,用洗洁精水溶液浸泡16min，然后用自来水冲洗42min，擦干表面水分后备用,在超净工作台中以70%乙醇浸泡18s，0.1%升汞溶液消毒35min，再用无菌水清洗10次，擦干后切成长度为2cm的茎段接种到诱导培养基上,先在30℃条件下全暗培养32天，然后置于每天光照18小时，光照强度为1200lx，培养温度为30℃条件下培养，直至诱导形成丛生芽；诱导培养基为：MS+6mg/L6‑BA+2mg/L NAA+0.9mmol/L La(NO3)2+4.9%蔗糖+1.2%琼脂+0.25%活性炭，pH值为5.8;步骤2，增殖培养：将步骤1所得的丛生芽转入增殖培养基上进行增殖培养，接种后先在30℃条件下全暗培养直至叶腋处萌生一个侧芽，然后置于每天光照18小时，光照强度为1200lx，培养温度为30℃的条件下培养直至各丛生芽伸长到8cm；增殖培养基为：MS+3mg/L6‑BA+0.9mg/L NAA+4.1%蔗糖+0.9%琼脂+0.4%活性炭，pH值为5.8;步骤3，生根培养：将步骤1或步骤2所获得的高度约为6cm的丛生芽芽切割并接种到生根培养基上进行生根培养，接种后先在30℃条件下全暗培养12天，然后置于每天光照18小时，光照强度为2100lx，培养温度为30℃的条件下培养至生根；生根培养基为：1/2MS+4mg/L NAA+4.5%蔗糖+1.1%琼脂+0.3%活性炭，pH值为5.8;步骤4，炼苗移栽：栗子瓶内生根35天后，置于自然光照下炼苗12天后，洗净根部培养基，移栽由黄心土：河沙＝3：1混合成的基质中。